2022全国执业兽医考试高分材料第06篇 兽医微生物学与免疫学.doc
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1、第六篇:兽医微生物学与免疫学 一:细菌的结构与生理1.细菌形态:具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。无成形的细胞核,无完整的细胞器。以微米为测量单位。在固体培养基上培养,肉眼可见菌体集落。2.细菌结构(一)细胞壁:G-菌 1. 肽聚糖:为聚糖骨架;原核生物细胞特有。 2. 磷壁酸:G+菌特有;其抗原性较强:黏附宿主细胞。 G-菌:1. 肽聚糖:(少量) 2. 外膜: 外膜蛋白:脂蛋白.微孔蛋白。 脂质双层: 脂多糖:类脂A:内毒素成分。 核心多糖:具有属特异性。 特异性多糖:具有种.型特异性。 3. 周浆间隙:外膜与细胞膜之间,可获得营养,解除病毒。 (二)细胞膜 :定义:为脂质双层,并
2、镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类;不含胆固醇。 功能:物质交换.分泌胞外酶.产生与利用能量有关.细胞生物合成的场所。(三)细胞质:成分:水.蛋白质.脂类.核酸.少量无机盐.核糖体.质粒。(为超微结构) 核糖体:由RNA和蛋白质组成;是蛋白质合成场所。 质粒:定义:细胞染色体外的遗传物质,为双股DNA分子。 包括:F质粒:决定细菌的致育性。 R质粒:决定耐药性。 毒力质粒:决定致病性。(四)核体:染色体(裸露的双链DNA)3.G+菌:革兰氏染色为紫色; G-菌:革兰氏染色为红色。4.细胞壁的功能:维持固有形态.物质交换.携带有抗原决定簇与致病性有关。5.细菌特殊结构:荚膜:为黏液样物质;为多糖或多肽
3、或透明质酸奶;在营养品丰富时才形成;能抵抗吞噬;有特异性抗氧。鞭毛:细长波浪状物业;成分为蛋白质;能运行(沙门菌);有特异的H抗氧; 与黏附有关。菌毛:普通菌毛:有黏附功能的;性菌毛:F菌毛。 成分为pro;有良好的呓抗原性。芽孢:定义:一定条件下胞质脱水浓缩形成;有多层膜包裹;通透性低;有完整核质和酶系统;代谢静止;不能分裂繁殖。是抵抗不良环境的特殊形成。 灭活方法:160干热灭菌或高压蒸气灭菌6.细菌染色方法革兰氏染色法的程序:草酸铵结晶紫染色1min碘液染1min95醇脱色30s碳酸复红1min.意义:鉴别细菌.选择抗菌药物。瑞氏染色法:将细菌染成蓝色;组织细胞的细胞核染成蓝色;背景和细
4、胞浆染成红色。抗酸染色法:常用于结核杆菌.副结核杆菌的染色(红色)。顺序是:碳酸复红微热35min3盐酸酒精脱色碱性美兰复红1min.特殊染色法:包括抗酸染色法.芽孢荚膜鞭毛染色法。7.细菌的生长条件:营养物质;酸碱度(最宜pH为7.2-7.6);温度(最适为3);气体(氧气.二氧化碳);渗透性。8.世代时间:一个菌体以二分裂方式繁殖为两个菌体所需的时间。9.细菌的生长曲线分为四个时期:迟缓期:菌体增大,代谢活跃;分裂迟缓,细菌数增加不显著。对数期:活菌数对数直线上升;生物活性典型;对抗生素敏感。稳定期:新繁殖的活菌数与死菌数平衡;产生芽孢,外毒素等。衰亡期:死菌数超过活菌数;菌体形态改变。1
