环境工程微生物学.ppt
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1、第二章第二章 原核微生物原核微生物草履虫草履虫1 细菌细菌1.1 细菌的形态与大小细菌的形态与大小球状w球菌细胞个体呈球形或椭圆形,不同种球菌细胞个体呈球形或椭圆形,不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式,常被作为分类依据。分有:排列方式,常被作为分类依据。分有:单球菌、双球菌(肺炎球菌)、四联球单球菌、双球菌(肺炎球菌)、四联球菌、八叠球菌(甲烷球菌)、链球菌、菌、八叠球菌(甲烷球菌)、链球菌、葡萄球菌。葡萄球菌。双球菌 四联球菌八叠球菌 链球菌 葡萄球菌 杆状杆状w细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细(直径)比较稳定,而长
2、度则常因培(直径)比较稳定,而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。养时间、培养条件不同而有较大变化。w分有:单杆菌、双杆菌、球杆菌和链分有:单杆菌、双杆菌、球杆菌和链杆菌。杆菌。单杆菌双杆菌链杆菌球杆菌炭疽病的病原菌炭疽病的病原菌 -炭疽杆菌炭疽杆菌螺旋菌螺旋菌 w螺旋菌呈螺旋卷曲状,螺纹不满一圈的称为弧菌。螺旋菌呈螺旋卷曲状,螺纹不满一圈的称为弧菌。弧菌弧菌螺旋菌螺旋菌螺旋体菌螺旋体菌弧菌:菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,弧菌:菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,形似形似“C”字或逗号,鞭毛偏端生。字或逗号,鞭毛偏端生。蛭蛭弧弧菌菌霍乱弧菌霍乱弧菌螺旋菌:螺旋菌:菌体回转如螺旋,螺
3、菌体回转如螺旋,螺旋数目和螺距大小因旋数目和螺距大小因种而异。鞭毛二端生种而异。鞭毛二端生细胞壁坚韧,菌体较细胞壁坚韧,菌体较硬。硬。螺旋体菌:螺旋体菌:菌体柔软,用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘菌体柔软,用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内。内。梅毒密螺旋体梅毒密螺旋体细菌的大小细菌的大小细菌的大小测量单位是细菌的大小测量单位是m大小的测量方法大小的测量方法显微镜测微尺显微镜测微尺显微照相后根据放大倍数进行测算显微照相后根据放大倍数进行测算 球菌:用直径表示,球菌:用直径表示,2.0 um 表示方法表示方法 杆菌:宽杆菌:宽长,长,1.0)(15)um 螺旋菌:宽螺旋菌:宽长,长,1.
4、7)(260)um另外,细菌的大小与个体的发育情况有另外,细菌的大小与个体的发育情况有关,刚分裂的新细菌小,随发育逐渐变关,刚分裂的新细菌小,随发育逐渐变大,老化后又变小。大,老化后又变小。菌 名 直径或宽长度(m)乳链球菌(Streptococcus lactis)0.51金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)0.8 1最大八叠球菌(Sarcina maxima)4 4.5大肠杆菌(Escherichia coli)0.5 (1 3)伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)(0.6 0.7)(2 3)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(0.8 1
