最新微生物农药第二节PPT课件.ppt

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1、微生物农药第二节杀虫微生物的类群杀虫微生物的类群昆虫病原真菌类昆虫病原真菌类1昆虫病原细菌类昆虫病原细菌类2昆虫病原病毒类昆虫病原病毒类3目前用于杀虫的白僵菌目前用于杀虫的白僵菌卵孢白僵菌卵孢白僵菌球孢白僵菌球孢白僵菌 球孢白僵菌能侵染鞘翅目、球孢白僵菌能侵染鞘翅目、鳞翅目、同翅目和直翅目以鳞翅目、同翅目和直翅目以及螨类；及螨类；卵孢白僵菌主要侵染地下害卵孢白僵菌主要侵染地下害虫的幼虫，如金龟子幼虫。虫的幼虫，如金龟子幼虫。被白僵菌感染的家蚕被白僵菌感染的家蚕被被白白僵僵菌菌寄寄生生僵僵死死的的剌剌蛾蛾幼幼虫虫感染虫体的病理过程感染虫体的病理过程穿透寄主体壁进入血腔大量繁殖穿透寄主体壁进入血腔

2、大量繁殖孢子萌出芽管分泌酶孢子萌出芽管分泌酶孢子侵入虫体孢子侵入虫体 昆虫死亡昆虫死亡 寄主细胞被破坏寄主细胞被破坏白僵菌制剂的生产白僵菌制剂的生产液态液态发酵发酵液固液固双相双相发酵发酵固态固态发酵发酵液相发酵液相发酵白僵菌制剂的液体发酵生产是从白僵菌制剂的液体发酵生产是从原始菌种开始，经逐级扩大培养，原始菌种开始，经逐级扩大培养，最终进行液体深层发酵，含孢量最终进行液体深层发酵，含孢量及其他指标达到一定要求进行干及其他指标达到一定要求进行干燥及其他处理后，在包装或制成燥及其他处理后，在包装或制成各种制剂。各种制剂。液体发酵的产物是芽生孢子，芽液体发酵的产物是芽生孢子，芽生孢子生活力低下，不

3、耐贮藏，生孢子生活力低下，不耐贮藏，难以应用于实际。通过改变培养难以应用于实际。通过改变培养基的配方，添加微量元素，选育基的配方，添加微量元素，选育合适菌株等手段进行深层发酵生合适菌株等手段进行深层发酵生产分生孢子。产分生孢子。美国美国Mechales1984年年Goettel20世纪世纪80年代年代20世纪世纪70年代年代固体发酵固体发酵调控温湿度发酵法调控温湿度发酵法尼龙高压灭菌袋培养尼龙高压灭菌袋培养窗纱式营养膜机械化生产窗纱式营养膜机械化生产浅盘塑料袋浅盘塑料袋0 0液固双相发酵液固双相发酵即首先经几级液态发酵制得大量白即首先经几级液态发酵制得大量白僵菌芽生孢子或菌丝体，再接种于僵菌芽

4、生孢子或菌丝体，再接种于固态料上进行固态发酵，以获得分固态料上进行固态发酵，以获得分生孢子。然后经旋风分离收集纯孢生孢子。然后经旋风分离收集纯孢粉，含孢量可达粉，含孢量可达110111.2 1011个个g该工艺生产周期短，培养后期的杂该工艺生产周期短，培养后期的杂菌污染小，并降低了生产成本，但菌污染小，并降低了生产成本，但发酵后期仍为半敞开式培养。发酵后期仍为半敞开式培养。液固双相发酵的工艺流程液固双相发酵的工艺流程1.原始菌种。原始菌种。2.斜面斜面3.液体菌体液体菌体4.种子罐种子种子罐种子5.发酵发酵6.干燥及包装干燥及包装7仓储和运输仓储和运输二、杀虫细菌二、杀虫细菌芽孢杆菌属芽孢杆菌

