尿液红细胞与形态优秀PPT.ppt
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1、尿液红细胞及形态学检查血尿的概念 镜下血尿:以传统的尿离心沉渣玻片涂片,在高镜下血尿:以传统的尿离心沉渣玻片涂片,在高倍镜下检查倍镜下检查1010个视野后,如每高倍视野中见到红个视野后,如每高倍视野中见到红细胞超过细胞超过3 35 5个,则定为镜下血尿。个,则定为镜下血尿。肉眼血尿:重症者尿呈洗肉水样或血色,称为肉肉眼血尿:重症者尿呈洗肉水样或血色,称为肉眼血尿。眼血尿。尿红细胞检测方法干化学分析法显微镜检查法(镜检)自动化尿沉渣分析仪法单克隆抗体免疫法 干化学法原理:利用尿液中红细胞内血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具原理:利用尿液中红细胞内血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化物酶
2、活性,可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态有过氧化物酶活性,可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态氧,后者可氧化有关色原氧,后者可氧化有关色原(如邻甲苯胺如邻甲苯胺)显色。因此,它既可检测红细显色。因此,它既可检测红细胞,也可检测游离血红蛋白,还可作为红细胞镜检的筛选法。胞,也可检测游离血红蛋白,还可作为红细胞镜检的筛选法。不足:吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或不足:吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或细菌过氧化物酶、尿细菌过氧化物酶、尿pHpH值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在大量维生素大量维生素
3、C C时,可由于竞争性抑制反应而使干化学隐血出现假阴性。时,可由于竞争性抑制反应而使干化学隐血出现假阴性。显微镜检查法(镜检)尿沉渣镜检的标准是:尿沉渣镜检的标准是:医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异样细胞等;沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异样细胞等;泌泌尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;尿液颜色、浊度、蛋白、尿液颜色、浊度、蛋白、亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异样者。亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异样者。对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议
4、,有学者认为镜检是对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议,有学者认为镜检是尿沉渣分析的参考标准,其重要意义是任何方法无可替代的,只要有尿沉渣分析的参考标准,其重要意义是任何方法无可替代的,只要有条件,最好每份标本都镜检。条件,最好每份标本都镜检。尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准是尿液红细胞检测的参考标准 。其不足是:。其不足是:有些红细胞在肾脏长时有些红细胞在肾脏长时间滞留,受机械作用裂开或在血管内发生溶血,形成间滞留,受机械作用裂开或在血管内发生溶血,形成HbHb尿,不能检出;尿,不能检出;规范化尿沉渣镜检操作较为繁琐(标准化操作步骤:簇新尿液规范化尿沉渣镜检操作较为繁琐(标准化操
