阿司匹林中乙酰水杨酸含量的测定(共4页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量一、 实验目的1.掌握用荧光法测定药物中的乙酰水杨酸含量的方法。2.掌握970CRT型荧光分光光度计的操作方法。3.加深对荧光光度法原理的理解。二、实验原理1.荧光光度法原理(1)常温下,处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子,激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级,再以辐射跃迁的形式回到基态,发出比吸收光波长长的光而产生荧光。在稀溶液中,当实验条件一定时,荧光强度IF与物质的浓度c成线性关系:即(这是荧光光谱法定量分析的理论依据)。(2)荧光光谱荧光强度波长激发光谱:固定测量波长(选最大发射波长)
2、,化合物发射的荧光强度与照射光波长的关系曲线。激发光谱曲线的最高处,处于激发态的分子最多,荧光强度最大。发射光谱:固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。固定发射光波长进行激发光波长扫描,找出最大激发光波长,然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描,找出最大荧光发射波长。激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。2. 荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量通常称为ASA的乙酰水杨酸(阿司匹林)水解即生成水杨酸(SA)(如下式)。而在阿司匹林中或多或少存在一些水杨酸,用醋酸氯仿作为溶剂,然后用荧光法可以分别测定其含量,少许醋酸还可以增加二者的荧光强度(本
3、次实验只测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量)。在1%的乙酸氯仿中乙酰水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图所示:(为了消除药片之间的差异,可以取几片一起研磨,然后取部分由代表性的样品进行分析)(CH3CO)2OH2O(ASA)(SA)三、仪器与试剂:仪器:970CRT型荧光分光光度计及附件;容量瓶:1000mL 2只,100 mL 2只,50mL 8只;l0mL吸管2支;铁架台;研钵;称量瓶;玻璃棒;烧杯;定量滤纸;电子天平。试剂:冰醋酸;氯仿;乙酰水杨酸;阿司匹林;丙酮。四、实验步骤:1. 接通电源,打开氙灯,再打开主机,然后打开计算机启动工作站并初始化仪器,预热30min左右。2. 仪器初始化完毕后,
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