5、0.细菌新成代谢的能量由ATP供给。11.细菌生物氧化的类型发酵:以有机物为受氢体。有氧呼吸:以氧气为受氢体。厌氧呼吸:以无机物硝酸盐为受氢体。12.细菌合成的代谢产物:致热源:(操作时严格注意无菌操作)。毒素:内毒素为G-菌死后释放,外毒素为G+菌分泌的蛋白质。侵袭性酶类:透明质酸酶(促使细菌扩散)。色素:铜绿假单胞菌产绿色色素。细菌素:仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质,如:绿脓菌素。抗生素:多有放线菌和真菌产生。维生素:大肠杆菌能合成维生素B维生素K。13.细菌的分解代谢试验:氧化发酵试验:大肠杆菌产酸产气;沙门菌产酸不产气。氧化酶试验:阳性者为什么紫色。(阳性菌有假单胞菌.气单胞菌;阴性菌
6、有:肠科杆菌)过氧化氢酶试验:阳性者产生气泡。(阳性:葡萄球菌.微球菌。阴性:链球菌。)硫化氢试验:产生黑色为阳性(阳性:变形杆菌;阴性:大肠杆菌)尿素酶试验:阳性者呈红紫色(阳性:变形杆菌;阴性:沙门菌)吲哚试验:阳性呈红色(阳性:大肝杆菌.变形杆菌)甲基红试验(MR):红色反应为阳性(阳性:大肠杆;阴性:产气杆)VP试验:阳性呈红色(阳性:产气杆菌;阴性:大肠杆菌)枸橼酸盐利用试验(C):培养基变深兰为阳性(阳性:产气杆菌;阴性:大肠杆菌)IMVC试验:大肠杆菌+-;产气杆菌-+14.固体培养基中琼脂含义2;半固体培养基中琼脂含量0.5%。15.基础培养基:常用普通肉汤培养基,含蛋白胨.牛
7、肉浸膏.NaCl.水等;常用于糖发酵试验。16.营养培养基:在基础培养基中加入葡萄糖.血液.血清.酵母浸膏等;常用血琼脂平板(链球菌)。17.选择培养基:麦康凯培养基抑制G+生长,利于用大肠杆菌.沙门菌生长。18.鉴别培养基:另加入底物及指示剂,而鉴别细菌。19.厌氧培养基:常用疱肉培养基;即在肉浸液中加入煮过的肉渣,用凡士林封口。20.液体培养基生长现象:混浊生长(葡萄球菌);沉淀生长(链球菌);菌膜生长(枯草杆菌)。21.半固体培养基中的生长现象:沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生长。22.固体培养基中的生长现象:平板上划线后形成菌落;斜面上划线重叠形成菌苔。二细菌的感染1.正常菌体
8、的分布:口腔:球菌.乳杆菌.棒状杆菌;胃:乳杆菌.幽门螺杆菌;反刍前胃:无芽孢厌氧菌;大肠:双歧,拟杆菌,肠球菌,大肠杆菌,乳杆菌;鼻.咽:葡萄酒球菌;喉.扁桃体:甲型链球菌,卡他球菌;阴道:乳杆菌;尿道口:葡萄球菌,棒状杆菌;支气管.肺:无菌;2.正常菌群的生理作用:生物颉颃作用,营养作用,免疫作用。3.柯赫法则:是确定某种细菌是否有具有致病性的主要依据。特定的病原菌应在同一疾病中可见,在健康者不存在;此病原菌能被分离培养而得到纯种;此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症;自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物。4.细菌的毒力因子:侵袭力黏附因子F1菌毛:无特异性;F4菌毛K8
