最新天然药物化学教学资料 天然药化9.生物碱-3教学课件.ppt

《最新天然药物化学教学资料 天然药化9.生物碱-3教学课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《最新天然药物化学教学资料 天然药化9.生物碱-3教学课件.ppt（115页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、天然药物化学教学资料天然药物化学教学资料 天天然药化然药化9.9.生物碱生物碱-3-3生物生物生物生物碱盐碱盐碱盐碱盐一般易溶于水，可溶于醇一般易溶于水，可溶于醇一般易溶于水，可溶于醇一般易溶于水，可溶于醇无机酸盐有机酸盐；无机酸盐中含氧酸盐无机酸盐有机酸盐；无机酸盐中含氧酸盐无机酸盐有机酸盐；无机酸盐中含氧酸盐无机酸盐有机酸盐；无机酸盐中含氧酸盐卤代酸盐；小分子有机酸盐大分子有机卤代酸盐；小分子有机酸盐大分子有机卤代酸盐；小分子有机酸盐大分子有机卤代酸盐；小分子有机酸盐大分子有机酸盐酸盐酸盐酸盐溶解性溶解性溶解性溶解性特殊的特殊的特殊的特殊的化合物化合物化合物化合物吗啡吗啡吗啡吗啡为酸性叔胺

2、碱：难溶于氯仿、乙醚，为酸性叔胺碱：难溶于氯仿、乙醚，为酸性叔胺碱：难溶于氯仿、乙醚，为酸性叔胺碱：难溶于氯仿、乙醚，可可可可溶于水溶于水溶于水溶于水石蒜碱叔胺碱：难溶于有机溶剂，溶于水石蒜碱叔胺碱：难溶于有机溶剂，溶于水石蒜碱叔胺碱：难溶于有机溶剂，溶于水石蒜碱叔胺碱：难溶于有机溶剂，溶于水喜树碱：不溶于一般有机溶剂，而溶于酸喜树碱：不溶于一般有机溶剂，而溶于酸喜树碱：不溶于一般有机溶剂，而溶于酸喜树碱：不溶于一般有机溶剂，而溶于酸性氯仿性氯仿性氯仿性氯仿高石蒜碱的盐酸盐：难溶于水，易溶于氯高石蒜碱的盐酸盐：难溶于水，易溶于氯高石蒜碱的盐酸盐：难溶于水，易溶于氯高石蒜碱的盐酸盐：难溶于水，易

3、溶于氯仿仿仿仿盐酸小檗碱、麻黄碱草酸盐：难溶于水盐酸小檗碱、麻黄碱草酸盐：难溶于水盐酸小檗碱、麻黄碱草酸盐：难溶于水盐酸小檗碱、麻黄碱草酸盐：难溶于水1.原理：原理：盐盐易溶于水。易溶于水。易溶于水。易溶于水。使中使中药中的生物碱中的生物碱转为盐类，提高了生物碱在水中的溶解度，提高了生物碱在水中的溶解度 水或酸水提取法（盐酸水或酸水提取法（盐酸 硫酸硫酸 醋酸醋酸 酒石酸）酒石酸）浸渍浸渍 渗漉或煎煮渗漉或煎煮 酸水提取液（盐）酸水提取液（盐）离子交换树脂法离子交换树脂法 沉淀法沉淀法 萃取法萃取法总生物碱总生物碱*（一）水或酸水提取法（一）水或酸水提取法2.方法：方法：药材粗粉药材粗粉0.5

4、%盐酸盐酸或或 硫酸或醋酸或酒石酸硫酸或醋酸或酒石酸浸渍浸渍、渗漉或煎煮、渗漉或煎煮 酸水提取液（盐）酸水提取液（盐）Con.c 酸水浓缩提取液（盐）酸水浓缩提取液（盐）（一）（一）水或酸水提取法水或酸水提取法3.特点：特点：多采用冷提法；多采用冷提法；体体积大、大、浓缩难、水溶性、水溶性杂质多多4.解决方法：解决方法：离子交离子交换树脂或沉淀法、萃取法脂或沉淀法、萃取法碱化碱化酸水酸水浓缩提取液（盐）浓缩提取液（盐）二二.萃取法萃取法总生物碱总生物碱碱化碱化正丁醇层正丁醇层 水溶性生物碱水溶性生物碱脂溶性总生物碱脂溶性总生物碱有机溶剂有机溶剂 回收回收 碱水碱水 阳阳离离子子交交换换树树脂脂

5、法法沉淀沉淀/盐析盐析一一.沉淀法沉淀法三三.离子交换离子交换树脂法树脂法水洗水洗干燥干燥（一）酸水提取法（一）酸水提取法碱水碱水 正丁醇正丁醇 碱水碱水 雷氏铵雷氏铵盐法盐法季铵碱盐季铵碱盐酸水酸水浓缩提取液（盐）浓缩提取液（盐）（一）酸水提取法（一）酸水提取法沉淀法：沉淀法：1.适于适于碱性弱碱性弱的生物碱的生物碱沉淀沉淀 总生物碱总生物碱（不溶或难溶的（不溶或难溶的AlK）水溶性水溶性AlK或杂质或杂质 雷氏铵盐雷氏铵盐 沉淀法沉淀法水溶性水溶性AlK 沉淀沉淀黄藤黄藤1%硫酸酸水硫酸酸水浓缩提取液（盐）浓缩提取液（盐）（一）酸水提取法（一）酸水提取法沉淀法：沉淀法：2.盐析法：析法：适

