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1、序号: 编码: 第十届“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛作品申报书 作品名称: 白毒鹅膏菌漆酶的产酶条件、酶学性质 及用于染料脱色的研究 学校全称: 山东大学威海分校 申报者姓名 (集体名称): 山海联创 类别:自然科学类学术论文哲学社会科学类社会调查报告和学术论文科技发明制作A类科技发明制作B类报送方式:省级报送作品高校直送作品说 明1申报者应在认真阅读此说明各项内容后按要求详细填写。2申报者在填写申报作品情况时只需根据个人项目或集体项目填写A1或A2表,根据作品类别(自然科学类学术论文、哲学社会科学类社会调查报告和学术论文、科技发明制作)分别填写B1、B2或B3表。所有申报者可根据情
2、况填写C表。3表内项目填写时一律用钢笔或打印,字迹要端正、清楚,此申报书可复制。4序号、编码由第十届“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛全国组委会填写。5学术论文、社会调查报告及所附的有关材料必须是中文(若是外文,请附中文本),请以4号楷体打印在A4纸上,附于申报书后,字数在8000字左右(文章版面尺寸14.522cm)。6发起高校的三件直送作品和各省(区、市)通过初评的作品(数量参照“作品数额分配方案”)各一式四份分别按全国组委会规定的时间用特快专递寄至全国竞赛组委会办公室。7作品申报书须按要求由各省或各校竞赛组织协调机构统一寄送。8其他参赛事宜请向本校竞赛组织协调机构咨询。9寄送地址:
3、南开大学团委第十届“挑战杯”全国大学生课外学术科技作品竞赛组委会办公室联 系 人:韩旭联系电话:(022)传 真:(022)邮政编码:A2申报者情况(集体项目)说明:1.必须由申报者本人按要求填写; 2.申报者代表必须是作者中学历最高者,其余作者按学历高低排列; 3.本表中的学籍管理部门签章视为对申报者情况的确认。申报者代表情况姓名于涛性别男出生年月1986.4学校山东大学威海分校系别、专业、年级海洋学院.生物科学.2004级学历本科学制4年入学时间2004.9作品名称白毒鹅膏菌漆酶的产酶条件、酶学性质及用于染料脱色的研究毕业论文题目无通讯地址山东省威海市文化西路180号邮政编码办公电话无常住
4、地通讯地址山东省威海市文化西路180号邮政编码住宅电话其他作者情况姓 名性别年龄学历所在单位董翠玲女21本科山东大学威海分校海洋学院王方忠男21本科山东大学威海分校海洋学院徐国英女22本科山东大学威海分校海洋学院资格认定学校学籍管理部门意见以上作者是否为2007年7月1日前正式注册在校的全日制非成人教育、非在职的高等学校中国籍专科生、本科生、硕士研究生或博士研究生。是否 (部门签章)年 月 日院、系负责人或导师意见本作品是否为课外学术科技或社会实践活动成果。是否负责人签名:年 月 日B1申报作品情况(自然科学类学术论文)说明:1必须由申报者本人填写;2本部分中的科研管理部门签章视为对申报者所填
5、内容的确认;3作品分类请按作品的学术方向或所涉及的主要学科领域填写;4硕士研究生、博士研究生作品不在此列。作品全称白毒鹅膏菌漆酶的产酶条件、酶学性质及用于染料脱色的研究作品分类(D)A机械与控制(包括机械、仪器仪表、自动化控 制、工程、交通、建筑等) B信息技术(包括计算机、电信、通讯、电子等) C数理(包括数学、物理、地球与空间科学等) D生命科学(包括生物、农学、药学、医学、健 康、卫生、食品等) E能源化工(包括能源、材料、石油、化学、化 工、生态、环保等)作品撰写的目的和基本思路据最新资料统计,我国每年印染废水排放量,占工业废水排放总量的35%,己成为危害最大的难以治理的重要污染源。许
6、多染料在厌氧的环境下会转化为有毒物质或致癌物质,危害人类健康。由于染料自身特殊的化学结构,往往不能有效地被凝结、臭氧、活性炭等单一技术处理。生物处理法由于绿色环保、运行成本低,且可获得较高的脱色率,成为当前印染废水脱色研究的热点。漆酶又称酚酶,是一类可降解木质素的含铜多酚氧化酶。漆酶可以催化空气中的氧气直接氧化分解各种酚类染料、取代酚、氯酚、硫酚、双酚A、芳香胺等,由于它具有相当广泛的底物专一性和较好的稳定性,因此漆酶在治理含酚染料废水等方面有着巨大的应用前景。漆酶最早是从漆树的分泌物中发现的,随后人们发现一些高等真菌也能分泌这种酶。最近,Givaudan等还从稻根分离出产生漆酶的细菌生脂固氮
