《圆环蓝耳概述》PPT课件.ppt

《《圆环蓝耳概述》PPT课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《圆环蓝耳概述》PPT课件.ppt（42页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、圆环、蓝耳圆环、蓝耳付应舟付应舟 一、一、PCV2PCV2病原学病原学l9090年代年代 PK-15 PK-15细胞培养污染面的细胞培养污染面的PCVPCV成为成为PCV1PCV1（非致病性病毒）（非致病性病毒）l9999年年 新出现的新出现的PCVPCV命名为命名为PCV2PCV2（致病性病（致病性病毒）毒）lPCV2PCV2属于圆环病毒科属于圆环病毒科 圆环病毒属圆环病毒属 l病毒粒子直径为病毒粒子直径为14-17nm14-17nm，为已知最小的动，为已知最小的动物病毒之一物病毒之一一、一、PCV2PCV2病原学病原学l呈呈2020面体对称结构，无囊膜面体对称结构，无囊膜l含有共价闭合的单

2、股环状负链含有共价闭合的单股环状负链DNADNAl基因大小为基因大小为176kb176kbl核苷酸数为核苷酸数为1767-17681767-1768个个l全球这种病毒的抗原决定簇核苷酸序全球这种病毒的抗原决定簇核苷酸序列的同源性高达列的同源性高达93%93%一、一、PCV2PCV2病原学病原学l对外界理化因子抵抗力相当强对外界理化因子抵抗力相当强l病毒耐酸，在病毒耐酸，在PHPH为为3 3的环境下仍可存活的环境下仍可存活l耐氯仿，耐氯仿，7070的环境下可存活的环境下可存活1515分钟分钟l市售消毒剂如：双氯苯双胍己烷、福尔马林、市售消毒剂如：双氯苯双胍己烷、福尔马林、碘酒、酒精等作用下碘酒、

3、酒精等作用下1010分钟，病毒滴度有所下分钟，病毒滴度有所下降，但不能完全灭活降，但不能完全灭活l可使动物红细胞凝集，无血凝活性可使动物红细胞凝集，无血凝活性二、二、PCV2PCV2流行病学流行病学l在自然界广泛存在在自然界广泛存在l猪科动物是自然宿主，猪科外动物不易感猪科动物是自然宿主，猪科外动物不易感l口鼻接触是口鼻接触是PCV2PCV2的主要自然传播途径，经鼻内接种妊的主要自然传播途径，经鼻内接种妊娠母猪或人工授精方式尝试使胎儿感染娠母猪或人工授精方式尝试使胎儿感染PCV2PCV2，结果感，结果感染效果不确切染效果不确切lPCRPCR法可检测到法可检测到PMWSPMWS感染猪粪便和分泌物

4、及田间感染猪粪便和分泌物及田间2828周周龄猪血清中的龄猪血清中的PCV2PCV2核苷酸核苷酸l去势后的公猪教母猪易感去势后的公猪教母猪易感PMWSPMWSlPMWSPMWS虽由多种原因引起的疫病，但与虽由多种原因引起的疫病，但与PCV2PCV2感染分不开感染分不开l不同品种的遗传性有影响，长白猪较杜洛克、大白猪不同品种的遗传性有影响，长白猪较杜洛克、大白猪更易感更易感三、三、PCV2PCV2致病机理致病机理l目前尚未得知体内支持目前尚未得知体内支持PCV2PCV2复制的细胞复制的细胞l但在猪巨噬细胞和树突状细胞中发现大量的但在猪巨噬细胞和树突状细胞中发现大量的PCV2PCV2抗原，抗原，据推