6、于适于中等弱碱性的中等弱碱性的生物碱生物碱沉淀沉淀掌叶防己碱掌叶防己碱沉淀沉淀碱化至碱化至PH=9，加，加NaCL达饱和达饱和水溶性水溶性AlK或杂质或杂质 雷氏铵盐雷氏铵盐 沉淀法沉淀法水溶性水溶性AlK 沉淀法小结沉淀法小结1.酸提碱沉酸提碱沉 碱性弱生物碱碱性弱生物碱2.盐析法析法 中等极性生物碱中等极性生物碱:掌叶防己碱掌叶防己碱-PH93.沉淀生物碱沉淀生物碱 雷氏雷氏铵盐沉淀法沉淀法:水溶性生物碱水溶性生物碱药材药材药材药材 醇（甲、乙）类溶剂提取法醇（甲、乙）类溶剂提取法 渗漉渗漉 浸渍浸渍 回流回流 醇提取液（盐醇提取液（盐 游离）游离）回收回收 总生物碱总生物碱 酸碱处理酸碱

7、处理 较纯的总生物碱较纯的总生物碱*用此法用此法时，若有，若有水溶水溶性生物碱存在于水液中，性生物碱存在于水液中，可用丁醇或戊醇直接萃可用丁醇或戊醇直接萃取取。1.1.原理：原理：原理：原理：生物碱生物碱生物碱生物碱盐盐、游离生游离生游离生游离生物碱均易于醇物碱均易于醇物碱均易于醇物碱均易于醇 2.2.方法：方法：方法：方法：3.3.特点：特点：特点：特点：水溶性水溶性水溶性水溶性杂质杂质比比比比酸水提取法少，但含酸水提取法少，但含酸水提取法少，但含酸水提取法少，但含较较多的脂溶性多的脂溶性多的脂溶性多的脂溶性杂质杂质（二）（二）醇类溶剂提取醇类溶剂提取 药材粉末材粉末 生生药残渣残渣 乙醇液

8、部分乙醇液部分 60%-80%乙醇乙醇室温或回流提取室温或回流提取 胶胶质残渣残渣 稀酸液稀酸液 残渣残渣 乙乙醚部分部分 氯仿部分仿部分 水溶液部分水溶液部分 总碱碱1总碱碱2总碱碱3水洗水洗,干燥干燥,回收回收 水洗水洗,干燥干燥,回收回收 丁醇提取丁醇提取,蒸干蒸干 碱化，分碱化，分别用用 乙乙醚氯仿提取仿提取2%稀酸提取多次稀酸提取多次 1.原理：游离生物碱原理：游离生物碱-有机溶有机溶剂提取提取-原料一般原料一般须碱化碱化 （三）（三）亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法（苯苯/二氯甲烷二氯甲烷/氯仿氯仿）冷浸 回流 提取液（游离）回收 总生物碱 原料碱化2.

9、特点：只含特点：只含亲脂性生物碱、脂性生物碱、杂质少少 溶剂成本高，提取时间较长，不安全，有毒性，易燃溶剂成本高，提取时间较长，不安全，有毒性，易燃药材粉末（生物碱材粉末（生物碱盐形式）形式）湿湿润粉末粉末 提取液提取液 有机溶有机溶剂部分部分 稀酸部分稀酸部分 少量碱性水湿少量碱性水湿润 非极性溶非极性溶剂提取多次提取多次 CH2Cl2,CHCl3,Et2O 稀酸水稀酸水 3.方法：方法：（三）（三）碱化碱化-亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法加氨水加氨水/Na2CO3/石灰乳石灰乳 稀酸部分稀酸部分 稀酸部分稀酸部分 乙乙醚,CHCl3部分部分乙乙醚部分部分 CHCl3部分部分 水溶

10、液部分水溶液部分 总碱碱1 过滤后用乙后用乙醚,CHCl3分分别去去杂 加加1%氨水碱化，氨水碱化，乙乙醚,CHCl3提取提取 水洗水洗,干燥干燥 回收乙回收乙醚 总碱碱2 水洗水洗,干燥干燥 回收回收 CHCl3（三）（三）碱化碱化-亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法若生物碱若生物碱为弱碱弱碱,多以游离碱存在多以游离碱存在,则处理方法稍有理方法稍有不同不同:用用少量水或稀有机酸水少量水或稀有机酸水润湿，有机溶湿，有机溶剂固液固液提取提取药材粉末（游离弱生物碱）材粉末（游离弱生物碱）生生药残渣残渣 乙乙醚或或氯仿提取部分仿提取部分 酸水部分酸水部分 酸水提取酸水提取多次多次 少量水湿少量

11、水湿润 乙乙醚或或氯仿提取多次仿提取多次（三）（三）碱化碱化-亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法 酸水部分酸水部分 水部分水部分 CHCl3部分部分 碱化，碱化，CHCl3提取多次提取多次 过滤后用乙后用乙醚，CHCl3分分别去去杂 稀酸部分稀酸部分 乙乙醚或或CHCl3部分部分 弱碱性生物碱弱碱性生物碱总碱碱 干燥，回收乙干燥，回收乙 醚或或CHCl3（三）（三）碱化碱化-亲脂性有机溶剂提取法亲脂性有机溶剂提取法 超声波提取法超声波提取法:微波萃取法：微波萃取法：CO2超超临界提取：界提取：水蒸气蒸水蒸气蒸馏法：法：麻黄碱等麻黄碱等挥发性的生物碱性的生物碱 其他提取生物碱的技术其他提取

12、生物碱的技术1.沉淀法沉淀法2.溶溶剂法法3.大孔大孔树脂法脂法（四）水溶性生物碱提取方法（四）水溶性生物碱提取方法（1）雷氏）雷氏铵盐沉淀法沉淀法:水溶性生物碱水溶性生物碱n n原理：原理：1.沉淀法沉淀法雷氏铵盐沉淀法雷氏铵盐沉淀法 季胺碱的水液 酸化至弱酸性 酸水液酸水液 雷氏铵盐沉淀（生物碱雷氏盐）雷氏铵盐沉淀（生物碱雷氏盐）丙酮溶解，过漉 丙酮液丙酮液 加硫酸银饱和水溶液，过漉 滤液（生物碱硫酸盐）加氯化钡溶液 生物碱盐酸盐生物碱盐酸盐 1.沉淀法沉淀法雷氏铵盐（硫氰酸铬钾）或磷酸盐、硅酸盐等雷氏铵盐沉淀法雷氏铵盐沉淀法 季胺碱的水液 酸化至弱酸性 酸水液酸水液 雷氏铵盐（硫氰酸铬钾

