9微生物检验质量控制.pptx

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1、微生物检验的质量控制微生物检验的质量控制温州医学院检验医学院温州医学院检验医学院温州医学院附属第一医院温州医学院附属第一医院周铁丽周铁丽微生物检验的质量控制微生物检验的质量控制质量控制（质量控制（Quality controlQuality control） 是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。室内质量控制室内质量控制 室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。是质量保证的核心和基础。室间质量控制评价室间质量控

2、制评价 室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。构对实验室进行的质量评价。检验前的质量保证检验前的质量保证 检验前程序：又叫分析前期。检验前程序：又叫分析前期。 指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤。启动时终止的步骤。包包 括括 检验申请检验申请 标本的采集、运送与接收标本的采集、运送与接收微生物检验中的质量保证微生物检验中的质量保证 人员的组织与管理人员的组织与管理 规范的操作规程规范的操作规程 试剂试剂 培养基培养基 设备设备 检验过程检验过程 试剂、培养基的质量控制试

3、剂、培养基的质量控制有效期有效期外观外观性能测试性能测试保存保存各种试剂的监控菌种试剂各种试剂的监控菌种试剂“x+v” x+v” 因子试剂因子试剂条条流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌副流感嗜血杆副流感嗜血杆菌菌嗜沫嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌 硝酸盐还原试剂硝酸盐还原试剂大肠埃希菌大肠埃希菌醋酸钙不动杆菌醋酸钙不动杆菌每批，以后每次每批，以后每次靛基质试剂靛基质试剂大肠埃希菌大肠埃希菌产气肠杆菌产气肠杆菌每批，以后每天每批，以后每天甲基红试剂甲基红试剂大肠埃希菌大肠埃希菌产气肠杆菌产气肠杆菌每批，以后每周每批，以后每周V-P试剂试剂产气肠杆菌产气肠杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌每批，以后每周每批，以后每周常用试验、

4、染液的推荐菌株常用试验、染液的推荐菌株 试验名称试验名称阳性对照菌阳性对照菌阴性对照菌阴性对照菌血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验触酶试验金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌肺炎链球菌肺炎链球菌氧化酶试验氧化酶试验铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌大肠埃希菌杆菌肽试验杆菌肽试验A A群链球菌群链球菌B B群链球菌群链球菌奥普托欣试验奥普托欣试验肺炎链球菌肺炎链球菌草绿色链球菌草绿色链球菌革兰染液革兰染液金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌大肠埃希菌抗酸染液抗酸染液结核分枝杆菌结核分枝杆菌混合非抗酸菌混合非抗酸菌测定各种培养基性能的菌种测定各种培养

5、基性能的菌种 培养基培养基 质控菌株质控菌株 判定标准判定标准羊血琼脂平板羊血琼脂平板 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌ATCC25923 ATCC25923 生长生长 生长试验生长试验 大肠埃希菌大肠埃希菌ATCC25922 ATCC25922 生长生长溶血反应溶血反应 肺炎链球菌肺炎链球菌ATCC19615 ATCC19615 生长，生长， 溶血溶血 化脓性链球菌化脓性链球菌ATCC6305 ATCC6305 生长，生长，溶血溶血 杆菌肽敏感（纸片法）杆菌肽敏感（纸片法） 化脓性链球菌化脓性链球菌ATCC6305 ATCC6305 10mm10mm，敏感敏感 B B群链球菌群链球菌 10mm1

6、0mm，耐药耐药OptochinOptochin敏感（纸片法）敏感（纸片法） 肺炎链球菌肺炎链球菌 1518mm1518mm，敏感敏感 涎链球菌涎链球菌 15mm15mm，耐药耐药测定各种培养基性能的菌种测定各种培养基性能的菌种巧克平板巧克平板生长试验生长试验淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌肺炎链球菌肺炎链球菌生长生长SSSS平板平板鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌福志贺菌福志贺菌大肠埃希菌大肠埃希菌 肠球菌肠球菌生长，黑色菌落中心生长，黑色菌落中心生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落部分抑制生长，红色混浊菌

7、落部分抑制生长，红色混浊菌落部分抑制生长部分抑制生长测定各种培养基性能的菌种测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板麦康凯平板 大肠埃希菌生长，大肠埃希菌生长， 红色混浊菌落红色混浊菌落 伤寒沙门菌生长，伤寒沙门菌生长， 无色透明菌落无色透明菌落中国蓝琼脂中国蓝琼脂 大肠埃希菌大肠埃希菌 生长，蓝色菌落生长，蓝色菌落 伤寒沙门菌伤寒沙门菌 生长，无色菌落生长，无色菌落营养琼脂营养琼脂 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 大量生长大量生长 福志贺菌福志贺菌 大量生长大量生长厌氧血平板厌氧血平板 脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌 生长生长 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 生长，生长，溶血溶血碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水 霍乱弧菌霍