7、螺菌,但目前最主要的生产菌仍是一些大型真菌。本小组从资源调查入手,2006年暑假期间对威海玛珈山大型真菌进行了广泛采集和分离培养,又从所获得菌株中,进行漆酶高产菌株的筛选,获得高产菌株白毒鹅膏菌,并对其最适产酶条件进行了探讨,对白毒鹅膏菌所产漆酶进行了纯化和酶学性质研究,深入开展其在工业染料脱色降解方面的应用研究,发掘其在环境保护方面的巨大潜力,使之更好地造福社会。作品的科学性、先进性及独特之处本项目从资源调查入手,兼跨理论研究与应用研究三大领域;实验设计具有整体性,对漆酶研究具有系统性,研究内容紧扣学术热点。 关于白毒鹅膏菌漆酶研究在国内属首例报道;现已在国内核心期刊上发表多篇文章,实验成果
8、得到认可;本作品就是在这几篇文章的基础上综合而来。作品的实际应用价值和现实意义1. 发现了非白腐真菌的漆酶高产菌株-白毒鹅膏菌,丰富了漆酶来源。2.诱导驯化了白毒鹅膏菌分泌漆酶的能力,提高了漆酶产量,以满足应用领域对漆酶的需求。2. 探讨了该种漆酶用于染料脱色方面的研究,为解决当前环境污染问题提供理论支撑。学术论文文摘从威海玛珈山上采集的9株夏季常见大型真菌中筛选出分泌漆酶能力最强的菌株白毒鹅膏菌。对其产漆酶最适培养条件、漆酶的分离纯化、动力学性质、对染料的脱色等方面进行了研究。培养与产酶条件的单因素和正交试验分析表明:麸皮20g/L,酵母膏5g/L,装液量1/5,温度25,培养8d时产酶活达
9、到最高,为365umL。经盐析、透析、纤维素离子交换和凝胶过滤四步纯化,粗酶液被纯化了22.03倍,比活率达230.59u/mg,酶活回收率达22.02%。测定了该酶的基本酶学性质,最适pH和最适反应温度分别为4.6和20,在pH5.0-5.4和低于60时有较好的稳定性,以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为66.7mol/L;Ba2+、Cu2+、SO42-离子对漆酶有激活作用,而Ag2+、Cl、Fe3+离子则有抑制作用。研究表明白毒鹅膏菌漆酶能使7种工业染料脱色,其中直接黑G和中性黄GL在pH值为5、温度30条件下,5U/mL的漆酶与直接黑G和中性黄GL反应的Km值分别为3.2mg/L和25.1m
10、g/L,Vmax值分别为2.70mg/L*min 和3.25mg/L*min。作品在何时、何地、何种机构举行的会议上或报刊上发表及所获奖励文章白毒鹅膏菌漆酶动力学性质研究被吉林农业大学学报(全国中文核心期刊)录用;漆酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究被河南工业大学学报(全国中文核心期刊)录用;白毒鹅膏菌漆酶部分酶学性质研究被石河子大学学报(省级重点期刊)录用。染料的白毒鹅膏菌漆酶脱色研究正在被沈阳理工大学学报(全国中文核心期刊)专家组复审;Purification and characterization of laccase from the Amanita verna and decolor
11、ization of synthetic dyes by the enzyme已投稿。鉴定结果属实请提供对于理解、审查、评价所申报作品具有参考价值的现有技术及技术文献的检索目录1 E.I.SoLomon, U.M.Sundaram, T.E.Machonkin, Chem.Rev. 1996, 96: 2563-2605.2 J.M.Bollag, A.Leonowicz, Appl. Environ.Microbiol. 1984, 48:849- 854.3 S.C.Barton,H.-H.Kim,G.Binyamin,Y.Zhang,A.HeLLer,J.Am.Chem. Soc.200
12、1, 123: 5802-5803.4 R.S.Freire, N.Duran, L.T.Kubota, TaLanta. 2001,54: 681-686.5 H.P.CaLL, I.Mucke,J. BiotechnoL. 1997, 53: 163-202.6 B.A.Kuznetsov,G.P.Shumakovich,O.V.KoroLeva,A.I.YaropoLov, Biosens.BioeLectron. 2001, 16: 73-84.7 A.M.Mayer, R.C.StapLes, Phytochemistry. 2002, 60: 551-565.8 A.V.Karam
13、yshev, S.V.ShLeev, O.V.KoroLeva, A.I.YaropoLov, I.Y. Sakharov, Enzyme Microb. TechnoL. 2003, 33: 556-564.9 朱启忠,赵宏,韩晓弟等.彩绒革盖菌CV一8胞外漆酶的诱导纯化及部分性质研究.生物技术.2005,15(l):13-15.10 王宜磊.高酶活菌株的筛选及漆酶特性.微生物学杂志.2004,24(l):11-13.申报材料清单(申报论文一篇,相关资料名称及数量)申报论文一篇科研管理部门签章 年 月 日C.当前国内外同类课题研究水平概述说明:1.申报者可根据作品类别和情况填写; 2.填写此