5、属肠杆菌属肠杆菌属假单孢杆菌属假单孢杆菌属(一一)芽孢杆菌类群芽孢杆菌类群金龟子芽孢杆菌金龟子芽孢杆菌缓死芽孢杆菌缓死芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌球形芽孢杆菌球形芽孢杆菌专性寄生专性寄生兼性寄生兼性寄生(二二)代表性杀虫细菌代表性杀虫细菌苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌特点苏云金芽孢杆菌特点:G G+短杆状短杆状周生鞭毛周生鞭毛芽孢和伴胞晶体芽孢和伴胞晶体 按杀虫范围分为以下几种致病型：按杀虫范围分为以下几种致病型：专一鳞翅目专一鳞翅目 如：柏林纳亚种如：柏林纳亚种专一双翅目专一双翅目 如：以色列亚种如：以色列亚种 专一鞘翅目专一鞘翅目 如如:拟步行甲亚种拟步行甲亚种 对鳞

6、翅目和双翅目对鳞翅目和双翅目 在昆虫中尚无毒性在昆虫中尚无毒性(1)(1)内毒素内毒素苏云金芽孢杆菌的杀虫机理苏云金芽孢杆菌的杀虫机理内毒素是所有苏云金芽孢杆内毒素是所有苏云金芽孢杆菌品系所共有的毒素，是由伴菌品系所共有的毒素，是由伴孢晶体产生原毒素分子。孢晶体产生原毒素分子。最终导致昆虫停止进食而死亡。最终导致昆虫停止进食而死亡。昆虫摄入苏云金芽孢杆菌昆虫摄入苏云金芽孢杆菌伴孢晶体在昆虫的碱性肠液中溶解伴孢晶体在昆虫的碱性肠液中溶解原毒素被肠道蛋白酶降解、激活原毒素被肠道蛋白酶降解、激活成熟的毒素结合到肠道上皮细胞质膜的特殊受体上成熟的毒素结合到肠道上皮细胞质膜的特殊受体上插入膜中形成小孔插

7、入膜中形成小孔细胞膜透性增大，导致肠道细胞肿大，裂解细胞膜透性增大，导致肠道细胞肿大，裂解外毒素的毒效只发生在幼虫蜕皮或变态外毒素的毒效只发生在幼虫蜕皮或变态时期，造成幼虫畸形或不能正常蛹化。时期，造成幼虫畸形或不能正常蛹化。其作用机制不明确，可能是干扰了同发育其作用机制不明确，可能是干扰了同发育有关的某些激素的合成。有关的某些激素的合成。（2 2）外毒素外毒素外毒素是苏云金芽孢杆菌中的几个变外毒素是苏云金芽孢杆菌中的几个变种在营养体生长的旺盛期产生的一种低种在营养体生长的旺盛期产生的一种低分子量，高热稳定性的胞外毒素。分子量，高热稳定性的胞外毒素。苏云金芽孢杆菌菌剂的生产苏云金芽孢杆菌菌剂的

8、生产液剂液剂粉剂粉剂可湿性粉剂可湿性粉剂使用方法使用方法喷雾喷雾喷粉喷粉剂型剂型生产工艺流程生产工艺流程菌种菌种 茄形瓶活化茄形瓶活化 种子罐培养种子罐培养 发酵罐培养发酵罐培养 浓缩浓缩 干燥干燥 质检质检3030培养培养72h72h接种量接种量1 菌种菌种 选育毒力高发酵性能好的优良菌种，冷选育毒力高发酵性能好的优良菌种，冷冻干燥或沙土管保存，使用前将保存的菌冻干燥或沙土管保存，使用前将保存的菌种接种到茄形瓶，种接种到茄形瓶，3030，培养，培养72h72h。经检验无杂菌、菌苔丰满、表面灰白经检验无杂菌、菌苔丰满、表面灰白色、无噬菌斑、色、无噬菌斑、90%90%以上芽孢囊破碎，放入以上芽孢