8、乱弧菌 大量生长大量生长 大肠埃希菌大肠埃希菌 抑制生长抑制生长测定各种培养基性能的菌种测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂弯曲菌琼脂 空肠弯曲菌空肠弯曲菌 生长生长 大肠埃希菌大肠埃希菌 部分抑制部分抑制 TCBSTCBS平板平板 霍乱弧菌霍乱弧菌 生长，黄色菌落生长，黄色菌落 副溶血性弧菌副溶血性弧菌 生长，蓝绿色菌落生长，蓝绿色菌落沙保弱琼脂沙保弱琼脂 白色念珠菌白色念珠菌 生长生长 大肠埃希菌大肠埃希菌 部分或完全抑制部分或完全抑制需氧血液增菌液需氧血液增菌液 肺炎链球菌肺炎链球菌 生长生长 化脓性链球菌化脓性链球菌 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 白色念珠菌白色念珠菌厌氧血液增菌液厌氧血液增

9、菌液 脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌 生长生长各种鉴别培养基的测试菌种各种鉴别培养基的测试菌种 培养基培养基 阳性对照菌阳性对照菌 阴性对照菌阴性对照菌赖氨酸脱羧酶赖氨酸脱羧酶 迟缓爱德华菌迟缓爱德华菌 费枸橼酸杆菌费枸橼酸杆菌鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶 产气肠杆菌产气肠杆菌 费枸橼酸杆菌费枸橼酸杆菌精氨酸双水解酶精氨酸双水解酶 阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌 普通变形杆菌普通变形杆菌蛋白胨水（靛基质）蛋白胨水（靛基质） 大肠埃希菌大肠埃希菌 阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌各种鉴别培养基的测试菌种各种鉴别培养基的测试菌种 培养基培养基 阳性对照菌阳性对照菌 阴性对照菌阴性对照菌 MR MR 大肠埃希菌大肠埃希菌 阴沟肠杆菌阴

10、沟肠杆菌 V-PV-P 阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌 大肠埃希菌大肠埃希菌枸橼酸盐（西蒙氏）枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌产气肠杆菌 迟缓爱德华菌迟缓爱德华菌苯丙氨酸脱氨酶苯丙氨酸脱氨酶 雷极变形杆菌雷极变形杆菌 费枸橼酸杆菌费枸橼酸杆菌O-FO-F试验管试验管 铜绿假单胞菌（氧化型）铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）洛菲不动杆菌（不利用） 大肠埃希菌（发酵型）大肠埃希菌（发酵型）硝酸盐还原硝酸盐还原 大肠埃希菌大肠埃希菌 洛菲不动杆菌洛菲不动杆菌各种鉴别培养基的测试菌种各种鉴别培养基的测试菌种培养基培养基 阳性对照菌阳性对照菌 阴性对照菌阴性对照菌胆汁胆汁- -七叶苷七叶苷 粪肠球菌粪肠球菌

11、 化脓性链球菌化脓性链球菌脱氧核糖核酸琼脂脱氧核糖核酸琼脂 粘质沙雷菌粘质沙雷菌 表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌氰化钾肉汤氰化钾肉汤 产气肠杆菌产气肠杆菌 迟缓爱德华菌迟缓爱德华菌丙二酸盐丙二酸盐 产气肠杆菌产气肠杆菌 迟缓爱德华菌迟缓爱德华菌尿素琼脂尿素琼脂 雷极变形杆菌（快）雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌大肠埃希菌 肺炎克雷白菌（慢）肺炎克雷白菌（慢）半固体琼脂动力试验半固体琼脂动力试验 大肠埃希菌大肠埃希菌 肺炎克雷白菌肺炎克雷白菌仪器设备的质量控制仪器设备的质量控制设备设备 控制范围控制范围 备注备注高压灭菌器高压灭菌器 121121 定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月

12、）孵育箱孵育箱 35 35 11 定期加水定期加水水浴箱水浴箱 37370.50.5 定期加水、清洁内壁定期加水、清洁内壁冰箱冰箱 4 4 22 定期清洁内部定期清洁内部COCO2 2箱箱 5-10%5-10% 淋病奈瑟氏菌检测效果淋病奈瑟氏菌检测效果厌氧箱厌氧箱 美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件生物安全柜生物安全柜 更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）血液培养仪血液培养仪 培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正微生物鉴定仪微生物鉴定仪 探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试探测部位定期清洁

13、；鉴定卡、条、板测试标本检验过程的质量控制标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目选择合理的检验项目选择适当的标本选择适当的标本正确书写检验申清单正确书写检验申清单直接诊断直接诊断 直接发现病原体直接发现病原体 -脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本 确定标本是否合格，并推测病原体确定标本是否合格，并推测病原体 -痰液标本痰液标本 发现病原体并进行初步计数发现病原体并进行初步计数 -尿液标本尿液标本 为培养基和培养方法的选择提供信息为培养基和培养方法的选择提供信息病原菌的分离培养病原菌的分离培养 呼吸道标本呼吸道标本 接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱

