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1、一、试验目的 1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;2.区分雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;3.驾驭试验果蝇的饲养、管理及试验处理方法和技术。二、试验原理二、试验原理 果蝇的优点:果蝇的优点:1.生活史短,生活史短,20-25条件下完成一个世代需条件下完成一个世代需12-15天。天。2.繁殖率高,一对果蝇可产卵繁殖率高,一对果蝇可产卵400-500只。只。3.个体小,饲养便利,培育费用低廉。个体小,饲养便利,培育费用低廉。4.突变率高。突变率高。5.形态简洁分辨。形态简洁分辨。6.染色体数目少,只有染色体数目少,只有4对,且具有较大的唾腺染色体。对,且具有较大的唾腺染色体。因
2、此,果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等探讨中最因此,果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等探讨中最好的模式动物。好的模式动物。三、试验材料、用具及试剂三、试验材料、用具及试剂 果蝇种类:野生型果蝇种类:野生型(18#)、残翅、残翅(2#)、白眼、白眼(22#)、黑檀体黑檀体(e#)、三隐性、三隐性(6#)。双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板或或 白纸、毛笔、乙醚、酒精。白纸、毛笔、乙醚、酒精。四、试验内容四、试验内容 1.果蝇的生活史果蝇的生活史 果蝇(果蝇(Drosophila melanogaster 2n=8)中文名:黑腹果蝇中文名:黑腹果蝇
3、 果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属,与家蝇是不同的种。蝇科、果蝇属,与家蝇是不同的种。果蝇的生活周期长短与温度关系很亲密。30以上的温度能使果蝇不育和死亡,15 以下则使它的生活周期延长,同时生活力也降低,果蝇培育的最适温度为20-25。从表中可以看出,25时,从卵到成虫约10天;在25时成虫约活2030天。生活史:生活史:属于完全变态。属于完全变态。最适温度:最适温度:20-25生活史周期:生活史周期:12-15 day(20-25)10 day(26)57 day(10)羽化后:羽化后:8-12h 后交配后交配 两天后产卵两天后产卵成
4、虫存活:成虫存活:20-30 day(25)卵:羽化后的雌蝇一般在卵:羽化后的雌蝇一般在12小时后起先交配,两天小时后起先交配,两天后才能产卵。卵长后才能产卵。卵长0.5mm,为椭圆形,腹面稍扁平,为椭圆形,腹面稍扁平,被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝(filament),它能使卵附着在食物,它能使卵附着在食物(或瓶壁或瓶壁)上,上,不致深陷到食物中去。不致深陷到食物中去。三三龄龄幼幼虫虫4.5mm,在在培育基上作沟穿孔。培育基上作沟穿孔。幼虫:从卵孵化出来后,经过两次蜕皮,发育成三龄幼幼虫:从卵孵化出来后,经过两次蜕皮,发育成三龄幼虫,此时体长可达虫,此时
5、体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部,。肉眼可见其前端稍尖部分为头部,上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透亮的唾液腺,上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透亮的唾液腺,透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧,精透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧,精巢较大,外观上是一明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作巢较大,外观上是一明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食,它们在培育基上爬行时,留为鉴别。幼虫活动力强而贪食,它们在培育基上爬行时,留下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好。下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好。蛹:幼虫生活蛹
6、:幼虫生活7-8天准备化蛹,化蛹前从培育基上爬出,天准备化蛹,化蛹前从培育基上爬出,附着在瓶壁上,渐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸附着在瓶壁上,渐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹壳颜色淡黄而松软,以后渐渐硬化,孔,后部有尾芽,起初蛹壳颜色淡黄而松软,以后渐渐硬化,变为深褐色,表明即将羽化了。变为深褐色,表明即将羽化了。成虫:幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最终从成虫:幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最终从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅膀尚未绽开,体表尚未完全几丁质化,故呈半透亮
7、的乳白色。膀尚未绽开,体表尚未完全几丁质化,故呈半透亮的乳白色。透过腹部体壁,可以看到黑色的消化系统。不久,变为短粗透过腹部体壁,可以看到黑色的消化系统。不久,变为短粗圆形,双翅绽开,体色加深。如野生型初为浅灰色,然后呈圆形,双翅绽开,体色加深。如野生型初为浅灰色,然后呈灰褐色。灰褐色。2.形态构造 头部:有一对复眼,三个单眼和一对触角。胸部:有三对足,一对翅和一对平衡棒。腹部:背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身有很多体毛和刚毛。3.成虫雌雄的鉴别成虫雌雄的鉴别果蝇果蝇识别识别果蝇果蝇识别识别果蝇果蝇识别识别雄果蝇雌果蝇果蝇果蝇识别识别果果蝇蝇识识别别雄果蝇雌果蝇4.果蝇常见