5、.2)(1.2 3)炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)(1 1.5)(4 8)德氏乳细菌(Lactobacterium delbruckii)(0.4 0.7)(2.8 7)表表1.1 1.1 一些细菌的大小一些细菌的大小鞭毛菌毛芽孢微荚膜荚膜粘液层特殊构造细胞壁细胞膜间体核区内含物一般构造细菌细胞的结构细菌细胞的结构细胞质细胞壁细胞壁1)概念:)概念:细胞壁(细胞壁(cell wall)是位于细胞表面,内侧紧贴细胞膜的)是位于细胞表面,内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧,略具弹性的细胞结构。一层较为坚韧,略具弹性的细胞结构。细菌细胞的一般结构表1.2 G和G细胞壁的主要区别wG
6、细胞壁厚(2080nm)化学组成:a 肽聚糖b 磷壁酸c 少量蛋白质和脂肪 2)细胞壁的化学组成与结构)细胞壁的化学组成与结构wG 细胞壁较薄(10nm)外层:脂多糖 外壁层 中层:磷脂层 内层:脂蛋白 内壁层:肽聚糖(10)细胞壁的结构(G+细菌与G细菌细胞壁构造的比较)革兰氏阳性细菌(G+)革兰氏阴性细菌(G)肽聚糖肽聚糖外膜w1.保护原生质体免受渗透压引起的破裂作用;保护原生质体免受渗透压引起的破裂作用;w2.维持细菌的形态。溶菌酶处理不同形态的菌维持细菌的形态。溶菌酶处理不同形态的菌体细胞壁后,菌体均呈球状。体细胞壁后,菌体均呈球状。w3.细胞壁为多孔结构的分子筛,可以阻挡某些细胞壁为
7、多孔结构的分子筛,可以阻挡某些分子的进入。分子的进入。w4.细胞壁为鞭毛提供支点,使鞭毛运动。细胞壁为鞭毛提供支点,使鞭毛运动。3)细菌细胞壁功能)细菌细胞壁功能细菌细胞的特殊结构某些细菌壁外存在着一层厚度不定的胶状物质。某些细菌壁外存在着一层厚度不定的胶状物质。荚膜荚膜 H H2 2O O(90909898)多糖或多肽多糖或多肽1)定义)定义2)化学组成)化学组成负染色法又称衬托法 1.1.先染菌体。先染菌体。2.2.再将背景染成黑色。再将背景染成黑色。在菌体及背景的衬托下,二在菌体及背景的衬托下,二者之间会出现透明区,就是荚膜,者之间会出现透明区,就是荚膜,在显微镜下清晰可见。在显微镜下清
8、晰可见。1.1.具有荚膜的具有荚膜的S-S-型肺炎链球菌毒力强,有助于侵型肺炎链球菌毒力强,有助于侵入人体。入人体。2.2.具有保护功能。免受噬菌体的吞噬;免受干燥具有保护功能。免受噬菌体的吞噬;免受干燥影响。影响。3.3.当缺乏营养时,可作为碳源和能源,有的可作当缺乏营养时,可作为碳源和能源,有的可作氮源。氮源。4.4.具有生物吸附作用。在污水生物处理中可将水具有生物吸附作用。在污水生物处理中可将水中的有机物吸附到菌体上。中的有机物吸附到菌体上。3)功能)功能粘液层粘液层有些细菌不产生荚有些细菌不产生荚膜,膜,仍分泌粘液的仍分泌粘液的多糖,其疏松多糖,其疏松的粘的粘附在菌体细胞壁表附在菌体细
9、胞壁表面上,与外界没有面上,与外界没有明显的边缘。明显的边缘。在污水处理中也有在污水处理中也有一定的生物吸附功一定的生物吸附功能。能。菌胶团菌胶团有些细菌由于遗传特性,细菌有些细菌由于遗传特性,细菌按一定的方式互相粘结在一起,按一定的方式互相粘结在一起,并被一个公共的荚膜包围形成并被一个公共的荚膜包围形成一定形状的细菌集团一定形状的细菌集团,称作菌,称作菌胶团。胶团。形状有:蘑菇形、分支状、球形状有:蘑菇形、分支状、球形等。见课本形等。见课本P30P30图。图。在污水处理中也有一定的生物在污水处理中也有一定的生物吸附功能。吸附功能。细菌的特殊结构芽孢芽孢 某些细菌在其生长发育后期或遇到不良环某
10、些细菌在其生长发育后期或遇到不良环境时,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、境时,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。含水量极低、抗逆性极强的休眠体。所有的芽孢都可以抵挡外界不良环境。它所有的芽孢都可以抵挡外界不良环境。它是抵挡外界不良环境的是抵挡外界不良环境的休眠体。休眠体。枯草杆菌芽孢的超薄切片电镜照片(标尺:)枯草杆菌芽孢的超薄切片电镜照片(标尺:)左:端位;中:近端位;右:中央位左:端位;中:近端位;右:中央位,细菌芽孢的各种类型细菌芽孢的各种类型细菌芽孢的特点整个生物界中抗逆性最强的生命体,是否能消灭整个生物界中抗逆性最强的生命体,是否能消灭芽孢是衡量
