器官培养优秀PPT.ppt

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1、第第3章章 器官培育器官培育 大大 家家 好好！植物组织培育学植物组织培育学第第3章章 器官培育器官培育本章主要内容本章主要内容根的培育根的培育茎尖的培育茎尖的培育叶的培育叶的培育第第3章章 器官培育器官培育(1)一般驾驭离体根培育的取材部位和培育基的选一般驾驭离体根培育的取材部位和培育基的选择；择；(2)驾驭茎尖培育的种类和操作步骤；驾驭茎尖培育的种类和操作步骤；(3)驾驭茎段培育中材料的选择、处理及培育基的驾驭茎段培育中材料的选择、处理及培育基的调整；调整；(4)驾驭离体叶片的培育步骤；驾驭离体叶片的培育步骤；(5)一般驾驭胚胎培育的类型与各自的留意事项。一般驾驭胚胎培育的类型与各自的留意

2、事项。第第3章章 器官培育器官培育本章教学目的与要求本章教学目的与要求器官培育的定义：器官培育的定义：第第3章章 器官培育器官培育探讨器官的功能、分化、形探讨器官的功能、分化、形态建成；态建成；快速繁殖；快速繁殖；获得脱毒苗获得脱毒苗种质保藏等种质保藏等 指植物某一器官的全部或部分或器官指植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体培育，包括根、茎、叶、花、原基的离体培育，包括根、茎、叶、花、果实、种子等果实、种子等培育目的：培育目的：第一节第一节 根的培育根的培育 根培育的意义根培育的意义:1)是进行根系生理探讨的最优良试验体系是进行根系生理探讨的最优良试验体系;2)是探讨器官分化、形态建成的良

3、好体系；是探讨器官分化、形态建成的良好体系；3）可建立快速生长的根无性系。）可建立快速生长的根无性系。第第3章章 器官培育器官培育一、离体根的培育方法：一、离体根的培育方法：1 1、培育无菌苗、培育无菌苗2 2、切取、切取1.0cm1.0cm的根尖的根尖3 3、接种在、接种在WhiteWhite培育基或培育基或1/2MS1/2MS培育基中暗培育培育基中暗培育4 4、一周后，取侧根扩大培育，可得到离体根的、一周后，取侧根扩大培育，可得到离体根的无性系无性系第一节第一节 根的培育根的培育二、培育基：二、培育基：l无机离子较低的无机离子较低的White培育基培育基l或者或者2/3或或1/2的的MS、

4、B5培育基培育基三、影响离体根生长的因素三、影响离体根生长的因素第一节第一节 根的培育根的培育5 5、环境条件环境条件4 4、pHpH3 3、生长物质、生长物质2 2、培养基、培养基1 1、基因型、基因型影响因素影响因素其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育l一、含义及意义一、含义及意义l1 1、类型、类型l 茎茎尖尖分分生生组组织织培培育育：对对长长度度0.1mm0.1mm左左右右，含含1-21-2个个叶叶原原基基的的茎茎尖尖进进行行培培育育，目目的的是是获获得得无无病毒植株病毒植株l 一一般般茎茎尖尖培培育育：对对几几毫毫米米至至几几十十毫毫米米长长的的茎茎尖、芽尖及侧芽的培育，目的是快速繁殖

5、。尖、芽尖及侧芽的培育，目的是快速繁殖。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育2、茎尖培育的意义、茎尖培育的意义l无性系快速繁殖；无性系快速繁殖；l培育无病毒苗，品种改良；培育无病毒苗，品种改良；l理论基础探讨。理论基础探讨。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育蝴蝶兰腋芽萌发蝴蝶兰腋芽萌发二、茎尖培育的一般方法二、茎尖培育的一般方法l(一一)制备外植体制备外植体取取1-2cm1-2cm的枝条顶梢，去小叶的枝条顶梢，去小叶-消毒消毒-解剖镜下用解解剖镜下用解剖刀除去幼叶和叶原基，露诞生长点，切下剖刀除去幼叶和叶原基，露诞生长点，切下0.1-0.2mm0.1-0.2mm长的茎尖长的茎尖(含含1-21-2

