《土壤微生物的分离》PPT课件.ppt

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1、1.1 1.1 1.1 1.1 掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物的操作技术；的操作技术；的操作技术；的操作技术；1.2 1.2 1.2 1.2 掌握微生物样品稀释法。掌握微生物样品稀释法。掌握微生物样品稀释法。掌握微生物样品稀释法。1.3 1.3 1.3 1.3 初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。实验二实验二 从

2、土壤中分离和纯化微生物从土壤中分离和纯化微生物1 实验目的实验目的2.1 2.1 什么是微生物的纯培养什么是微生物的纯培养,从固体培养基中分离微生物的方从固体培养基中分离微生物的方 法有哪些法有哪些?2.2 2.2 为什么可以根据菌落数目来计算样品中微生物的数量为什么可以根据菌落数目来计算样品中微生物的数量?2 2 实验原理实验原理3.1.1 3.1.1 3.1.1 3.1.1 土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。3.1.2 3.1

3、.2 3.1.2 3.1.2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃薯培养基（上次实验成果）薯培养基（上次实验成果）薯培养基（上次实验成果）薯培养基（上次实验成果）3.1.3 3.1.3 3.1.3 3.1.3 无菌生理盐水。无菌生理盐水。无菌生理盐水。无菌生理盐水。3.1.4 3.1.4 3.1.4 3.1.4 其它物品：其它物品：其它物品：其它物品：无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻无菌培养皿，无菌吸

4、管，洗耳球，无菌玻无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻璃涂棒，无菌报纸，药勺，璃涂棒，无菌报纸，药勺，璃涂棒，无菌报纸，药勺，璃涂棒，无菌报纸，药勺，10101010酚溶液。酚溶液。酚溶液。酚溶液。3 3 材料与方法材料与方法3.1 3.1 实验器材实验器材3.2 方法（A.稀释涂布平板法）各管无菌水各管无菌水依次，注意更换枪尖依次，注意更换枪尖10-4、10-5、10-6；各平板；各平板3.2.1 3.2.1 制备土壤稀释液制备土壤稀释液振荡振荡20 min三角烧瓶中为什么要加玻璃珠三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?取土壤过程中怎样减少杂菌污染取土壤过程中怎样减少杂菌污染?3.2.2 3.2.2

5、倒平板倒平板将培养基加热熔化，冷至将培养基加热熔化，冷至55556060，(在高氏在高氏1 1号培养基中加入号培养基中加入10%10%酚数滴酚数滴)，(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为30ug/mL30ug/mL，)混匀后倒入平板。混匀后倒入平板。（操作方法，教师示范）（操作方法，教师示范）每平板每平板12 mL12 mL3.2.3 3.2.3 涂布涂布标记浓度标记浓度取菌液取菌液玻璃涂棒灭菌玻璃涂棒灭菌涂布涂布静置静置510min3.2.3 3.2.3 培养培养细细 菌菌霉霉 菌菌放线菌放线菌28培养箱培养箱37培养箱培养箱倒置培养倒置培养24

6、-48h24-48h倒置培养倒置培养3-53-5天天 3.2.4 3.2.4 平板菌落计数平板菌落计数选取平板上长有选取平板上长有5050200200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量，个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量，同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度计算的数据也不应相差太大。计算的数据也不应相差太大。3.2 3.2 方法方法（B.B.稀释倒平板法）稀释倒平板法）取样取样（0.1mL)倒平板倒平板（45，12mL，旋动，旋动)教师示范教师示范倒置培养倒置培养3.2 3.2 方法方法（C.C.平板划线分离法）平板划线分

7、离法）倒平板倒平板划线划线（教师示范）（教师示范）倒置培养倒置培养实验报告1 1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.2 2 2 2 实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征，数据可设计表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。表格表示。注意用三线表，要求有表格名称，项目清晰。3 3 3 3 实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存法的结果？作为初学者更适合用什么方法？实验操作中存在什么问题，应如何改进？在什么问题，应如何改进？在什么问题，应如何改进？在什么问题，应如何改进？