11、各种消毒灭菌手段的最重要的指标。芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。芽孢是细菌的休眠体,在适宜的条件下可以重新芽孢是细菌的休眠体,在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞转变成为营养态细胞含水率低,含水率低,3840芽孢壁厚而致密芽孢壁厚而致密 DPA含量高,具有耐热性含量高,具有耐热性含有耐热性酶含有耐热性酶 是一条由细胞质膜上的鞭毛基粒长出,穿过细胞壁是一条由细胞质膜上的鞭毛基粒长出,穿过细胞壁伸向体外的纤细的波浪状的丝状物。伸向体外的纤细的波浪状的丝状物。蛋白质,少量的多糖或多肽蛋白质,少量的多糖或多肽 细菌的特殊结构鞭毛1)概念)概念2)化学组成)化学组成3)分类)分类4)功能)
12、功能偏端单生两端单生周生鞭毛如:荧光假单胞如:荧光假单胞如:鼠咬热螺旋体如:鼠咬热螺旋体偏端丛生如:丁香假单胞如:丁香假单胞两端丛生如:红色螺菌如:红色螺菌如:大肠杆菌如:大肠杆菌 根据鞭毛的数量和排列情况,细菌分为以下五种类型:运动运动鞭毛生理功能运动方式:旋转 请说出下面细菌菌体从内到外的结构鞭毛菌毛拟核细胞质细胞质膜细胞壁荚膜cytoplasm思考思考w1)细菌有哪几种形态?举例说明?)细菌有哪几种形态?举例说明?w2)细菌的一般结构和特殊结构是什么?)细菌的一般结构和特殊结构是什么?各具有哪些生理功能?各具有哪些生理功能?w3)革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞)革兰氏阳性菌和革兰氏阴性
13、菌的细胞壁结构有什么异同?各有哪些化学组成壁结构有什么异同?各有哪些化学组成?t菌落特征:细菌在固体培养基上的培养特征。菌落特征:细菌在固体培养基上的培养特征。菌落:由菌落:由一个细菌一个细菌繁殖起来的,由无数细菌组繁殖起来的,由无数细菌组成具有一定形态特征的细菌集团。成具有一定形态特征的细菌集团。培养基培养基:人工配制的供给微生物营养物质的基质人工配制的供给微生物营养物质的基质 固体培养基固体培养基(加入约加入约1-2%的琼脂的琼脂);半固体培养基半固体培养基(加入加入0.5-1%的琼脂的琼脂);液体培养基。液体培养基。细菌的培养特征细菌的培养特征(1 1)固体培养基上的培养特征)固体培养基
14、上的培养特征w菌落的特征菌落的特征是分类鉴定的依据。是分类鉴定的依据。w可以从三方面看菌落的特征:可以从三方面看菌落的特征:(1)菌落的表面特征)菌落的表面特征 光滑光滑or粗糙、干燥粗糙、干燥or湿润湿润(2)菌落的边缘特征)菌落的边缘特征 圆形、锯齿状等圆形、锯齿状等(3)纵剖面的边缘特征)纵剖面的边缘特征 平坦、扁平、隆起等平坦、扁平、隆起等不同种的细菌菌落特征不同种的细菌菌落特征 凝胶状、表面较凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养光滑、湿润、与培养基结合不紧密,易挑基结合不紧密,易挑取,正反颜色一致。取,正反颜色一致。细菌菌落一般特点细菌菌落一般特点 光滑型菌落光滑型菌落肺炎克雷伯氏菌在肺
15、炎克雷伯氏菌在DHL培养基上菌落形态培养基上菌落形态 肺炎球菌在血琼脂平板上菌落肺炎球菌在血琼脂平板上菌落 菌苔菌苔v(1 1)定义定义纯种菌体纯种菌体在在固体固体培养培养基上生长繁殖时形成基上生长繁殖时形成的的肉眼可见肉眼可见的群体。的群体。菌苔是由菌苔是由许多同种菌许多同种菌的菌落的菌落繁殖形成繁殖形成,连连成一片。成一片。同一菌体的菌苔特征和菌落特征是相同一菌体的菌苔特征和菌落特征是相同的,若有异样,则菌体受污染或变同的,若有异样,则菌体受污染或变异,应分离纯化。异,应分离纯化。菌苔与菌落有什菌苔与菌落有什么不同?么不同?(2)(2)明胶培养基中的培养特征明胶培养基中的培养特征 用穿刺接