5、测是聚集场所而不不能确认为复制场所据推测是聚集场所而不不能确认为复制场所lPCV2PCV2对免疫系统的影响具有重要的作用对免疫系统的影响具有重要的作用l实验表明：一些病毒或非感染因子刺激或激活实验表明：一些病毒或非感染因子刺激或激活PCV2PCV2感感染猪体内免疫系统后，染猪体内免疫系统后，PCV2PCV2的复制水平提高，同时血的复制水平提高，同时血清组织中的抗体滴度升高，淋巴组织病变显著提高，清组织中的抗体滴度升高，淋巴组织病变显著提高，导致导致PMWSPMWSl发病后，淋巴组织细胞动力学改变，发生免疫抑制状发病后，淋巴组织细胞动力学改变，发生免疫抑制状态态三、三、PCV2PCV2致病机理致

6、病机理l感染感染PMWSPMWS后，后，PCV2PCV2与猪天然干扰素与猪天然干扰素分泌细胞（分泌细胞（NIPCNIPC）相互作用，使干）相互作用，使干扰素分泌持续减少，体内干扰素含扰素分泌持续减少，体内干扰素含量持续下降，导致非正常的免疫应量持续下降，导致非正常的免疫应答答l目前认为，高滴度的目前认为，高滴度的PCV2PCV2会发生会发生PDNSPDNS四、四、PMWS临床症临床症状与病理变化状与病理变化lPMWSPMWS较易侵袭较易侵袭1-41-4月龄的猪，发病率一般为月龄的猪，发病率一般为5-5-30%30%（有时达（有时达50-60%50-60%）发病猪死亡率）发病猪死亡率5-30%5

7、-30%l症状：消瘦、皮肤苍白、呼吸困难、有时腹泻、症状：消瘦、皮肤苍白、呼吸困难、有时腹泻、黄疸、在早期出现皮下淋巴结肿大，更早期呈黄疸、在早期出现皮下淋巴结肿大，更早期呈现淋巴结大小正常或萎缩，胸腺也常常发生萎现淋巴结大小正常或萎缩，胸腺也常常发生萎缩缩l淋巴结组织病理学变化特征：淋巴细胞减少、淋巴结组织病理学变化特征：淋巴细胞减少、大量组织细胞及多核巨噬细胞浸润、胸腺皮质大量组织细胞及多核巨噬细胞浸润、胸腺皮质萎缩、组织细胞及树突状细胞内通过显微观察萎缩、组织细胞及树突状细胞内通过显微观察可见胞内病毒包涵体可见胞内病毒包涵体四、四、PMWS临床症临床症状与病理变化状与病理变化l间质性肺炎

8、、支气管周围纤维间质性肺炎、支气管周围纤维化、肝脏肿大或萎缩、变白变化、肝脏肿大或萎缩、变白变硬、表面有颗粒状物覆盖、显硬、表面有颗粒状物覆盖、显微下可见大面积细胞病变及炎微下可见大面积细胞病变及炎症症l疫病后期无明显特征的黄疸疫病后期无明显特征的黄疸四、四、PDNSPDNS病理变化病理变化l猪肾皮质表面出现白点（非化脓性猪肾皮质表面出现白点（非化脓性间质性肺炎）间质性肺炎）l表现为坏死性脉管炎表现为坏死性脉管炎l死于死于PDNSPDNS的猪病理变化一般为双侧的猪病理变化一般为双侧肾肿大，肾盂水肿，肾小球肾炎，肾肿大，肾盂水肿，肾小球肾炎，脾脏梗死脾脏梗死五、五、PCV2免疫学特征免疫学特征l

9、猪群感染猪群感染PCV2PCV2后，血清转化一般发后，血清转化一般发生在感染后生在感染后14-2814-28天天六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点lPMWSPMWSl生长缓慢、消瘦、持续呼吸困难、腹股沟淋巴生长缓慢、消瘦、持续呼吸困难、腹股沟淋巴结肿大、有时发生黄疸结肿大、有时发生黄疸l淋巴结组织呈现病变淋巴结组织呈现病变l病变淋巴结组织或其他组织有中等以上病变淋巴结组织或其他组织有中等以上PCV2PCV2抗抗原原六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点lPDNSPDNSl皮肤出血或坏死、主要出现在后肢及会阴区域；皮肤出血或坏死、主要出现在后肢及会阴区域；肾肿大、发白及皮质大面积出血肾肿