6、个叶原基个叶原基)l(二二)培育基：一般为培育基：一般为MSMSl(三三)培育方法：培育方法：l1 1、固体培育法：试管培育、固体培育法：试管培育其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育2 2、纸桥培育法、纸桥培育法含含义义：用用酒酒杯杯状状的的滤滤纸纸代代替替琼琼脂脂，使使杯杯底底朝朝上上塞塞入入试试管管中中，与与液液体体培培育育基基接接触触，将将离离体体茎茎尖尖置置于滤纸上方进行培育。于滤纸上方进行培育。优点：培育基是液体培育基，养分物质优点：培育基是液体培育基，养分物质能通过滤纸均衡而长久地供应外植体，能通过滤纸均衡而长久地供应外植体，有利于外植体的健康成长有利于外植体的健康成长 ；缺点：操作

7、工艺困难缺点：操作工艺困难 。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育三、茎尖分生组织培育与脱毒三、茎尖分生组织培育与脱毒l见第八章见第八章 植物脱毒技术植物脱毒技术四、一般茎尖培育与繁殖技术四、一般茎尖培育与繁殖技术l概概念念：快快速速繁繁殖殖(微微繁繁殖殖):用用组组织织培培育育的的方方法法，使使植植物物的的部部分分器器官官、组组织织快快速速扩扩大大培培育育，繁繁殖殖出出大量幼苗的繁殖方法。大量幼苗的繁殖方法。l特特点点：繁繁殖殖速速度度快快；运运用用材材料料少少，生生产产效效率率高高，省省时时省省工工；节节约约空空间间有有利利于于工工厂厂化化生生产产；不不受受病病虫害侵害。虫害侵害。其次节其次

8、节 茎尖的培育茎尖的培育（一）茎尖微繁技术的过程：分（一）茎尖微繁技术的过程：分5个阶段个阶段l1、无菌培育体系的建立、无菌培育体系的建立、l2、芽的增殖、芽的增殖l3、中间繁殖体的增殖、中间繁殖体的增殖l4、诱导生根、诱导生根l5、试管苗的移植、试管苗的移植其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育1、无菌培育体系的建立、无菌培育体系的建立初代培育建立的无性繁殖系包括：初代培育建立的无性繁殖系包括：茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。茎梢、芽丛、胚状体和原球茎等。外植体的制备外植体的制备培育基培育基培育条件培育条件其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育2、芽的增殖芽的增殖（1）顶芽和腋芽的发育）顶芽和腋芽的发

9、育l顶芽、侧芽生长，形成一个微型的小灌木丛状的顶芽、侧芽生长，形成一个微型的小灌木丛状的丛生苗结构。丛生苗结构。l丛生苗的每个枝条转接继代，可快速获得多数的丛生苗的每个枝条转接继代，可快速获得多数的嫩茎。这种繁殖方式称作微型扦插或无菌短枝扦嫩茎。这种繁殖方式称作微型扦插或无菌短枝扦插插l优点：不经愈伤组织，所以最能使无性系后代保优点：不经愈伤组织，所以最能使无性系后代保持原品种的特性。持原品种的特性。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育图示茎段培育过程图示茎段培育过程健康植株上选健壮的枝梢健康植株上选健壮的枝梢植株再生植株再生培育培育75%酒精酒精1分钟分钟1%次氯酸钠次氯酸钠0.1%升汞升汞去

10、叶片用水冲洗茎段去叶片用水冲洗茎段（2）不定芽的发育）不定芽的发育 不定芽产生的途径：不定芽产生的途径：外植体上干脆产生外植体上干脆产生由外植体诱导的愈伤组织上产生。由外植体诱导的愈伤组织上产生。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育外植体外植体脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化器官原基器官原基其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育l由其次阶段芽的增殖产生的数量有限的芽、苗、由其次阶段芽的增殖产生的数量有限的芽、苗、原球茎称为中间繁殖体。原球茎称为中间繁殖体。l将之转接到簇新的相同培育基上进行继代培育，将之转接到簇新的相同培育基上进行继代培育，3-43-4周转接一次，扩大培育。周转接一次，扩大培

11、育。3、中间繁殖体的增殖、中间繁殖体的增殖茎的培育发育方向茎的培育发育方向v腋芽萌发腋芽萌发v脱分化后产生胚状体（原球茎）脱分化后产生胚状体（原球茎）v脱分化后干脆产生不定器官脱分化后干脆产生不定器官v脱分化后形成愈伤组织脱分化后形成愈伤组织其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育4、壮苗和生根、壮苗和生根壮苗目的壮苗目的：使增殖的嫩枝生根产生小植：使增殖的嫩枝生根产生小植 株，以便移栽。株，以便移栽。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育l用用WhiteWhite、1/21/2或或1/3MS1/3MS、B5B5等生根培育基。等生根培育基。l降低降低N N，P P，K K盐的量。盐的量。l适当加大生长素