13、）雷氏铵盐沉淀（生物碱雷氏盐）雷氏铵盐沉淀（生物碱雷氏盐）丙酮溶解，过漉 丙酮液丙酮液 交换树脂柱交换树脂柱 生物碱盐酸盐生物碱盐酸盐 过氧化铝柱过氧化铝柱，丙酮洗脱 丙酮液丙酮液 加硫酸银饱和水溶液，过漉 漉液（生物碱硫酸盐）加氯化钡溶液 生物碱盐酸盐生物碱盐酸盐 1.沉淀法沉淀法1.沉淀法沉淀法（2）盐析法：析法：三三颗针-小檗碱小檗碱-10%NaCl 小檗科：三颗小檗科：三颗针n n小檗碱：黄色小檗碱：黄色小檗碱：黄色小檗碱：黄色针针状状状状结结晶，具晶，具晶，具晶，具5.55.5结结晶水，晶水，晶水，晶水，mp145mp145，能能能能缓缓缓缓溶于冷水中（溶于冷水中（溶于冷水中（溶于冷

14、水中（1:201:20），微溶于冷乙醇），微溶于冷乙醇），微溶于冷乙醇），微溶于冷乙醇（1:1001:100），），），），易溶于易溶于易溶于易溶于热热水和水和水和水和热热乙醇乙醇乙醇乙醇，难难溶于苯，溶于苯，溶于苯，溶于苯，氯氯仿仿仿仿和丙和丙和丙和丙酮酮，与酸，与酸，与酸，与酸结结合成合成合成合成盐时盐时失去一分子水，失去一分子水，失去一分子水，失去一分子水，其硝酸其硝酸其硝酸其硝酸盐盐和和和和氢氢碘酸碘酸碘酸碘酸盐盐极极极极难难溶于水溶于水溶于水溶于水，盐盐酸酸酸酸盐盐（l:500l:500）微溶于冷微溶于冷微溶于冷微溶于冷水，水，水，水，较较易溶于沸水，易溶于沸水，易溶于沸水，易溶于沸

15、水，几乎不溶于乙醇，其几乎不溶于乙醇，其几乎不溶于乙醇，其几乎不溶于乙醇，其硫酸硫酸硫酸硫酸盐盐（l:30l:30 ），），），），磷酸磷酸磷酸磷酸盐盐（l:15l:15 ）在水中溶解度）在水中溶解度）在水中溶解度）在水中溶解度较较大。小檗碱大。小檗碱大。小檗碱大。小檗碱盐盐酸酸酸酸盐盐称作称作称作称作盐盐酸小檗碱。酸小檗碱。酸小檗碱。酸小檗碱。n n利用利用利用利用小檗碱与含氧酸小檗碱与含氧酸小檗碱与含氧酸小檗碱与含氧酸（硝酸例外）所成（硝酸例外）所成（硝酸例外）所成（硝酸例外）所成盐盐在在在在水中溶水中溶水中溶水中溶解度解度解度解度较较大大大大的性的性的性的性质质，采用，采用，采用，采用稀

16、硫酸稀硫酸稀硫酸稀硫酸将其将其将其将其转变为转变为硫酸硫酸硫酸硫酸盐盐形形形形成式提取出来，再将小檗碱游离后，加入成式提取出来，再将小檗碱游离后，加入成式提取出来，再将小檗碱游离后，加入成式提取出来，再将小檗碱游离后，加入盐盐酸使其酸使其酸使其酸使其形成形成形成形成盐盐酸酸酸酸盐盐，结结合合合合盐盐析析析析法，使之沉淀析出。法，使之沉淀析出。法，使之沉淀析出。法，使之沉淀析出。2.溶溶剂法法 正丁醇或戊醇萃取碱水中的季正丁醇或戊醇萃取碱水中的季铵碱碱3.大孔大孔树脂法脂法:苯乙苯乙烯型或型或2-甲丙甲丙烯酸酸酯型的大孔吸型的大孔吸附附树脂网状小孔脂网状小孔结构，以构，以吸附和吸附和筛选结合合的

17、的方式分离方式分离生物碱水溶液上柱生物碱水溶液上柱，洗去水溶，洗去水溶性性杂质，适当的溶适当的溶剂(含水醇，醇，丙含水醇，醇，丙酮等等)洗脱。洗脱。-浙浙贝母母总碱：正丁醇碱：正丁醇-大孔吸附大孔吸附树脂脂二二.生物碱分离生物碱分离（一）不同（一）不同类别生物碱的分离生物碱的分离 分离依据：分离依据：分离依据：分离依据：生物碱的生物碱的生物碱的生物碱的碱性碱性碱性碱性强强弱弱弱弱（弱碱性弱碱性弱碱性弱碱性生物碱的生物碱的生物碱的生物碱的盐盐不不不不稳稳定；定；定；定；中中中中强强碱碱碱碱在在在在pH910pH910时时可以游离）可以游离）可以游离）可以游离）特殊官能特殊官能特殊官能特殊官能团团

