最新实验1 谷胱甘肽PPT课件.ppt

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1、实验实验1 谷胱甘肽谷胱甘肽实验目的实验目的n掌握从干酵母中粗提谷胱甘肽的各种方法；n掌握还原型谷胱甘肽定量的方法。实验步骤实验步骤1.热水提取法热水提取法：1g 干酵母，加15mL 水，95度水浴10min，立即冷却，取8mL离心（5000rpm，10min），取5mL上清液滴定，记录滴定体积。2.冷冻研磨处理后有机酸搅拌提取冷冻研磨处理后有机酸搅拌提取：1g 干酵母，先在研钵中研细，加入10mL蒸馏水混匀，20度冷冻呈半固体状，研磨5min，加入5mL36乙酸，室温下搅拌15min，取8mL离心（5000rpm，10min），取5mL上清液滴定，记录滴定体积。3.酸热处理酸水搅拌提取酸热处

2、理酸水搅拌提取：1g 干酵母，加入15mL 2 H2SO4，60度水浴下搅拌15min，立即冷却，取8mL离心（5000rpm，10min），取5mL上清液滴定，记录滴定体积。4.有机酸稀醇搅拌提取有机酸稀醇搅拌提取：1g 干酵母，加入15mL 乙酸乙醇混合液（v:v=2:1），室温下搅拌15min，取8mL离心（5000rpm，10min），取5mL上清液滴定，记录滴定体积。注：注：待滴定的谷胱甘肽提取液置待滴定的谷胱甘肽提取液置4度冰箱保存，防止其被氧化。度冰箱保存，防止其被氧化。n氧化还原滴定法确定谷胱甘肽的含量氧化还原滴定法确定谷胱甘肽的含量 KIO35KI6HPO3 3I26KPO33H2O 碘酸根离子在酸性条件下具有氧化性碘酸根离子在酸性条件下具有氧化性，能与还原态的谷胱甘肽（GSH）反应，当GSH全部反应完时，碘酸根离子将碘化钾氧化为碘，碘使淀粉指示剂变蓝色，即为滴定终点。注意事项：注意事项：1.在酸性溶液中，淀粉会缓慢水解，使滴定终点的颜色发生变化，故滴定操作要快速完成。实验结果实验结果处理方法沸水提取 冷冻研磨处理后有机酸搅拌提取酸热处理酸水搅拌提取有机酸稀醇搅拌提取滴定体积（mL）结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！12