16、种法将细菌接种在明胶培养基用穿刺接种法将细菌接种在明胶培养基中培养,能产生明胶水解酶水解明胶,不同中培养,能产生明胶水解酶水解明胶,不同的细菌将明胶水解成不同形态的溶菌区,依的细菌将明胶水解成不同形态的溶菌区,依据这些不同形态,可将细菌进行分类。据这些不同形态,可将细菌进行分类。穿刺接种法穿刺接种法(从斜面菌种接入从斜面菌种接入(半半)固体培养基固体培养基):用接种针经火焰灭菌后,挑取少量菌种,垂直地用接种针经火焰灭菌后,挑取少量菌种,垂直地穿入试管固体培养基中心至底部,然后穿刺线缓穿入试管固体培养基中心至底部,然后穿刺线缓慢将针抽出,塞上棉塞。烧红接种针灭菌。慢将针抽出,塞上棉塞。烧红接种针
17、灭菌。细菌在明胶培养基中的培养特征细菌在明胶培养基中的培养特征(3)(3)半固体培养基中的培养特征半固体培养基中的培养特征穿刺接种,根据细菌穿刺接种,根据细菌的生长状态判断细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型和鞭毛有的呼吸类型和鞭毛有无,能否运动。无,能否运动。呼吸类型与培养特征呼吸类型与培养特征(4)(4)液体培养基中的培养特征液体培养基中的培养特征细菌在液体培养基中的培养特征是分类依细菌在液体培养基中的培养特征是分类依据之一。据之一。因细胞特征、比重、运动能力和对氧气等因细胞特征、比重、运动能力和对氧气等关系的不同,而形成不同的群体形态,多数表关系的不同,而形成不同的群体形态,多数表现混浊,部
18、分表现沉淀,好氧细菌则在液面大现混浊,部分表现沉淀,好氧细菌则在液面大量生长,形成菌膜或环状等量生长,形成菌膜或环状等w w在液体中群体细菌的生存形式在液体中群体细菌的生存形式在液体中群体细菌的生存形式在液体中群体细菌的生存形式w w随密度不同随密度不同随密度不同随密度不同w w或者在液体培养基表面形成或者在液体培养基表面形成或者在液体培养基表面形成或者在液体培养基表面形成膜膜(轻)(轻)(轻)(轻)w w使培养液使培养液使培养液使培养液混浊混浊(中)(中)(中)(中)w w或产生絮状或产生絮状或产生絮状或产生絮状沉淀沉淀(粘重,(粘重,(粘重,(粘重,如菌胶团、活性污泥如菌胶团、活性污泥如菌
19、胶团、活性污泥如菌胶团、活性污泥)。)。)。)。细菌的物理化学性质细菌的物理化学性质 w等电点:指在某一定pH溶液中,氨基酸所带的正电荷和负电荷相等时的pH值。w 氨基酸 蛋白质 细菌也具有两性电解质的性质w G pH等23w细菌等电点 G pH等45w pH25 G不稳定菌 pH等34w 偏碱性 pH7w细菌所处 中性 pH7 高于细菌的等电点w培养基 偏酸性 pH67w 故细菌表面总是带负电荷故细菌表面总是带负电荷 (1 1)细菌表面电荷和等电点)细菌表面电荷和等电点(2)(2)细菌的染色原理及染色方法细菌的染色原理及染色方法细菌细胞微小透明,染色后易于观察。细菌细胞微小透明,染色后易于观
20、察。细菌在通常培养情况下总是带负电荷,故细菌在通常培养情况下总是带负电荷,故用带正电的碱性染料染色用带正电的碱性染料染色A A 简单染色简单染色:常用来观察细菌的常用来观察细菌的形态、大小和排列方式形态、大小和排列方式。用用一种染液一种染液染色菌体。一般染色菌体。一般菌体被染上染料的颜色。菌体被染上染料的颜色。B B 复合染色法复合染色法:两种染料两种染料染色,以区别细菌的革兰氏染色染色,以区别细菌的革兰氏染色反应或抗酸性反应,或将菌体和某一结构染成不同颜色。反应或抗酸性反应,或将菌体和某一结构染成不同颜色。常用的染色法有常用的染色法有:革兰氏染色1884年,丹麦医生发明程序:(1)初染(结晶
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