18、（酚酚酚酚羟羟基基基基的酸性，可溶于的酸性，可溶于的酸性，可溶于的酸性，可溶于NaOHNaOH溶液）溶液）溶液）溶液）分离流程：分离流程：分离流程：分离流程：总生物碱的酸水液（盐）氯仿萃取 (1)(1)氯仿液氯仿液氯仿液氯仿液（弱碱性生物碱弱碱性生物碱弱碱性生物碱弱碱性生物碱）二二.生物碱分离纯化方法生物碱分离纯化方法(2)(2)酸水液酸水液酸水液酸水液 （强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）(1)(1)氯仿液氯仿液氯仿液氯仿液 （弱碱性生物碱弱碱性生物碱弱碱性生物碱弱碱性生物碱）12%NaOH萃取 碱水液 CHCl3液 NH4Cl处理，处理，

19、CHCl3萃取萃取 CHCl3液 回收 酚性弱碱性生物碱酚性弱碱性生物碱酚性弱碱性生物碱酚性弱碱性生物碱 回收 非酚性弱碱性生物碱非酚性弱碱性生物碱非酚性弱碱性生物碱非酚性弱碱性生物碱 NH4Cl/不用不用HCL (2)(2)酸水液酸水液酸水液酸水液 （强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）（强，中强碱性生物碱）氨水氨水碱化，碱化，pH910 CHCl3萃取萃取 CHCl3液 碱水液（强碱：季铵）12%NaOH萃取 酸化，雷氏铵盐沉淀 沉淀 分解沉淀 水溶性生物碱水溶性生物碱 碱水液 CHCl3液 NH4Cl处理，CHCl3萃取 回收 非酚性中强碱非酚性中强碱性生物碱

20、性生物碱 CHCl3液 回收 酚性中强碱性生物碱酚性中强碱性生物碱 PH12 正丁醇 水溶水溶性生性生物碱物碱 氨水碱化氨水碱化/不用不用NaOH 二二.生物碱分离纯化方法生物碱分离纯化方法（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离总总碱中各生物碱的碱性不同，可用碱中各生物碱的碱性不同，可用碱中各生物碱的碱性不同，可用碱中各生物碱的碱性不同，可用pHpH梯度萃取法梯度萃取法梯度萃取法梯度萃取法进进行行行行分离。分离。分离。分离。1.1.已知已知已知已知 pKa pKa：布朗斯特酸碱理：布朗斯特酸碱理：布朗斯特酸碱理：

21、布朗斯特酸碱理论论pKapKa与与与与pHpH的关系的关系的关系的关系 让碱碱100%游离游离 pH=pKa+lg100/1=pKa+2 让碱碱100%成成盐 pH=pKa-2n n2.未知未知pKa：利用利用多缓冲纸色谱（分配原理）进行先导分离：不同酸性不同酸性缓冲液依冲液依pH由高至低涂布，由高至低涂布，以以水水饱和和亲脂性有机脂性有机溶溶剂展开展开3.PH梯度萃取梯度萃取:（1）游离生物碱：将）游离生物碱：将总生物碱溶于生物碱溶于氯仿仿等等亲脂性有机溶脂性有机溶剂，以不，以不同酸性同酸性缓冲液依冲液依pH由高至低依次萃取由高至低依次萃取，生物碱可，生物碱可按碱性由按碱性由强至弱先至弱先后

22、成后成盐依次被萃取出而分离，分依次被萃取出而分离，分别碱化后以有机溶碱化后以有机溶剂萃取即可。萃取即可。（2）生物碱生物碱盐：将将总生物碱溶于酸水，生物碱溶于酸水，逐步加碱使逐步加碱使pH值由低至高，由低至高，每每调一次一次pH值，即用即用氯仿等有机溶仿等有机溶剂萃取，萃取，则各各单体生物体生物碱依碱依碱性由弱至碱性由弱至强先后成先后成盐依次被萃取出依次被萃取出而分离。而分离。（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离n n*碱性弱的生物碱易游离（脂溶性，易于CHCl3）。n n*碱性强的生物碱易成盐（离子型，易于水

23、）。依操作方式的不同，分离方法有二种依操作方式的不同，分离方法有二种依操作方式的不同，分离方法有二种依操作方式的不同，分离方法有二种混合总生物碱混合总生物碱 酸水溶解 酸水液（盐）酸水液（盐）加碱进行梯度碱化同时用CHCl3萃取，分别回收CHCl3 生物碱由弱到强依次被分离生物碱由弱到强依次被分离 CHCl3溶解 CHCl3溶液溶液(游离游离)用不同酸度(酸度由弱到强,pH 由大到小)的酸水进行梯度萃取,酸水液分别碱化,同时CHCl3萃取,回收CHCl3 生物碱由强到弱依次被分离生物碱由强到弱依次被分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（二）利用生物碱的碱性差异分离（

24、二）利用生物碱的碱性差异分离-小结小结1.利用生物碱溶解度不同：利用生物碱溶解度不同：分子结构的不同，极性的差异分子结构的不同，极性的差异 (三三)利用生物碱的溶解度差异分离利用生物碱的溶解度差异分离 苦参碱和氧化苦参碱混合物少量CHCl3溶解 CHCl3 液加入加入10倍量的乙醚倍量的乙醚 沉淀（氧化苦参碱）母液（苦参碱）苦参碱 氧化苦参碱 流程说明：氧化苦参碱氧化苦参碱的的 N O 半极性配位半极性配位键键，极极性大，性大，水中的溶解度水中的溶解度较较大大，而在乙，而在乙醚醚中的溶解度中的溶解度较较小小。防防 己己 防己生物碱防己生物碱 汉防己甲素汉防己甲素汉防己乙素（防己诺林碱）汉防己乙