10、大、发白及皮质大面积出血l全身有坏死性脉管炎，坏死性及纤维素性肾小全身有坏死性脉管炎，坏死性及纤维素性肾小球肾炎球肾炎六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点l繁殖障碍性疾病繁殖障碍性疾病l怀孕后期的流产或死胎，有时可见明显的心肌怀孕后期的流产或死胎，有时可见明显的心肌肥大肥大l心肌损伤，表现为大面积的纤维组织增生或坏心肌损伤，表现为大面积的纤维组织增生或坏死性心肌炎死性心肌炎l心肌损伤及其它死胎组织检测到心肌损伤及其它死胎组织检测到PCV2PCV2七、七、PCV2PCV2检测方法检测方法l原位杂交法（原位杂交法（ISHISH）l免疫组织化学（免疫组织化学（IHCIHC）l血清学检测法存在的问

11、题：因为感染血清学检测法存在的问题：因为感染PMWSPMWS猪和猪和非感染猪的血清转化形式非常相似非感染猪的血清转化形式非常相似八、八、PCV2PCV2主要危害主要危害lPMWSPMWS；lPDNSPDNS；lCTCT；l繁殖障碍繁殖障碍九、九、PCV2PCV2的预防和控制的预防和控制l控制环境和其它细菌及病毒感染可降低控制环境和其它细菌及病毒感染可降低PMWSPMWS发生率发生率l研究证明，免疫激活在引发研究证明，免疫激活在引发PMWSPMWS中是一个重要因素中是一个重要因素l实际生产中，停止使用有效疫苗的风险比导致较低比实际生产中，停止使用有效疫苗的风险比导致较低比例的例的PMWSPMWS

12、的风险大得多，免疫激活的因素不能消除的风险大得多，免疫激活的因素不能消除l研究结果表明增加母源抗体可使研究结果表明增加母源抗体可使PMWSPMWS的发生率下降，的发生率下降，饲料中增加亚油酸、饲料中增加亚油酸、VEVE、SeSe也有效也有效l某些猪场哺乳仔猪皮下注射成年猪血清也有效，但带某些猪场哺乳仔猪皮下注射成年猪血清也有效，但带来严重的生物安全问题来严重的生物安全问题l疫苗的免疫接种（最有效、也切实可行）疫苗的免疫接种（最有效、也切实可行）十、十、PCV2 PCV2 疫苗类型疫苗类型l全病毒灭活疫苗全病毒灭活疫苗l重组疫苗重组疫苗lDNADNA疫苗疫苗l嵌合感染性嵌合感染性DNADNA克隆

13、疫苗克隆疫苗l基因工程基因工程CapCap亚单位疫苗亚单位疫苗PRRSVPRRSV概述概述lPRRSVPRRSV属套病毒目成员，动脉炎病毒科属套病毒目成员，动脉炎病毒科l有囊膜正链小有囊膜正链小RNARNA病毒病毒l直径直径50-65nm50-65nml表面相对平滑表面相对平滑l立方体核衣壳核心直径立方体核衣壳核心直径25-35nm25-35nm一、病毒基本生物学特征一、病毒基本生物学特征l基因多样性：基因多样性：RNARNA序列差异序列差异l对肺泡巨噬细胞对肺泡巨噬细胞(PAM)(PAM)有强亲嗜性有强亲嗜性l抗体依赖性增强作用抗体依赖性增强作用(ADE)(ADE)l在条件下稳定在条件下稳定