8、的几种突变类型果蝇常见的几种突变类型身身 体体 颜颜 色色野生型:灰色,符号为野生型:灰色,符号为+突变型:黑檀体色,符号为突变型:黑檀体色,符号为 e e眼眼 睛睛 颜颜 色色野生型:砖红色,符号为野生型:砖红色,符号为+突变型:白色,符号为突变型:白色,符号为 w w翅翅 膀膀 形形 状状野生型:圆卵型,长度约为腹部野生型:圆卵型,长度约为腹部的的2 2倍,符号倍,符号+残翅型:翅膀退化残缺不全,残翅型:翅膀退化残缺不全,符号符号 vg vg白眼白眼w,小翅小翅 m,X染色体染色体刚刚 毛毛 形形 状状野生型:刚毛长粗、黑硬、平直,野生型:刚毛长粗、黑硬、平直,先端略弯,符号先端略弯,符号
9、+焦刚毛:刚毛先端分叉弯曲,焦刚毛:刚毛先端分叉弯曲,符号符号sn3白眼白眼 w、小翅、小翅 m、焦刚毛、焦刚毛 sn(刚毛卷曲如烧焦状刚毛卷曲如烧焦状)(全在(全在X染色体)染色体)性状、染色体和基因型红眼(+)白眼(w)第一连锁群长翅(+)残翅(vg)其次连锁群灰身(+)黑檀体(e)其次连锁群第三连锁群长翅(+)小翅(m)第一连锁群直刚毛(+)卷刚毛(sn)第一连锁群灰身(+)黑体(b)其次连锁群5.果蝇的饲养果蝇的饲养1)培育基的配制)培育基的配制 果蝇以酵母菌为食,常接受发酵的培育基繁殖果蝇以酵母菌为食,常接受发酵的培育基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培育基常用玉米粉、米粉或香酵母菌来饲养果蝇
10、。培育基常用玉米粉、米粉或香蕉配制,本试验接受玉米粉红糖培育基,其配方如蕉配制,本试验接受玉米粉红糖培育基,其配方如下:下:果蝇培育基成分果蝇培育基成分配制方法 配制时先将水分成两份:一份用于加热溶解琼脂配制时先将水分成两份:一份用于加热溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,玉米粉要先用冷水搅拌,再和糖,另一份煮玉米粉,玉米粉要先用冷水搅拌,再加到煮沸琼脂红糖溶液中,边倒边搅拌。接着煮加到煮沸琼脂红糖溶液中,边倒边搅拌。接着煮15-20分钟,关掉火后再加入苯甲酸分钟,关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶用少量酒精促溶),要充分搅拌后再分装培育瓶。每瓶培育基厚度在,要充分搅拌后再分装培育瓶。每瓶培育基厚
11、度在2-3cm,置,置121高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌15分钟。分钟。待培育基冷却后,在培育基的表面滴加簇新酵母液,待培育基冷却后,在培育基的表面滴加簇新酵母液,插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。2)果蝇继代培育 将将果果蝇蝇转转移移到到新新配配制制的的培培育育基基中中繁繁殖殖。转转移移时时要要留留意意转转移移的的手手法法,不不要要使使果果蝇蝇从从两两个个瓶瓶口口的的接接缝缝处处飞飞出出。一一般般用用黑黑纸纸包包住住带带有有亲亲本本果果蝇蝇的的培培育育瓶瓶,使使其其飞飞入入带带有有新培育基的培育瓶新培育基的培育瓶准准备备转转移移果果蝇
12、蝇的的亲本及培育基亲本及培育基果蝇的转移果蝇的转移幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。6 6 果蝇性状的视察果蝇性状的视察1 1)果蝇的麻醉处理)果蝇的麻醉处理 在果蝇的性状视察、性别鉴定以及杂交亲在果蝇的性状视察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安本接种等操作中,应先将果蝇麻醉,使其保持安静状态。麻醉方法如下:静状态。麻醉方法如下:(1 1)准备一只与培育瓶口径相同的空瓶作为麻)准备一只与培育瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶,并配以脱脂棉塞。醉瓶,并配以脱脂棉塞。(2 2)去掉培育瓶棉塞,马上与麻醉瓶口相对,)去掉培育瓶棉塞,马上与麻醉瓶口相对,培育瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻
13、轻震拍培培育瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻轻震拍培育瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。育瓶,使果蝇落入麻醉瓶中。(3)滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内,快速将两瓶塞住,约30s,麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。留意:不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。2)视察 选取一张10 x10cm白纸,在白纸中心画一个半径为0.5cm小圆圈及圆心,在体视镜下找到圆圈后将白纸固定好,将麻醉后的果蝇放在白纸小圆圈内,用毛笔移动果蝇进行视察,视察完毕的果蝇务必倒入死蝇盛留器中刚好处死,防止品系间混杂。转移到麻醉瓶中视察结果麻醉时转移果蝇手法麻醉时转移果蝇手法果蝇的麻醉滴加乙醚的方法滴加乙醚的方法果蝇的麻醉剂果蝇的麻醉剂死亡果蝇的标记死死亡亡果果蝇蝇的的标标记记果蝇果蝇识别识别个体个体大大小小腹纹腹纹53腹部末端腹部末端尖尖圆圆性梳性梳无无有有 果蝇性状视察(3)眼睛的颜色(2)翅的大小(1)身体的颜色(4 4)刚毛形态)刚毛形态五.视察结果精品课件精品课件!精品课件精品课件!六.思索题1.描述果蝇的形态特征。描述果蝇的形态特征。2.如何从外部形态区分雌雄果蝇?如何从外部形态区分雌雄果蝇?
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