25、素（防己诺林碱）双苄基异喹啉类生物碱双苄基异喹啉类生物碱 性性 质质 汉防己甲素汉防己甲素 R=CH3汉防己乙素汉防己乙素 R=H 1 2 3 n n1 1、白色白色白色白色结结晶，有旋光性晶，有旋光性晶，有旋光性晶，有旋光性。n n2 2、具、具、具、具脂溶性生物碱脂溶性生物碱脂溶性生物碱脂溶性生物碱的溶解性特点。的溶解性特点。的溶解性特点。的溶解性特点。汉汉防己乙素具防己乙素具防己乙素具防己乙素具隐隐性酚性酚性酚性酚羟羟基基基基，使极性，使极性，使极性，使极性较较大，大，大，大，冷苯中不溶冷苯中不溶冷苯中不溶冷苯中不溶，汉汉防己甲素防己甲素防己甲素防己甲素具具具具甲氧基甲氧基甲氧基甲氧基，

26、极性，极性，极性，极性较较小，溶于冷苯（用于分离）。小，溶于冷苯（用于分离）。小，溶于冷苯（用于分离）。小，溶于冷苯（用于分离）。n n3 3、中中中中强强碱（叔胺碱碱（叔胺碱碱（叔胺碱碱（叔胺碱），具有生物碱的通性（溶解性，），具有生物碱的通性（溶解性，），具有生物碱的通性（溶解性，），具有生物碱的通性（溶解性，沉淀反沉淀反沉淀反沉淀反应应）。）。）。）。n n*隐隐性酚性酚性酚性酚羟羟基基基基连结连结在苯在苯在苯在苯环环上的上的上的上的羟羟基称基称基称基称为为酚酚酚酚羟羟基，基，基，基，具具具具有酸性，可以和有酸性，可以和有酸性，可以和有酸性，可以和氢氢氧化氧化氧化氧化钠钠反反反反应应成成

27、成成盐盐；而；而；而；而汉汉防己乙防己乙防己乙防己乙素的酚素的酚素的酚素的酚羟羟基基基基处处于两个含氧基于两个含氧基于两个含氧基于两个含氧基团团之之之之间间，由于空，由于空，由于空，由于空间间位阻位阻位阻位阻等原因，等原因，等原因，等原因，不不不不显显示酚示酚示酚示酚羟羟基的通性基的通性基的通性基的通性，难难溶于溶于溶于溶于氢氢氧化氧化氧化氧化钠钠溶溶溶溶液，所以称液，所以称液，所以称液，所以称为隐为隐性酚性酚性酚性酚羟羟基。基。基。基。汉防己甲素和汉防己乙素混合物汉防己甲素和汉防己乙素混合物汉防己甲素和汉防己乙素混合物汉防己甲素和汉防己乙素混合物 冷苯溶解冷苯溶解 不溶物（汉防己乙素）冷苯液

28、 回收 汉防己甲素 汉防己甲素汉防己甲素 R=CH3 汉防己乙素汉防己乙素 R=H流程说明：流程说明：汉防己乙素的隐性酚羟基，使其极性较大，汉防己乙素的隐性酚羟基，使其极性较大，而在冷苯中的溶解度较小。而在冷苯中的溶解度较小。麻黄生物碱 麻黄碱，伪麻黄碱 有机胺类（苯丙胺衍生物）性质l麻黄碱（1R 2S）d伪麻黄碱(1S 2S)麻 黄 1 2 3 42.利用生物碱盐的溶解度不同分离利用生物碱盐的溶解度不同分离对特殊溶剂的溶解性能不同而分离对特殊溶剂的溶解性能不同而分离(三三)利用生物碱的溶解度差异分离利用生物碱的溶解度差异分离 1、无色无色结晶，有旋光性，有晶，有旋光性，有挥发性（性（水蒸水蒸

29、汽蒸汽蒸馏法提取）法提取）2、不能和多数生物碱沉淀、不能和多数生物碱沉淀试剂发生沉淀。生沉淀。CS2-CuSO4反反应-CS2-CuSO4-NaOH呈棕或黄色沉淀呈棕或黄色沉淀(仲胺特有仲胺特有)。铜络盐反反应-CuSO4,NaOH反反应，紫，紫红色色铜络盐（乙（乙醚中）。中）。3、碱性碱性较强（有机胺（有机胺类）:伪麻黄碱（碱的共麻黄碱（碱的共轭酸酸稳定定9.74）强于麻黄碱（于麻黄碱（9.58）。可用）。可用于二者分离。于二者分离。4、麻黄碱在水、乙麻黄碱在水、乙醚、氯仿、苯中均溶仿、苯中均溶，伪麻黄碱麻黄碱难溶于水溶于水；麻黄碱草酸麻黄碱草酸盐难溶于水，溶于水，伪麻黄碱草酸麻黄碱草酸盐易

30、溶于水。易溶于水。可用于二者分离。可用于二者分离。麻黄碱和麻黄碱和麻黄碱和麻黄碱和伪伪麻黄碱混合物麻黄碱混合物麻黄碱混合物麻黄碱混合物 甲苯溶解甲苯溶解 甲苯溶液甲苯溶液 流经流经12%草酸溶液草酸溶液 草酸溶液草酸溶液 减压浓缩，冷置，过滤减压浓缩，冷置，过滤 结晶（草酸麻黄碱）结晶（草酸麻黄碱）母液（草酸伪麻黄碱）母液（草酸伪麻黄碱）CaCl2转化转化 CaCl2转化转化 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱 流程说明流程说明:利用麻黄利用麻黄碱草酸碱草酸盐的水溶度的水溶度小于小于伪麻黄碱草酸麻黄碱草酸盐的水溶度的水溶度进行分离。行分离。麻黄提取工艺？n n含含羧基基的生物碱的生