14、l具有高度的宿主依赖性具有高度的宿主依赖性l母体病毒穿透胎盘垂直传播母体病毒穿透胎盘垂直传播l持续感染且与猪只年龄无关持续感染且与猪只年龄无关二、二、PRRSVPRRSV的基因测序的基因测序研究研究l一个农场可能存在多种基因型的一个农场可能存在多种基因型的PRRSVPRRSVl不同基因型的蓝耳病毒重组的可能性较大不同基因型的蓝耳病毒重组的可能性较大l研究表明全病毒弱毒疫苗毒力可能返强研究表明全病毒弱毒疫苗毒力可能返强l使人们更好地理解了使人们更好地理解了PRRSVPRRSV毒力减弱或毒力返毒力减弱或毒力返强的分子基础强的分子基础l研究发现毒力基因，基因反向遗传技术进行研究发现毒力基因，基因反向

15、遗传技术进行PRRSVPRRSV基因功能研究，确立毒力基因基因功能研究，确立毒力基因三、三、PRRSVPRRSV致病机理致病机理l主要在肺泡巨噬细胞及其它组织的巨噬细胞中主要在肺泡巨噬细胞及其它组织的巨噬细胞中生长繁殖，也能在公猪的睾丸生殖细胞（精细生长繁殖，也能在公猪的睾丸生殖细胞（精细胞、精母细胞、多核巨细胞）中生长繁殖胞、精母细胞、多核巨细胞）中生长繁殖l主要通过内吞作用进入宿主细胞：主要通过内吞作用进入宿主细胞：PRRSVPRRSV通过通过核衣壳以出芽方式进入滑面内质网、高尔基体核衣壳以出芽方式进入滑面内质网、高尔基体或者两者的管腔而完成装配过程，装配完成后，或者两者的管腔而完成装配过

16、程，装配完成后，病毒粒子在囊膜内聚集并迁移到细胞膜，经过病毒粒子在囊膜内聚集并迁移到细胞膜，经过膜融合后释放，在一步生长条件下培养膜融合后释放，在一步生长条件下培养10-2010-20小时，滴度可达小时，滴度可达1010四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构l基因组长为基因组长为15Kb15Kb，含有，含有8 8个开放性阅读框个开放性阅读框（ORFSORFS）lORF1aORF1a和和1b1b占整个基因组的占整个基因组的80%80%，并编码所必需，并编码所必需的的RNARNA复制酶复制酶lNSPSNSPS为为ORF1aORF1a和和1b1b的翻译产物，在的翻译产物，在PRRSVPRR

17、SV的复制的复制中发挥作用外，在该病的诊断和宿主的免疫反中发挥作用外，在该病的诊断和宿主的免疫反应中有一定作用应中有一定作用lNSP2NSP2含有大量的抗原决定簇，可以被感染宿主含有大量的抗原决定簇，可以被感染宿主的免疫系统所识别的免疫系统所识别四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构 19961996年年-2006-2006年在我国流行毒株为年在我国流行毒株为经典美洲毒经典美洲毒株株NSP220062006年以来流行毒株为高致病性毒株年以来流行毒株为高致病性毒株NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构四、四、PRRSVPRRSV

18、基因组结构基因组结构NSP2NSP2缺失缺失360360个核甘酸（包含主要毒力基因）个核甘酸（包含主要毒力基因）NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株五、五、PRRSVPRRSV结构蛋白结构蛋白lPRRSVPRRSV有有6-76-7个结构蛋白，其中三个主要的结构个结构蛋白，其中三个主要的结构蛋白分别为蛋白分别为GP5GP5，M M，N NlN N蛋白较小，但在感染细胞中蛋白较小，但在感染细胞中N N蛋白的表达水平蛋白的表达水平最高，占病毒粒子总蛋白的最高，占病毒粒子总蛋白的20-40%20-40%，影响，影响rRNArR

19、NA前体形成，进而影响核的复制前体形成，进而影响核的复制lN N蛋白在免疫遗传和免疫保护方面作用不大，蛋白在免疫遗传和免疫保护方面作用不大，但由于表达水平较高，故抗原性较好，因此可但由于表达水平较高，故抗原性较好，因此可作为诊断分析的理想靶位作为诊断分析的理想靶位六、六、PRRSVPRRSV基因的多样性基因的多样性l临床表现临床表现l证实肺毒力或复制毒力的不同证实肺毒力或复制毒力的不同l通过检测多克隆和单克隆抗体而确定抗原差异通过检测多克隆和单克隆抗体而确定抗原差异lRNARNA序列的差异序列的差异l同一个猪场可能存在多种基因型的同一个猪场可能存在多种基因型的PRRSVPRRSVl欧洲以欧洲以