14、接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱琼脂，并将巧克力血平板置琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO5%-10%CO2 2 35 35环境中培养。环境中培养。粪便标本粪便标本 接种接种SSSS平板、麦康凯平板或中国蓝平板平板、麦康凯平板或中国蓝平板血液培养血液培养 在血液增菌培养期间，应至少在在血液增菌培养期间，应至少在24h48h24h48h盲目翻种一盲目翻种一次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。病原菌的鉴定病原菌的鉴定 菌落形态观察菌落形态观察-涂片染色镜检涂片染色镜检-生化鉴定生化鉴定-血清学试验血清学试验 -氧化酶

15、试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，以免假阴性结果出现。以免假阴性结果出现。 -在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。 不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。 每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造成

16、的假凝集成的假凝集药敏试验的质量控制要点药敏试验的质量控制要点培养基培养基纸片纸片菌量菌量操作操作孵育：孵育：时间、温度、平板放置时间、温度、平板放置结果判断结果判断质控菌株质控菌株纸片扩散法的质控菌株纸片扩散法的质控菌株金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌ATCC25923ATCC25923大肠埃希菌大肠埃希菌ATCC25922ATCC25922大肠埃希菌大肠埃希菌ATCC35218ATCC35218（用于用于内酰胺酶抑制剂复合制剂）内酰胺酶抑制剂复合制剂）铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌ATCC27853ATCC27853粪肠球菌粪肠球菌ATCC29212ATCC29212流感嗜血杆菌（用于流感嗜血杆菌（

17、用于HTMHTM培养基）培养基）ATCC49247ATCC49247、4976649766淋病奈瑟菌（用于淋病奈瑟菌（用于GCGC琼脂）琼脂）ATCC49226ATCC49226肺炎链球菌（用于肺炎链球菌（用于5%5%羊血羊血MHMH琼脂）琼脂）ATCC49619ATCC49619失控的常见的原因失控的常见的原因-质控结果记录错误质控结果记录错误-量取抑菌环直径时读数错误量取抑菌环直径时读数错误-标准菌株被污染或其它改变标准菌株被污染或其它改变-接种的菌悬液太浓或过淡接种的菌悬液太浓或过淡-0.5-0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效-孵育温度或气体环境不

18、正确孵育温度或气体环境不正确-MH-MH培养基质量有无问题培养基质量有无问题-含药纸片失效含药纸片失效检验后的质量保证检验后的质量保证 检验后程序：也称分析后期。检验后程序：也称分析后期。 指检验后全部过程。指检验后全部过程。包包 括括 检验结果的评审与报告检验结果的评审与报告 -报告报告时间、时间、分级报告分级报告、危急值危急值报告报告及及记录记录 标本的处置标本的处置 -感染性废弃物感染性废弃物 菌种保存方法菌种保存方法培养基保存法培养基保存法快速冷冻法快速冷冻法冷冻干燥法冷冻干燥法 菌种保管菌种保管定期转种定期转种制备记录卡制备记录卡专人负责专人负责室内全面质量控制室内全面质量控制全面实

19、施各项质量控制内容全面实施各项质量控制内容对人员要及时进行培训和考核对人员要及时进行培训和考核严格审核标本和结果报告严格审核标本和结果报告在日常标本中掺入模拟标本，进行盲点试验在日常标本中掺入模拟标本，进行盲点试验发现误差，应及时找出原因，进行改进发现误差，应及时找出原因，进行改进室间质量控制的实施室间质量控制的实施组织单位：组织单位：各级临床检验中心和参考实验室各级临床检验中心和参考实验室工作任务：工作任务： 定期或不定期地进行熟练程度考核和盲点试验检查。定期或不定期地进行熟练程度考核和盲点试验检查。 定期或不定期地举办各种学习班，提高各级技术人定期或不定期地举办各种学习班，提高各级技术人员

20、的技术水平，学习新的知识。员的技术水平，学习新的知识。 提供或督促有关部门提供合格的标准化的试剂、抗提供或督促有关部门提供合格的标准化的试剂、抗血清、培养基等实验必需品。血清、培养基等实验必需品。盲点质量控制盲点质量控制 -quality control blind unknown方方 法法 质控管理机构将模拟标本混入临床普通标质控管理机构将模拟标本混入临床普通标本，送入实验室进行常规测定。本，送入实验室进行常规测定。 评评 价价 质控管理机构负责收回和评价实验结果，根质控管理机构负责收回和评价实验结果，根据参加的规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确据参加的规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确率及所有参加实验室的平均分，以及每个实验率及所有参加实验室的平均分，以及每个实验室的得分。室的得分。谢谢 谢谢