5、作步骤:簇新尿液10ml10ml,1500r/min1500r/min离心离心5min5min后留后留0.2ml0.2ml尿沉渣,将尿沉渣充盈到标准尿沉渣尿沉渣,将尿沉渣充盈到标准尿沉渣计数板内,计算出红细胞数计数板内,计算出红细胞数/l/l););获得精确的试验结果,除需训获得精确的试验结果,除需训练有素、工作细致负责的技术人员外,还需对所用试验器材(标本收练有素、工作细致负责的技术人员外,还需对所用试验器材(标本收集器皿、离心机及计数板)进行标准化。集器皿、离心机及计数板)进行标准化。自动尿沉渣分析仪UF-100UF-100尿沉渣分析仪对尿液中有形成分干脆作荧光染色,利用流式细尿沉渣分析仪
6、对尿液中有形成分干脆作荧光染色,利用流式细胞仪原理,通过前向散射光强度胞仪原理,通过前向散射光强度(Fsc)(Fsc)、前向散射光脉冲宽度、前向散射光脉冲宽度(Fscw)(Fscw)、荧光强度荧光强度(Fls)(Fls)、荧光脉冲宽度、荧光脉冲宽度(Flw)(Flw)以及细胞电阻抗等参数来检测尿以及细胞电阻抗等参数来检测尿中有形成分的大小、长度、染色状况,从而区分尿中的各种有形成分,中有形成分的大小、长度、染色状况,从而区分尿中的各种有形成分,具有操作简洁、结果重复性好等特点。在红细胞检测方面,具有操作简洁、结果重复性好等特点。在红细胞检测方面,UF-100UF-100的的特点之一是同时供应尿
7、红细胞均一型和非均一型指标,对鉴别尿中红特点之一是同时供应尿红细胞均一型和非均一型指标,对鉴别尿中红细胞的来源有较大参考价值。细胞的来源有较大参考价值。结晶、菌尿结晶、菌尿 (草酸钙结晶和霉菌)导致假阳性,红细胞碎片及影红细(草酸钙结晶和霉菌)导致假阳性,红细胞碎片及影红细胞相对于一般红细胞而言其荧光染色敏感度下降,荧光强度弱而造成胞相对于一般红细胞而言其荧光染色敏感度下降,荧光强度弱而造成仪器漏检。仪器漏检。单克隆抗体免疫法 可将尿液中的红细胞或可将尿液中的红细胞或HbHb与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是敏感度高、特异性好。按每个红细胞敏感度高、特
8、异性好。按每个红细胞HbHb含量为含量为30pg30pg计,尿液中含有计,尿液中含有2 2个红细胞个红细胞/l/l(相当于(相当于0.5/HFP0.5/HFP)即可检出。其特异性体现在仅与人)即可检出。其特异性体现在仅与人HbHb起反应,假阳性率很低。由于其过于敏感,在正常人尿内含红细胞起反应,假阳性率很低。由于其过于敏感,在正常人尿内含红细胞(0 03/HFP3/HFP)时,即可发生反应。因此,不适合常规尿红细胞检查。)时,即可发生反应。因此,不适合常规尿红细胞检查。但当常规镜检与干化学法结果不能说明时,如尿中红细胞溶解和受某但当常规镜检与干化学法结果不能说明时,如尿中红细胞溶解和受某些物质
9、干扰干化学检查阳性,而镜检未找到红细胞,应用单克隆抗体些物质干扰干化学检查阳性,而镜检未找到红细胞,应用单克隆抗体免疫法可为尿中红细胞的性质供应鉴别诊断依据。免疫法可为尿中红细胞的性质供应鉴别诊断依据。综合评价尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准,但对尿中溶尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准,但对尿中溶解的红细胞不能检出。解的红细胞不能检出。干化学法可检测干化学法可检测HbHb,既有助于溶血性疾病的诊断,也可弥,既有助于溶血性疾病的诊断,也可弥补镜检不能检出破坏的红细胞之不足,还可作为尿红细胞补镜检不能检出破坏的红细胞之不足,还可作为尿红细胞镜检的筛选方法。但必需留意尿液分析仪及试剂带的
10、质量镜检的筛选方法。但必需留意尿液分析仪及试剂带的质量及在工作中可能出现的干扰因素。及在工作中可能出现的干扰因素。综合评价单克隆抗体免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特单克隆抗体免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特异性,但由于其过于敏感,不能用于常规检测;在镜检和异性,但由于其过于敏感,不能用于常规检测;在镜检和干化学法检测结果不行说明时,其有重要的鉴别诊断价值。干化学法检测结果不行说明时,其有重要的鉴别诊断价值。尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义,而且尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义,而且还能对尿红细胞形态进行分析,以确定血尿来源。但分析还能对尿红细胞形态进行分