9、囊破碎，放入冰箱保存一周后即可使用。加无菌水制成冰箱保存一周后即可使用。加无菌水制成菌悬液，水浴菌悬液，水浴7575处理处理15min,15min,即可接种。即可接种。营养物质的选择营养物质的选择 能被菌体很好的利用能被菌体很好的利用 价格便宜价格便宜来源广泛来源广泛营养物质：黄豆饼粉、棉籽饼粉和玉米浆营养物质：黄豆饼粉、棉籽饼粉和玉米浆 将配置好的培养基进行灭菌，灭菌前注意将配置好的培养基进行灭菌，灭菌前注意将将pHpH值调至值调至7.48.0 ，灭菌后达到，灭菌后达到7.0。培养条件培养条件 温度温度 苏云金芽孢杆菌的培养温度为苏云金芽孢杆菌的培养温度为3030，在不同温度下培养所得的产物

10、的毒性有，在不同温度下培养所得的产物的毒性有很大差异，因此温度应严格控制。很大差异，因此温度应严格控制。通气量通气量 在菌体指数生长期和芽孢生成在菌体指数生长期和芽孢生成期要保持足够的通气量，通气量不宜过大，否期要保持足够的通气量，通气量不宜过大，否则芽孢生成数反而降低。则芽孢生成数反而降低。另外，在发酵前期加大通气量效果比后期另外，在发酵前期加大通气量效果比后期加大通气量更好。加大通气量更好。pH pH 一般情况下，一般情况下，pH 7.0pH 7.0时有利于苏云时有利于苏云金芽孢杆菌的生长，但发酵过程中，乙酸会导金芽孢杆菌的生长，但发酵过程中，乙酸会导致致pHpH的下降，应引起注意。的下降

11、，应引起注意。浓缩和干燥浓缩和干燥发酵液离心后的糊状物质调整发酵液离心后的糊状物质调整pHpH到到 3.53.54.54.5，加入金属盐和含油物以，加入金属盐和含油物以形成稳定的苏云金芽孢杆菌制剂，经形成稳定的苏云金芽孢杆菌制剂，经喷雾干燥制备粉剂。喷雾干燥制备粉剂。发酵发酵 在种子罐和发酵罐发酵过程中，根在种子罐和发酵罐发酵过程中，根据罐的体积来确定投料量和接种量。温据罐的体积来确定投料量和接种量。温度、罐压、通气量、搅拌速率、培养时度、罐压、通气量、搅拌速率、培养时间等都要由反复的试验来确定。间等都要由反复的试验来确定。菌种自身因素菌种自身因素 苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌的不同亚种，甚至

12、同一亚种不同菌株的不同亚种，甚至同一亚种不同菌株对害虫的毒性存在很大差异。对害虫的毒性存在很大差异。剂型剂型 不同的苏云金芽孢杆菌不同的苏云金芽孢杆菌制剂的剂型对不同种类的害虫的毒效制剂的剂型对不同种类的害虫的毒效也存在很大差异。也存在很大差异。影响苏云金芽孢杆菌致病力的因素影响苏云金芽孢杆菌致病力的因素 目标昆虫的特性目标昆虫的特性 不同昆虫不同昆虫和同一昆虫的不同虫期，甚至同种昆和同一昆虫的不同虫期，甚至同种昆虫的不同种群对苏云金芽孢杆菌制剂虫的不同种群对苏云金芽孢杆菌制剂的敏感性也不同。的敏感性也不同。环境因素环境因素 日光直射、温度、日光直射、温度、湿度和降水等都对苏云金芽孢杆菌的湿度

13、和降水等都对苏云金芽孢杆菌的致病力产生影响。（致病力产生影响。（p66p66）19601960年，在美国注册为商品，应用于年，在美国注册为商品，应用于食物和饲料作物。食物和饲料作物。19821982年，日本试用，后被广泛应用。年，日本试用，后被广泛应用。我国于我国于19531953年就已开始应用苏云金芽年就已开始应用苏云金芽孢杆菌防治松毛虫并取得良好效果。孢杆菌防治松毛虫并取得良好效果。苏云金芽孢杆菌的应用苏云金芽孢杆菌的应用应用实例应用实例 湖南省用苏云金芽孢杆菌防治森林害虫湖南省用苏云金芽孢杆菌防治森林害虫 贵州省用经稀释的菌粉防治害虫贵州省用经稀释的菌粉防治害虫 黑龙江省防治杨树天蛾和黄刺蛾黑龙江省防治杨树天蛾和黄刺蛾结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！41