9、8:黏附猪小肠前段;F6菌毛987P:黏附猪小肠后段。侵袭性酶透明质酸酶.链激酶:链球菌产生;胶原酶:梭菌,气单胞菌产生;血液凝固酶:致病葡萄菌产生。型分泌系统沙门氏菌.大肠杆菌等具有。干扰防御荚膜:抵抗吞噬;细菌表面蛋白:抗吞噬.避免抗体补体作用;蛋白酶:细胞内逃逸:如产生过氧化氢,中和吞噬细胞中的氧自由基。毒素外毒素由G+及少量G-(如产毒性大肠埃希氏菌)产生; 0.3%甲醛 刺激外毒素类毒素产生抗毒素; 机体神经毒素:包括破伤风毒素,肉毒毒素。内毒素是G-菌细胞壁的脂多糖,当细菌死亡后才游离出来;产生症状:发热.毒血症.休克.内凝血.出血。5.破伤风梭菌及其芽孢必须侵入缺氧的深部创口才能
10、致病。6.菌血症:病原菌侵入血统,但不繁殖。毒血症:病原菌不的入血,但其产生内毒素入血,引起症状。败血症:病原菌入血,并繁殖产生毒性物质,引起中毒症状(高热.皮肤黏膜淤斑.肝脾肿大)。脓毒血症:化脓性细菌入血并繁殖,产生新的化脓灶。7.药敏试验结果判定标准:敏感:用常用剂量时,该抗菌药物治疗有效。中介:指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相近。耐药:指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制,临床治疗无效。三细菌感染的诊断1.采集样本的原则:严格无菌操作;根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本;应在使用抗菌药前采集,且采集时不得使用消毒剂;样本须新鲜
11、,尽快送检;多数可冷藏运输,粪便样本常加入甘油缓冲盐水保存液;按规定包装.冷藏.专人递送;做好标记。2.抗体检测:最好检测急性期和恢复双份血清样本,后者为前者4倍以上才具诊断价值。3.聚合酶链式反应(PCR)的4种主要材料:DNA模板.引物.耐热DNA聚合酶.脱氧核苷酸。4.核酸杂交技术的设计原理:DNA双螺旋分子的碱基互补原理。5.利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的。四消毒与灭菌1.消毒:指杀灭病原微生物,但不一定能杀死芽孢。2.灭菌:指杀灭病原微生物.非病原微生物及其芽孢。3.高压蒸汽灭菌法:应用最广.灭菌效果最好的方法。其条件为什么103.4kp.121.3.维持15-30min
12、.4.煮沸法:100时5min可杀死细菌的繁殖体,1-3h杀死芽孢,加入2%碳酸钠则沸点升至少1055.流通蒸汽法:100 30min杀死细菌的繁殖体,不可杀死芽孢。6.巴氏消毒法:主要用于食品消毒,如下65维持30min.7.热空气灭菌法:160,2h可杀死芽孢。用于玻璃器皿消毒。8.紫外线灭菌:265nm波长的紫外线杀菌能力最强。用于实验室,养殖场入口的消毒室.手术室.种蛋等的空气消毒。9.电离辐射灭菌:称“冷灭菌”,用于一次性医用塑料制品消毒。10.滤过除菌法:所器具为滤菌器,其孔径为0.22-0.45um即细菌不能通过,但病毒.支原体可通过。11.紫外线消毒:有效距离不超过2-3m.1