11、析,以确定血尿来源。但分析过程易受某些因素的干扰,如酵母菌、精子等,当仪器出过程易受某些因素的干扰,如酵母菌、精子等,当仪器出现报警时,必需用镜检确认。现报警时,必需用镜检确认。尿红细胞形态学检查 主要用于鉴别肾性血尿和非肾性血尿。主要方法有:一般光镜、相差显微镜、扫描电镜、血液分析仪、尿液有形成分分析仪等。一般光镜检查通常,在高倍镜下(400倍)识别非染色细胞形态,此法由于缺乏色泽对比和立体感,常要求视察者有丰富娴熟的尿形态学阅历。改用染色法(甲基绿染色,结晶紫-沙黄染色,或瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。相差显微镜检查1968年,Kark探讨小组起先应用相差显微镜视察尿细胞等形态,1979年
12、澳大利亚的肾病学家Birch和Fairly应用于临床。相差显微镜反映红细胞立体感强,是目前检查尿红细胞形态最常用的方法。扫描电镜1983年,Fasseff用扫描电镜视察尿红细胞。由于立体感强,可敏感地视察到红细胞表面的微小变更。但因价格昂贵而难以普及于临床。尿液有形成分分析仪1995年,日本推出流式细胞技术为原理的尿液分析仪Sysmex UF-100,可将尿中成分作荧光染色后识别,如为肾性红细胞,散射光分布在图像左侧,非肾性红细胞在图像右侧,能有效地区分血尿来源。血液分析仪测定尿红细胞平均体积测定尿红细胞平均体积(MCV)(MCV):肾性红细胞以小型为主,:肾性红细胞以小型为主,MCVMCV小
13、于血小于血MCVMCV;MCV MCV72 fl72 fl;非肾性红细胞以正常为;非肾性红细胞以正常为主,主,MCVMCV大于血大于血MCVMCV。但用。但用MCVMCV时,要留意解除其他微时,要留意解除其他微粒的干扰。粒的干扰。视察红细胞体积分布图视察红细胞体积分布图(RDW)(RDW):具有客观、快速、精确、:具有客观、快速、精确、重复性好的特点。重复性好的特点。畸形红细胞分类 大红细胞:细胞体增大,中心淡,无双盘凹陷感。大红细胞:细胞体增大,中心淡,无双盘凹陷感。小红细胞:胞体小,外膜增厚,折光增加。小红细胞:胞体小,外膜增厚,折光增加。棘形红细胞:胞质常向一侧或多侧伸出、突起,如生芽样
14、。棘形红细胞:胞质常向一侧或多侧伸出、突起,如生芽样。环形红细胞(面包圈红细胞):因细胞内血红蛋白丢失或环形红细胞(面包圈红细胞):因细胞内血红蛋白丢失或胞浆聚集,形似面包圈样空心环状。胞浆聚集,形似面包圈样空心环状。新月形红细胞:红细胞如半月形。新月形红细胞:红细胞如半月形。颗粒形红细胞:胞质内有颗粒状的间断沉积,血红蛋白丢颗粒形红细胞:胞质内有颗粒状的间断沉积,血红蛋白丢失。失。皱缩红细胞:高渗尿中多见。皱缩红细胞:高渗尿中多见。影红细胞:低渗尿中多见。影红细胞:低渗尿中多见。红细胞碎片红细胞碎片 尿异形红细胞形态形成机制 红细胞通过有病理变更的肾小球滤膜,受到挤压损伤;红细胞通过有病理变
15、更的肾小球滤膜,受到挤压损伤;红细胞受到不同红细胞受到不同pHpH和渗透压持续变更的肾小管滤液的影响:和渗透压持续变更的肾小管滤液的影响:肾性血尿中由于红细胞本身受损,其形态已经发生变更,肾性血尿中由于红细胞本身受损,其形态已经发生变更,因此极易受肾小管滤液因此极易受肾小管滤液pHpH和渗透压变更的影响而发生形态和渗透压变更的影响而发生形态畸变。非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压损畸变。非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压损伤的前提,而且红细胞在肾小管滤液中流经的时间短暂,伤的前提,而且红细胞在肾小管滤液中流经的时间短暂,因而受滤液因而受滤液pHpH和渗透压变更的影响较小,故红细
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