31、物碱-碳酸碳酸氢钠水溶液萃取分离。水溶液萃取分离。n n含含酚酚羟基基的生物碱的生物碱-氢氧化氧化钠水溶液萃取分离水溶液萃取分离（吗啡和可待因）。啡和可待因）。n n含含内内酯或内或内酰胺胺结构的生物碱构的生物碱-用用热的的氢氧化氧化钠开开环，加酸加酸环合的性合的性质予以分离（喜予以分离（喜树碱）。碱）。(四四)利用特殊官能团的性质进行分离利用特殊官能团的性质进行分离n n例：含例：含酚酚羟基基的生物碱的生物碱-将混合物溶于氯仿中，用5%氢氧化钠萃取，酚性碱即转入碱水溶液中。将碱水萃取液调至偏酸性，使酚羟基游离，用氨水等弱碱碱化，再用氯仿萃取出酚性生物碱。(四四)利用特殊官能团的性质进行分离利

32、用特殊官能团的性质进行分离 吗啡和可待因混合物吗啡和可待因混合物 CHCl3溶解 氯仿溶液 12%NaOH溶液萃取溶液萃取 碱水液 CHCl3液 弱酸酸化CHCl3萃取 回收 可待因可待因 CHCl3液 吗吗 啡啡回收 吗吗啡啡啡啡 R=H R=H 可待因可待因可待因可待因 R=CH3R=CH3 (四四)利用特殊官能团的性质进行分离利用特殊官能团的性质进行分离 1.离子交换树脂法离子交换树脂法（1 1）将酸水液与阳离子交换树脂（多用）将酸水液与阳离子交换树脂（多用磺酸型磺酸型）进）进行交换，以与行交换，以与非生物碱成分分离非生物碱成分分离。（2 2）碱化：倒出，水洗，）碱化：倒出，水洗，碱液或

33、碱液或10%10%氨水氨水碱化碱化 （3 3）有机溶剂（如乙醚、氯仿、甲醇等）洗脱，回）有机溶剂（如乙醚、氯仿、甲醇等）洗脱，回收有机溶剂中的总生物碱收有机溶剂中的总生物碱。(五五)利用色谱法进行分离利用色谱法进行分离原理：原理：BHBH+ClCl-BH BH+ClCl-R R-H H+BH+BH+R R-BHBH+H +H+1.1.碱洗碱洗碱洗碱洗 /CHCL/CHCL3 3/乙醇洗脱乙醇洗脱乙醇洗脱乙醇洗脱树树脂脂脂脂 游离生物碱游离生物碱游离生物碱游离生物碱 R R-BHBH+NH+NH3 3H H2 2O RO R-NH NH 4 4 +B+H+B+H2 2OO2.2.酸洗酸洗酸洗酸洗

34、 /酸水酸水酸水酸水 /酸性乙醇酸性乙醇酸性乙醇酸性乙醇 生物碱生物碱生物碱生物碱盐盐 （补补充）充）充）充）R R-BHBH+H+H+ClCl-R R-H H+BH+BH+ClCl-（奎宁、（奎宁、（奎宁、（奎宁、东东莨菪碱、咖啡碱、石蒜碱等均采用了阳离子交莨菪碱、咖啡碱、石蒜碱等均采用了阳离子交莨菪碱、咖啡碱、石蒜碱等均采用了阳离子交莨菪碱、咖啡碱、石蒜碱等均采用了阳离子交换换树树脂法提取脂法提取脂法提取脂法提取 ）2.离子交换树脂法离子交换树脂法离子离子树脂法脂法优点点:纯度高；可用于度高；可用于纯化与分离；成本低化与分离；成本低药材粉末材粉末 药材残渣材残渣 提取液部分提取液部分 树脂

35、部分脂部分 水冲洗液水冲洗液 稀氨水部分稀氨水部分 生物碱生物碱总碱碱 浓缩 稀氨水洗脱稀氨水洗脱 通通过阳离子阳离子 树脂用水冲脂用水冲 水，或水，或0.5%-1%硫酸或硫酸或乙酸室温或回流提取多次乙酸室温或回流提取多次 离子交换树脂法离子交换树脂法2.吸附色吸附色谱法分离：法分离：生物碱（游离）生物碱（游离）生物碱（游离）生物碱（游离）为为脂溶性成分脂溶性成分脂溶性成分脂溶性成分，适合于采用，适合于采用，适合于采用，适合于采用吸附原吸附原吸附原吸附原理理理理进进行分离行分离行分离行分离n n吸附吸附吸附吸附剂剂：硅胶、硅胶、硅胶、硅胶、氧化氧化氧化氧化铝铝n n流流流流动动相相相相：中性的

36、苯，：中性的苯，：中性的苯，：中性的苯，氯氯仿，乙仿，乙仿，乙仿，乙醚醚等或混合有机溶等或混合有机溶等或混合有机溶等或混合有机溶剂剂。n n化合物：化合物：化合物：化合物：极性大、吸附牢极性大、吸附牢极性大、吸附牢极性大、吸附牢 RfRf小小小小官能官能官能官能团团极性极性极性极性：羧羧基基基基羟羟基基基基醛醛基基基基羰羰基基基基酰酯酰酯基基基基醚醚氧基双氧基双氧基双氧基双键键（羧羧基不一定比基不一定比基不一定比基不一定比羟羟基极性大）基极性大）基极性大）基极性大）1 1）极性官能）极性官能团团承担碳原子个数比例，碳越少，极性大承担碳原子个数比例，碳越少，极性大2 2）碱性大小和极性无相）碱性

37、大小和极性无相应应的关系的关系展开展开剂剂：极性越大，展开能力越极性越大，展开能力越强强（溶解前提下）（溶解前提下）（溶解前提下）（溶解前提下）(五五)利用色谱法进行分离利用色谱法进行分离n n（1）硅胶柱色）硅胶柱色谱（吸附能力弱（吸附能力弱 弱酸性）弱酸性）强碱性生物碱可能出碱性生物碱可能出现Rf太小或拖尾太小或拖尾 （与硅胶的弱酸性成（与硅胶的弱酸性成盐）碱性洗脱碱性洗脱剂（+少少许二乙胺或氨水）二乙胺或氨水）例：例：汉防己甲素防己甲素-OCH3极性小于乙素极性小于乙素-OH，先出柱，先出柱n n（2）氧化）氧化铝：长春碱春碱-CH3、长春新碱春新碱-CHO(五五)利用色谱法进行分离利用