12、（如适当加大生长素（如NAANAA），不用或少用细胞分），不用或少用细胞分裂素，或在无激素的培育基上生根。裂素，或在无激素的培育基上生根。l蔗糖降低到蔗糖降低到1.0-1.5%1.0-1.5%，以增加植株自养实力；，以增加植株自养实力；l加入加入1%1%左右的活性炭；左右的活性炭；l增加光强度，以提高小植株的光合实力。增加光强度，以提高小植株的光合实力。其次节其次节 茎尖的培育茎尖的培育试管苗生根的措施试管苗生根的措施(二二)影响茎尖培育微繁殖的因素影响茎尖培育微繁殖的因素l基因型基因型l外植体的大小外植体的大小l供试植株的生理状态供试植株的生理状态l芽在植株上的部位芽在植株上的部位l供试植株

13、的年龄供试植株的年龄l培育基培育基l褐变褐变l玻璃化玻璃化一、定义：一、定义：离体叶的培育是指包括叶原基、叶柄、离体叶的培育是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培育。叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培育。第三节第三节 叶的培育叶的培育第第3章章 器官培育器官培育叶培育的意义：叶培育的意义：1、是探讨叶形态建成、光合作用、叶绿素形成、是探讨叶形态建成、光合作用、叶绿素形成的好方法的好方法2、通过叶组织的脱分化与再分化以证明叶细胞、通过叶组织的脱分化与再分化以证明叶细胞的全能性的全能性3、通过叶组织培育，探究离体叶组织培育的条、通过叶组织培育，探究离体叶组织培育的条件和影响因素件和影

14、响因素4、建立体细胞快速无性繁殖体系、建立体细胞快速无性繁殖体系5、叶细胞培育物经诱变筛选突变体。、叶细胞培育物经诱变筛选突变体。第三节第三节 叶的培育叶的培育二、叶组织培育的方法二、叶组织培育的方法1、制备外植体：、制备外植体：幼嫩叶片幼嫩叶片-水洗水洗-消毒消毒-无菌水洗。无菌水洗。2、影响培育因素：、影响培育因素：1）6-BA和和KT利于芽的形成；利于芽的形成；2,4-D利于愈伤组织形成。利于愈伤组织形成。2）极性：叶片腹面对上放置利于芽的分化）极性：叶片腹面对上放置利于芽的分化3）损伤：常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽。）损伤：常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽。第三节第三节

15、 叶的培育叶的培育三、离体叶组织中再生植株发生途径三、离体叶组织中再生植株发生途径1 1、干脆产生不定芽、干脆产生不定芽2 2、离体叶、离体叶 愈伤组织愈伤组织 不定芽不定芽3 3、离体叶、离体叶 愈伤组织愈伤组织 胚状体胚状体 不定芽不定芽4 4、离体叶、离体叶 小鳞茎或球状体小鳞茎或球状体 愈伤组织愈伤组织 第三节第三节 叶的培育叶的培育番茄子叶培育番茄子叶培育百合鳞叶培育百合鳞叶培育第三节第三节 叶的培育叶的培育烟草叶片培育烟草叶片培育叶的培育：叶的培育：(1)植物器官培育的含义。植物器官培育的含义。(2)离体根培育的方法、培育基、影响离体根生长的因素。离体根培育的方法、培育基、影响离体根生长的因素。(3)茎尖培育的含义；茎尖培育包括一般茎尖培育和茎尖分茎尖培育的含义；茎尖培育包括一般茎尖培育和茎尖分生组织培育。生组织培育。(4)纸桥培育的含义纸桥培育的含义(5)茎尖微繁一般的过程茎尖微繁一般的过程(6)离体叶组织脱分化和再分化中，茎和芽分化主的离体叶组织脱分化和再分化中，茎和芽分化主的4个途径个途径(7)试管苗诱导生根方法。试管苗诱导生根方法。第第3章章 器官培育器官培育本章小结：本章小结：第第3章章 器官培育器官培育