14、栏有助于评审。近年来研究表明,漆酶具有广泛的作用底物和较好的稳定性;由于它能降解木质素,可与有毒的酚类物质作用,使苯氧基类除草剂、石油工业废水去除毒性,还可以氧化降解一些有机磷毒物,以及在微生物菌体形态形成和植物病原等方面的功能,使之在食品工业、环境保护、造纸工业及其它领域具有很大的研究价值和应用潜力。目前,漆酶的理论与应用研究已在生物、化学、物理、医学等多领域,分子、细胞、生物组织等多水平展开。1883年Yoshida最先从漆树叶中发现了漆酶(Yoshida H,1883),1894年Bertrand确定了它是一种包含金属的氧化酶(Bertrand GCR,1894)。目前,在国外研究中许多
15、漆酶已被纯化,并进行了大量的酶学研究(CLAUDIA E,1996),编码漆酶的一些基因也已被克隆和表达(SMTTH N,1998)。我国最早研究漆酶的是刘国智、黄葆同等(刘国智,1958;黄葆同,1960),它们于20世纪50年代末利用漆酶在催化反应中需要消耗氧气的特性,设计了漆酶的酶活测定方法。随后,直到20世纪80年代末,国内对于漆酶的研究一直停留在漆酶酶活的测定、漆酶表现特性的描述性研究上;与此同时,漆酶的分离纯化动力学特性和固定化的研究也开始起步。虽然真菌漆酶的研究与生产越来越受到人们的关注,但长期以来,国内的研究工作主要围绕如何提高白腐真菌漆酶的产量而展开, 尤其针对彩绒革盖菌和毛
16、栓菌漆酶的研究;而对其他非白腐真菌漆酶的研究,报道较少。这在一定程度上,大大缩小了开发利用漆酶的原料来源,限制了对该酶的开发利用。因此,有必要对其他非白腐真菌漆酶进行研究。经过筛选,我们发现了具有较高的分泌漆酶能力的非白腐真菌白毒鹅膏菌。在处理造纸废水方面,漆酶及能产生漆酶的真菌已显示出它特有的作用。氯化木素及其氧化产物是漂白废水颜色和毒性的主要来源(林鹿,陈嘉翔等,1997)。据J.Dec和J.M.Bollay研究发现(Dec J,Bollag J M,1990),漆酶的去毒作用是通过酚的聚合反应实现的,漆酶可催化氯酚生成低聚物,聚合产生的不溶性沉淀可以通过沉降、过滤去除,这样可以去除浓度高
17、达1600 mg/ L 的取代酚。另外,研究表明(RoyArcand L , Archibald F S,1991),各种真菌系统中的漆酶都能迅速地将许多有毒的多氯酚和愈创木酚部分脱氯,但22氯酚和42氯酚除外。与一般方法相比,采用漆酶处理造纸废液中有机氯化物,具有催化效能高,反应条件温和,对反应条件、反应设备的要求不苛刻等优点。D.推荐者情况及对作品的说明说明:1由推荐者本人填写; 2推荐者必须具有高级专业技术职称,并是与申报作品 相同或相关领域的专家学者或专业技术人员(教研组 集体推荐亦可); 3推荐者填写此部分,即视为同意推荐; 4推荐者所在单位签章仅被视为对推荐者身份的确认。推荐者情况
18、姓 名张小葵性别女年龄46职称副教授工作单位山东大学威海分校海洋学院通讯地址山东省威海市文化西路180号邮政编码单位电话住宅电话推荐者所在单位签章 (签章) 年 月 日请对申报者申报情况的真实性作出阐述 所呈交的“挑战杯”参赛作品,是该团队在指导老师的认真指导下,独立进行研究所取得的成果。请对作品的意义、技术水平、适用范围及推广前景作出您的评价 该作品具有源头创新性,发现新型漆酶高产菌株,实验技术水平高;所研究漆酶应用范围广,具有较大的开发潜力,推广前景广阔。其它说明 推荐者情况姓 名吉爱国性别男年龄50职称教授.博士生导师工作单位山东大学威海国际生物技术研发中心通讯地址山东省威海市文化西路1
19、80号邮编单位电话住宅电话推荐者所在单位签章 签章日期 年 月 日请对申报者申报情况的真实性作出阐述 该参赛作品,是在指导老师的认真指导下,该团队独立进行研究所取得的成果,真实可靠。请对作品的意义、技术水平、适用范围及推广前景作出您的评价 该作品系统性强,研究紧扣学术热点,整体创新性好;以解决水污染问题为基本出发点,具有较大的实际应用价值和较好的推广前景。其它说明学校组织协调机构确认并盖章 (团委代章) 年 月 日 校主管领导或校主管部门确认盖章 年 月 日 各省(区、市)评审委员会初评意见 评委签名: 年 月 日 各省(区、市)组织协调委员会审定意见 团 委 科 协 教 育 厅 学 联(签章) (签章) (签章) (签章) 年 月 日E全国组织委员会秘书处资格和形式审查意见组委会秘书处资格审查意见 审查人(签名) 年 月 日组委会秘书处形式审查意见 审查人(签名) 年 月 日组委会秘书处审查结果合格 不合格 负责人(签名) 年 月 日F参赛作品打印处G1全国评审委员会预审意见粘贴处G2全国评审委员会终审意见粘贴处
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