高考生物选修3知识点总结.docx
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1、高考生物选修3知识点总结专题一 基因工程一、基因工程的基本工具1、“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端及平末端。2、“分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(EcoliDNA连接酶及T4DNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯键。区别:EcoliDNA连接酶只能连接黏性末端; T4DNA连接酶能缝合两种末端,但效率较低。3、“分子运输车”运载体(1)载体具备的条件: 能在受体细胞中复制并稳定保
2、存。 具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。 具有标记基因,供重组DNA的鉴定及选择。(2)最常用的载体是:质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取从基因文库中获得、人工合成、PCR扩增。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_及化学合成法_。(了解基因组文库及CDNA文库?;如何从基因文库中提取目的基因?)2、基因表达载体的构建(关键步骤)组成:目的基因启动子终止子标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶
3、识别及结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的尾端。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。3、将目的基因导入受体细胞_(1)常用的转化(导入)方法:导入植物细胞:常用农杆菌转化法(双子叶植物),其次还有基因枪法及花粉管通道法等。导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。导入微生物细胞:感受态细胞法。先用Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中及感受态细胞混合,在一定的温度
4、下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ,最常用的原核细胞是大肠杆菌。(2)重组细胞导入受体细胞后,筛选含基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4、目的基因的检测及表达检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。检测目的基因是否转录出mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针及mRNA杂交。检测目的基因是否翻译成蛋白质,提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原抗体杂交。有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。三、蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构
5、规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产及生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)专题2 细胞工程一、植物细胞工程 1、理论基础(原理):植物细胞全能性2、植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织试管苗植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3、植物体细胞杂交技术诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法用聚乙二醇(PEG)作诱导剂。原理:细胞膜的
6、流动性。意义:克服了远缘杂交不亲及的障碍。二、动物细胞工程1、动物细胞培养(1)取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(2)细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。接触抑制:细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,会停止分裂增殖。(3)动物细胞培养需要满足以下条件无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危
7、害。营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。需加入血清、血浆等天然成分。温度:适宜温度:哺乳动物多是36.50.5;pH:7.27.4。气体环境:95%空气5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2作用是维持培养液的pH。2、动物体细胞核移植技术及克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)及体细胞核移植(比较难)。(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。3、动物细胞融合(1)原理级方法:细胞膜的流动性。诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法用聚乙二醇(PEG)作诱导剂。还可以用灭活的病毒诱导。
8、(2)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲及性。项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合物理法、化学法克服远缘杂交不亲及性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合物理法、化学法、灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一4、单克隆抗体(1)抗体:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。(2)杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。(3)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。(4)单克隆抗体的作用:作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并
9、跟一定抗原发生特异性结合,准确、高效、简易、快速。用于治疗疾病及运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少量用于治疗其它疾病。专题3 胚胎工程一、动物胚胎发育的基本过程1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作及处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。2、动物胚胎发育的基本过程(1)精子的发生:细胞核为精子头的主要部分,高尔基体发育为顶体,中心体演变为精子的尾,线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜,其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。(2)卵子的发生:在胎儿时期,卵原细胞进行有
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