20、1 1型为主、美洲以型为主、美洲以2 2型为主型为主l1 1型和型和2 2型的基因重组可能性较小，反之较大型的基因重组可能性较小，反之较大七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l普通弱毒疫苗的应用使人们难以评价其流行性，因为普通弱毒疫苗的应用使人们难以评价其流行性，因为很难区分检测到的抗体是疫苗抗体还是野毒抗体很难区分检测到的抗体是疫苗抗体还是野毒抗体l普通弱毒疫苗使用后病毒排出体外并在环境中传播，普通弱毒疫苗使用后病毒排出体外并在环境中传播，使得与野毒的区分更加困难使得与野毒的区分更加困难l猪科动物均为易感动物猪科动物均为易感动物l排毒途径：唾液、鼻涕、尿液、粪便、精液、乳汁等排毒途径

21、：唾液、鼻涕、尿液、粪便、精液、乳汁等l传播途径：鼻腔、肌肉、口腔、子宫、阴道，肌肉感传播途径：鼻腔、肌肉、口腔、子宫、阴道，肌肉感染只需染只需2020个病毒粒子可使猪感染发病，肌肉感染包括个病毒粒子可使猪感染发病，肌肉感染包括剪耳、断尾、剪牙、打烙印、注射等标准操作程序，剪耳、断尾、剪牙、打烙印、注射等标准操作程序，也包括猪只之间撕咬、刮擦、咬耳、咬尾等也包括猪只之间撕咬、刮擦、咬耳、咬尾等七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l研究表明，节肢动物对研究表明，节肢动物对PRRSVPRRSV的传播有一定作的传播有一定作用，在野生苍蝇和蚊子的体内或体表检测到了用，在野生苍蝇和蚊子的体内或体

22、表检测到了PRRSVPRRSV，可发生机械传播，可发生机械传播l垂直传播，病毒对胎盘的穿透力与病毒的毒力垂直传播，病毒对胎盘的穿透力与病毒的毒力无关无关l持续感染，动物感染后，能在敏感细胞内复制持续感染，动物感染后，能在敏感细胞内复制几个月而不表现出症状，这是最为重要的流行几个月而不表现出症状，这是最为重要的流行病学特征病学特征七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l持续感染与猪的年龄无关持续感染与猪的年龄无关lPRRSVPRRSV对热和干燥敏感，遇热或干燥病毒迅对热和干燥敏感，遇热或干燥病毒迅速失活速失活lPRRSVPRRSV在的条件下稳定，当在的条件下稳定，当PHPH6 6或时迅或时

23、迅速丧失感染力速丧失感染力l猪场内传播：一旦感染猪场内传播：一旦感染PRRSVPRRSV往往在一个猪往往在一个猪场内无休止地循环传播，不断感染易感猪场内无休止地循环传播，不断感染易感猪初生猪、购入猪、免疫抑制猪群初生猪、购入猪、免疫抑制猪群蓝耳病疫苗的类型蓝耳病疫苗的类型l第一代第一代 经典毒株灭活疫苗经典毒株灭活疫苗l第二代第二代 经典毒株弱毒疫苗经典毒株弱毒疫苗l第三代第三代 高致病性毒株灭活疫苗高致病性毒株灭活疫苗l第四代第四代 高致病性毒株弱毒疫苗高致病性毒株弱毒疫苗l第五代第五代 高致病性毒株基因缺失弱毒疫苗高致病性毒株基因缺失弱毒疫苗易蓝净易蓝净 基因组结构图基因组结构图NSP2NSP2缺失缺失360360个核甘酸（包含主要毒力基因）个核甘酸（包含主要毒力基因）NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株