13、2.消毒剂作用机制:使菌体蛋白变性.凝固(醇.酚.醛);干扰细菌代谢(酚类);改变细胞膜通透性(新洁尔灭)。13.能杀灭芽孢的消毒剂:氯制剂.过氧化化物.醛类。14.影响消毒药作用的因素:浓度.性质.作用时间;温度和酸碱度;细菌种类.数量状态;有机物。五主要的动物病原菌1.G+菌:球菌.李氏杆菌.炭疽.芽孢杆菌.梭菌.分支杆菌。2.链球菌:a链球菌:条件致病菌;B溶血链球菌:致病力强;r溶血链球菌:无溶血环,不致病;其血液琼脂平板:灰白.光滑.边缘整齐小菌落;猪链球菌z型在绵羊血平板呈a溶血,马血平板为B溶血;无芽孢.无鞭毛;症.败血症.脑膜炎.关节炎。3.蜂房球菌:即欧洲幼虫腐臭病原。厌氧培
14、养:白色.边缘光滑.表面微突起的菌落。4.大肠杆菌:为G-菌,无芽孢.有菌毛.有鞭毛.兼性厌氧;琼脂平板:圆形.隆起.光滑.湿润.灰白色.中等大小菌落;肉汤中:均匀混浊.管底形成黏性沉淀;发酵乳糖可产酸产气;麦康凯琼脂板:形成红色菌落;伊红美兰琼脂:产生黑色带金属闪光的菌落;绵羊血平板:呈B溶血;其中产肠毒素大肠杆菌ETEC最常见;毒力因子:包括菌毛(黏附素).肠毒素.类脂A.K抗原.O特异多糖;诊断:取肝.脾.肾.小肠内容物.肠系膜淋巴结,分别在麦康凯和血平板上培养,再取典型菌落进行生化试验。5.沙门氏菌为G-菌,无芽孢,无荚膜,有鞭毛,兼性厌氧;但鸡白痢与鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛,无纤毛;普通
15、肉汤中:均匀浑浊;不可分解乳糖;麦康凯琼脂培养:无色,透明,圆形,光滑,扁平小菌落;毒力因子:菌毛,内毒素,肠毒素;诊断:需分离培养,生化鉴定;鼠伤寒沙门氏菌:致各种畜禽的副伤寒及人类食物中毒。6.多杀性巴氏杆菌为G-菌,无鞭毛,无芽孢,两极着色,兼性厌氧;麦康凯培养:不生长;血琼脂平板:露滴样小菌落,不溶血;血清肉汤中:液面形成菌环,管底出现粘稠沉淀;可分解葡萄糖,产酸不产气;可发酵甘鲁醇,山梨醇,木糖;引起的疾病:牛出败,猪肺疫,禽霍乱,兔巴氏杆菌病;毒力因子:荚膜,内毒素;诊断:染色镜检发现两极着色的短杆菌;用血琼脂分离培养后来,再接种于三糖铁培养基,使底部变黄;病料悬液皮下注射小鼠,多
16、在哪里48h内死亡。7.鸭疫里氏杆菌为G-菌,有荚膜,无芽孢,无鞭毛,瑞氏染色两极着色;巧克力板和二氧化碳箱中:无色素,圆形,光滑,1-2mm的菌落;血清肉汤中:轻微浑浊,少量沉淀;不发酵葡萄糖(区别多杀巴氏杆菌);只氧化酶,触酶试验为阳性;其余为阴性;主要症状:2-3周龄鸭大批死亡;诊断:取病鸭脑,心血,用巧克力培养基分离,再进行生化鉴定。快速特异诊断方法:PCR,凝集试验。8.副猪嗜血杆菌为G-菌,短杆状,无鞭毛,无芽孢,美兰染色两极浓染。4,5型为优势菌型,兼性厌氧;巧克力平板:圆形,光滑,边缘整齐,灰白,半透明的菌落;诊断:分离培养要求高,可用胰蛋白胨大豆琼脂。9.猪胸膜肺炎放线杆菌为
17、G-菌,小球杆菌,两极染色,有荚膜,有鞭毛,兼性厌氧。绵羊血平板:产生稳定的B溶血;金黄色葡萄球菌可增强其溶血圈(即.CAMP试验阳性);毒力因子:毒素(为穿孔毒素),荚膜;鉴定:绵羊血琼脂培养CAMP试验测脲酶活性及甘露醇发酵能力用琼扩试验鉴定血清型。10.布鲁氏菌为G-菌,球杆状,无鞭毛,无芽孢,严格需氧气,二氧化碳;马血清培养基中:透明小菌落;感染症状:猪牛流产,睾丸炎,人感染为波浪热,关节炎;毒力因子:内毒素,荚膜,透明质酸酶;诊断:采取流产胎儿胃内容物,肺等,作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检红色球杆菌(可初诊);以试管凝集试验和补体结合试验作为最后确诊;感染动物:先出现凝集反应,其次出