38、色谱法进行分离3.分配色分配色谱法法 对一些一些极性很近似或极性极性很近似或极性较大大的生物碱的分的生物碱的分离，可以利用离，可以利用分配原理分配原理进行分离行分离，效果可能更，效果可能更佳（三尖杉佳（三尖杉酯碱和高三尖杉碱和高三尖杉酯碱）的分离。碱）的分离。(五五)利用色谱法进行分离利用色谱法进行分离三尖杉酯碱 R=高三尖杉酯碱 R=三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱混合物三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱混合物 支持剂 硅胶固定相 pH5.0缓冲液洗脱剂 pH5.0缓冲液饱和的氯仿液 高三尖杉酯碱 二者混合物 三尖杉酯碱 流程说明：利用流程说明：利用高三尖杉酯碱较三尖杉酯碱结构高三尖杉酯碱较三尖杉酯碱结构中多

39、一个中多一个 CH2，极性较小（流动相中易于分，极性较小（流动相中易于分配）而先被洗脱下来，配）而先被洗脱下来，三尖杉酯碱则后被洗脱下三尖杉酯碱则后被洗脱下来，中间为二者的混合物。来，中间为二者的混合物。II生物碱分离纯化方法生物碱分离纯化方法4.4.高效液相色谱高效液相色谱高效液相色谱高效液相色谱（三尖杉混合酯碱的分离）（三尖杉混合酯碱的分离）（三尖杉混合酯碱的分离）（三尖杉混合酯碱的分离）5.5.气相色谱气相色谱气相色谱气相色谱（挥发性生物碱）（挥发性生物碱）（挥发性生物碱）（挥发性生物碱）6.6.分步结晶法：分步结晶法：分步结晶法：分步结晶法：利用生物碱在不同溶剂中析晶速度快慢来纯化利用

40、生物碱在不同溶剂中析晶速度快慢来纯化利用生物碱在不同溶剂中析晶速度快慢来纯化利用生物碱在不同溶剂中析晶速度快慢来纯化 溶剂溶剂溶剂溶剂:乙醇、丙酮、甲醇等乙醇、丙酮、甲醇等乙醇、丙酮、甲醇等乙醇、丙酮、甲醇等 分离到的较纯晶体可以重结晶进一步纯化。分离到的较纯晶体可以重结晶进一步纯化。分离到的较纯晶体可以重结晶进一步纯化。分离到的较纯晶体可以重结晶进一步纯化。7.7.衍生物制备法衍生物制备法衍生物制备法衍生物制备法（成盐，成酯等）（成盐，成酯等）（成盐，成酯等）（成盐，成酯等）先使其成盐、成酯后再用分步结晶法加以分离先使其成盐、成酯后再用分步结晶法加以分离先使其成盐、成酯后再用分步结晶法加以分

41、离先使其成盐、成酯后再用分步结晶法加以分离HIHI酸，过氯酸，苦味酸盐最易结晶。酸，过氯酸，苦味酸盐最易结晶。酸，过氯酸，苦味酸盐最易结晶。酸，过氯酸，苦味酸盐最易结晶。8.液体液体生物碱混合物的分生物碱混合物的分馏分离法分离法 液体生物碱混合物可液体生物碱混合物可液体生物碱混合物可液体生物碱混合物可进进行分行分行分行分馏馏分离。如毒芹分离。如毒芹分离。如毒芹分离。如毒芹(Conium maculatumConium maculatum)中的毒芹碱，中的毒芹碱，中的毒芹碱，中的毒芹碱，羟羟基毒芹碱。基毒芹碱。基毒芹碱。基毒芹碱。毒芹碱毒芹碱(coniine)羟基毒芹碱基毒芹碱(Conhydri

42、n)(m.p.166-167)(m.p.116)II生物碱分离纯化方法生物碱分离纯化方法石榴皮碱石榴皮碱 异石榴皮碱异石榴皮碱 甲基异石榴皮碱甲基异石榴皮碱 Punicine Isopelletrerine Methyisopelletrerine(m.p.195)(m.p.86)（m.p.114-117)石榴皮石榴皮(Punica granatum L.)中的石榴皮碱、异石中的石榴皮碱、异石榴皮碱和甲基异石榴皮碱。榴皮碱和甲基异石榴皮碱。II生物碱分离纯化方法生物碱分离纯化方法生物碱概述生物碱概述生物碱的化学生物碱的化学结构和分构和分类生物碱的理化性生物碱的理化性质生物碱的提取和分离生物碱的

43、提取和分离生物碱的生物碱的结构构鉴定定二二四四3 一一3 三三3 五五第十三章第十三章 生物碱生物碱一一.UV法法 生色生色团（羰基、双基、双键、苯基和硝基等、苯基和硝基等）第五节、生物碱的结构鉴定第五节、生物碱的结构鉴定(1)生色团接在生色团接在整体整体结构中：结构中：其他如：吡其他如：吡啶类、吖啶酮类、小檗碱、小檗碱类等。等。UV(CH3OH)230270314UV(CH3OH)230 (sh)300-315 (2sh)喹啉啉类吲哚类 生色生色团在生物碱的整体在生物碱的整体结构中构中时，UV可以反映其骨可以反映其骨架架类型特征。型特征。UV(CH3OH)247 (4.26)267 (4.1

