实验性大鼠液压冲击脑损伤神经功能评分与脑水肿、水通道蛋白4表达的关系 (1).doc

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1、万方数 据 * 392 * 中华行为医学与脑科学杂志 2012 年 5 月第 21 卷第 5 期 Chin J Behav Med & Brain Sci.Mav 2012.V 1.21 ,No,5 实验性大鼠液压冲击脑损伤神经功能评分 与脑水肿、水通道蛋白 4 表达的关系 基础研究 孙 国 柱 赵 宗 茂 杨 雷 芳 刘 性 强 王 目 刚 韩 仰 军 【 摘 要 】 目 的 观察液压冲击脑损伤 大 鼠神经功能评分 ,及其与脑水肿和水通 道 蛋 白 4 ( AQP4 ) 高 表 达 的 关 系 。 方 法 制 作 SD 大 鼠 液 压 冲 击 脑 损 伤 模 型 并 对 动 物 进 行 神

2、经功 能 评 分 ， 应 用 干 湿 重 法 测 定 脑 组 织 含 水 量 ， 免 疫 组织化 学 染色 方 法和 免 疫蛋白 印 迹检 测 AQP4 表 达 变化。 结 果 TB1 组 动 物神经 功 能评 分 12h 出 现 下 降 (11.17 1.32)分 ， 24h 下 降 至 最 低 值 (10.17 0.75)分 ， 3 d 逐 渐 升 髙 (10.6 6 1.37) 分 ;脑 含 水 量 】 2h 明显增 加 (80.27 1.47)% ， 24h 达到最 高 (82.19 0.97)% ， 持续 至 3d 开始下 降 (81.74 1,69)% ; We8 tem Blot

3、 结 果 显 示 AQP4 表 达 于 12h 明 显 增高 （ OD:0.65 *0.05)， 24h 达 到 最 高 值 （ 00:0.72 0.08)， 3(1 下 降 （ 00:0.56 土 0.07)， 7(1(00:0.490.09)仍 髙 于对 照 组 （ 00:0.150.05); 免 疫 组化 显 示 AQP4 表达趋势与 Western Blot 结果一致。线性相关分析发现神经功能评分与脑含水量之间 存在负相关性（ / = - .615,P 0.05), 从 6h 开始增 加,24h 达到最大值，持续至 3d 开始下 降。见表 1。 三、 大鼠液压冲击伤后组织学观察 TBI

4、 组动物 lh 后可见脑挫裂伤灶结构破坏，点片 状 出血（图 la)。伤后 6h 挫伤灶周围出现神经细胞水 肿， 胶质细胞胞浆空泡样变，神经元周围间隙增宽（图 lb)。 12h 神经细胞水肿进一步加重，胶质细胞胞浆空 泡样变更 明显。 24h 水肿程度、范围达到高峰，胶质细 胞胞浆空泡 样变更加明显，神经细胞胞体肿胀，胞浆嗜 酸性变，胞 核固缩变 形，偏心，且神经细胞及胶质细胞 周围间隙变 宽（图 lc)。 3d 挫伤灶周围水肿开始减 轻，胶质细胞增生 明显 ,炎症细胞浸润（图 Id)。 7d 后 水肿基本减退，胶质 细胞增生更加明显。 NC 组和 SO 组脑组织结构完整，无 损伤、水肿及出血

5、，神经细胞类 圆形 ,核仁蓝色淡染，核 膜完整。 a： lh,b： 6h,c： 24h,d： 3d 图 1 TB 丨组动物 1 h、 6h、 24h、 3d 病理学改变 及脑水肿程度（ HE, x400) 万方数 据 （ / = -0. 605, P339. Badaut J,Ashwal S.Obenaus A. Aquaporins in cerebrovascular disease： a target fo treatment of brain edema? Exp Cerebrovasc Dis, 2011,31:521-531. 组 鼠数 含水量 ( 神经 别 功能评分 (分 AQ

6、P4 免疫组化 Western Blot Papadopoulos MC,Verkman AS. Potential utility of aquaporin modulators for therapy erf brain disoders. Prog Brain Res,2(X)8,170： 589-601. 孙国柱，赵宗茂 ,张更申，等 大鼠液压冲击伤脑水肿 AQP4 表达 及其与水肿 NC 4 76. % 0.78 15 0.1501 0.0915 0.1529 so 4 77.15 0.94 15 0.1513 0.0783 0.1531 lh 8 78.46 0.98 9.30 1

7、.030.1541 0.0600 0.2076 6h 8 79.36 0.43B 9.80 0.75s 0.1738 0.0800a 0.3896 8 12h 8 80.271.47a 11.17 1,32* 0.1766 0.0100a 0.6471 a 24h 8 82.19 0.9710.170.75a 0.1912 0.0900a 0.7211 a 3d 8 81.741.6a 10.66 1.37a 0.1788 0.0990 7d 8 80.45 0.7* 13_670.52a 0.17120.0110a 0.4931 0.0975s 注 :NC:盐水组 ,S0:假手术组。与 SO

8、 组比较 ,*/0.05 讨 论 已有大量研究证实脑水肿加重神经功能损伤 , 并且 在大鼠脑损伤模型中也发现减轻伤侧的脑水肿能 够改善 鼠的水迷宫测试能力和运动状态 AQP4 还 参与了星形胶 关系 .中华实验外科杂志， 2009,26:1499-1500. Meythaler JM.Peduzzi JD,Eleftherion E,et al. Current concepts diffuse a xotia injury-associated traumatic brain injury. Arch Phys Med Rehabil ,2001,82:1461-1471. 王健，但齐琴，段

9、宇，等 嗅鞘细祕植促进脑损伤大鼠神经功能恢复及 其 作用机制研究 中华行为医学与脑科学杂志， 2010,19:614 616. 王静 ，张小丽，赵雅宁，等 颅脑损伤恢复期患者执行功能障碍及 影响因 素分析 中华行为医学与脑科学杂志， 2011,20:137-139. Chen Y,Shiami E,Gxistantini Stet al. Rivastigmine,a rain-aective acetylcholinesterase inhibitw.ameliOTates cognitive and motor deficits induced by closed-head injury

10、in the mouse. J Neutotrauma,1998,15 ： 231-237. Nico B,Ribatti D. Role of aquaporins in cell migration and edema formation in human brain tumors. Exp Cell Res,2011,317： 2391-2396. 4 Saadoun S, Papadopoulos MC, Watanabe H,et al. Involvement of aquaporin-4 in astroglial cell migration and glial scar fo

11、rmation. J Cell Sci,2005,118：5691-5698. 质细胞的迁移、 兴 奋性传导 |。 Saad un 11和 Auguste Auguste KI,Jin S,Uchida K,et al. Greatly impaired migration of implanted aquaporin4 deficient astroglial cells inmouse brain toward a site of injury 发现 AQP4 基因沉默鼠星形 胶质细胞迁移延缓，已形成 的胶质瘢痕也出现破坏 ;表 明 AQP4 通过调节神经递质释 放，参与神 经兴奋性的 FASEB J ,2007,21 ： 108-116. (收稿日期 :2011 -02 - 25) (本文编辑 :冯学泉）