18、现补体结合反应,最后出现变应。11.鼻疽伯氏菌为G-菌,即鼻疽杆菌,无芽孢,无荚膜,不运动,专性需氧;绵羊血平板:正常菌落为光滑型,异常菌落为粗糙型;氧化酶试验阳性:脲酶试验阴性;可使石蕊牛乳产酸,凝固,胨化;施特劳斯反应:雄性豚鼠腹腔感染后可引起典型的睾丸炎和睾丸周围炎,睾丸肿胀化脓后破溃;毒力因子:荚膜多糖;诊断:用鼻疽菌素3-4滴滴入一侧眼结膜囊内,其眼结膜红肿并排出脓性分泌物,为阳性。12.支气管败血波氏杆菌为G-菌,小杆菌,无芽孢,兼性厌氧,融酶阳性;牛血平板:0.5-1mm,圆形,光滑,边缘整齐的菌落;麦康凯平板:菌落为兰灰色,周边有红色环,培养基为琥珀色;最有代表性的是:犬传染性
19、气管支气管炎(幼犬窝咳),兔传染性鼻炎;毒力因子:黏附素,毒素;诊断猪萎鼻:用试管凝集试验,1:80以上为阳性。13.产单核细胞李氏杆菌为G+菌,无芽孢,4时可繁殖,是冷藏食品主要病原菌之一;短杆菌,无芽孢,无荚膜,兼性厌氧;血平板中:为露滴状小菌落,呈B溶血,45斜射光线下关察,可见淡兰绿色荧光,(与猪丹毒相区别);临诊症状:败血,神经症,流产;诊断:动物试验:菌株分离培养制成悬混液小鼠腹腔注射观察死亡情况。14.炭疽芽孢杆菌为G+菌,是菌体最大的细菌,菌体两端平切,呈竹节状长链排列,无鞭毛,不运动;在机体内形成荚膜,不易形成芽孢;在人工培养或外界环境或尸体被剖解后,易形成芽孢;普通琼脂平板
20、:灰白,干燥,无光泽,不透明,边缘不整齐的粗糙型菌落;血琼脂平板:轻微溶血;肉汤中:成团的沉淀生长,无菌膜;青霉素培养基中:菌体形成串珠;毒力因子:荚膜,炭疽毒素;15.拟幼虫芽孢杆菌为G+菌,是美洲幼虫腐臭病病原;菌落为乳白,半透明,稍凸起,略具光泽;能发酵葡萄糖,产酸,能还原NO3为NO2-细菌培养物中可见到螺旋形的“巨鞭”。(16)产气荚膜梭菌即魏氏梭菌或产气荚膜杆菌;为细菌,直杆状,无鞭毛;芽孢位于菌体中央;创伤组织中形荚膜。牛乳培养基中:形成汹涌发酵;血平板上:形成双层溶环;毒力因子:外毒素、侵袭性酶;鉴定要点:厌氧生长、菌落整体、生长快、G+粗杆菌、不运动、双层溶血环、牛奶汹涌发酵
21、 、鸽胸肌注射后死亡。(17)牛分支杆菌(结核病)为G+菌,短而粗,专性需氧;抗酸,染色为红色或从杆菌。低于30度,或高于42度不生长;罗杰二氏培养基:粗糙、隆起、不透明、连缘不整齐、颗粒状、乳白色菌落;为细胞内寄生菌;结核菌素试验:即注射后,牛颈部皮肤肿胀厚度差大于4mm为阳性;但不能证明目前是否处于活动感染期。诊断:检测特异性抗体可确诊,抗体阳性意味着病情恶化。(18)、牛付给结核分支菌(副结核病)为G+菌,无鞭毛、无荚膜、无芽孢、抗酸染色为红色。为专性需氧菌;初次分离难;子牛最易感;为胞内生长菌;在体内先产生细胞免疫,再体液免疫。确诊:抗酸染色发现红色成丝的两端钝圆的中小杆菌。抗体检测:
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