44、9)309 (3.78)349 (3.81)400 (3.81)氧化劳瑞林(1)生色团接在生色团接在整体整体结构中：结构中：靛青苷 阿朴菲aporphine土藤碱tuduranine不同不同不同不同类类型型型型B B有相同的有相同的有相同的有相同的UVUV光光光光谱谱，不能由不能由不能由不能由UVUV谱谱推断生物推断生物推断生物推断生物碱的骨架碱的骨架碱的骨架碱的骨架类类型型型型 a.单生色生色团接在主体接在主体结构中：构中：莨菪莨菪烷、苄基四基四氢异异喹啉啉类、普、普罗托品托品类等。等。UV(CH3OH)230282-289UV(CH3OH)230282-290阿托品阿托品 四四氢原小檗碱原

45、小檗碱(2)生色团接在主体结构中：生色团接在主体结构中：b.双生色双生色团接在主体接在主体结构中：构中：UV(CH3OH)215 228-235取代苯取代苯-二二烯酮UV(CH3OH)228-232 278 311-322取代苯取代苯-萘类前前莲碱碱 二二氢血根碱血根碱(1)生色团接在主体结构中：生色团接在主体结构中：b.双生色双生色团接在主体接在主体结构中：构中：(1)生色团接在主体结构中：生色团接在主体结构中：青风藤碱(3)生色生色团在分子的非主体在分子的非主体结构中构中奎奎诺里西里西啶、吡咯里西、吡咯里西啶苦参碱 氧化苦参碱 IR法在生物碱法在生物碱结构构测定中作用有限。定中作用有限。胺

46、基、胺基、羰基基基基团的的IR图谱和和Bohlmann带吸收峰吸收峰较为常用。常用。二二.IR 法法1.胺基：胺基：伯胺约在伯胺约在35003150 cm1出现两条尖锐谱带，出现两条尖锐谱带，仲胺约在仲胺约在3400 cm1处有一条谱带出现。处有一条谱带出现。例：苯丙胺类、秋水仙碱类、部分吲哚类以及例：苯丙胺类、秋水仙碱类、部分吲哚类以及异喹啉类生物碱。异喹啉类生物碱。C=O 1661-1658cm-1 二二.IR 法法2.C=O：1660-1690普洛托品碱普洛托品碱2.Bohlmann吸收吸收带 喹诺里西里西啶类可可顺式或反式稠和，式或反式稠和，N上的孤上的孤对电子子与与两个两个邻位位C上

47、的上的H成成反式双反式双竖键关系关系时，在，在2800-2700cm-1区域出区域出现两个以上两个以上CH峰。氮孤峰。氮孤电子不参与共子不参与共轭如：如：表表别育亨育亨烷 3-H，20-H伪育亨育亨烷 3-H，20-H别育亨育亨烷 3-H，20-H正育亨正育亨烷3-H，20-H正、正、别育亨育亨烷有有Bohlmann吸收峰吸收峰二二.IR 法法 1H-NMR提供提供、J值、积分分比、裂分比、裂分图形形判断判断H的化学的化学环境、境、个数及空个数及空间位置位置推推测结构的骨架构的骨架类型和立体构型型和立体构型提供提供C的个数，的个数，峰峰值大小大小13C-NMR三三.NMR 法法（1 1）基于生

48、物碱）基于生物碱结结构中构中氮原子的氮原子的电负电负性影响性影响，使，使 碳明碳明显显向低向低场场位移位移。芳氮。芳氮杂环杂环中，氮使中，氮使 碳向低碳向低场场位移最大，位移最大，碳次之，而碳次之，而 碳位移最小；脂氮碳位移最小；脂氮杂杂环环中，氮原子中，氮原子对对 碳影响最大。碳影响最大。（2 2）生物碱的构象和构型不同生物碱的构象和构型不同，其化学位移也是不，其化学位移也是不同的，同的，e e键键甲基使甲基使 、碳去屏蔽碳去屏蔽，因此使，因此使 、碳碳向低向低场场位移，位移，对对 碳影响不大；碳影响不大；a a键键使使 、碳向碳向低低场场位移，而使位移，而使 碳向高碳向高场场位移。位移。（

49、3 3）生物碱）生物碱结结构中存在构中存在氮甲基，氮甲基，由于氮的由于氮的电负电负性使性使甲基碳在甲基碳在较较低低场场出出现现。（4 4）季季铵盐铵盐中氮原子使中氮原子使 碳向更低碳向更低场场位移，位移，氮氧化氮氧化物和季物和季铵铵中的氮也使中的氮也使 碳向低碳向低场场位移。位移。表表别育亨育亨烷 3-H，20-H伪育亨育亨烷 3-H，20-H别育亨育亨烷 3-H，20-H正育亨正育亨烷3-H，20-H13C-NMR数据数据()3C 20C表表别育亨育亨烷54.3 39.9伪育亨育亨烷54.6 34.2别育亨育亨烷60.4 36.7正育亨正育亨烷60.1 41.6 此法在生物碱此法在生物碱结构

50、构测定中多有定中多有应用。用。生物碱生物碱的的质谱裂解方式主要有三种：裂解方式主要有三种：1.以以N原子原子为中心的裂解；中心的裂解；2.RDA裂解，裂解，产生互生互补离子；离子；3.C-C裂解。裂解。一种生物碱的一种生物碱的质谱裂解可能存在一种或二裂解可能存在一种或二种，甚至是同种，甚至是同时存在三种裂解方式。根据主要存在三种裂解方式。根据主要生物碱生物碱结构构类型的型的质谱特征，特征，质谱的一般的一般规律律简单总结归纳。四四.MS 法法 此法在生物碱此法在生物碱结构构测定中多有定中多有应用。用。1.母核母核稳定定或由于或由于取代基或取代基或边链裂解裂解产生特生特征离子。征离子。主体或整体由