最新微量分光光度计PPT课件.ppt
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1、微量分光光度计微量分光光度计使用NanoDrop 2000/2000c分光光度计可以方便的使用微量样品进行紫外可见分光检测。NanoDrop 2000可以应用于如下检测:12345678910111.核酸的浓度和质量2.筛选有效的荧光标记杂交探针3.功能同普通的紫外-可见分光光度计4.检测细胞悬液的光散射5.蛋白定量6.蛋白定量(主要检测还有还原剂或去污剂的总蛋白含量)7.检测非纯蛋白的浓度8.蛋白的浓度和荧光染料的浓度9.蛋白A280检测10.编辑新程序11.蛋白定量(区别于5,测试浓度较低)例:核酸Sample ID-输出样品名称Type-DNA-50做dsDNA检测,RNA-40做RNA
2、检测,ssDNA-33做单链DNAConc-结果结果A260显示10mm光程下的260nm处的吸光值A280显示10mm光程下的280nm处的吸光值。260/280260nm和280nm处的吸光值的比值(DNA1.8RNA2.0)核酸浓度检测1 在主菜单中选择核酸模式,如果显示波长校准窗口,放 下基座臂点击OK。2 选择检测的样品类型,默认的设定为DNA-50。3 选择浓度单位,默认的为ng/ul。4 默认的校准波长为340nm,重新选择一个校准波长或者 去选择Baseline来不选择校准波长。5 选择Add to Report自动把检测结果添加到当前报告中 去,默认设置是把每个样品都添加到报
3、告中。要把样 品数据保存到工作薄中,在检测前必须选上Add to report。6选择Overlay spectra可以在同一时间显示多个光谱。7使用合适的液体建立空白对照,空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。注意:1.每次检测的样品都必须是新加的。2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座,这样仪器就可以进行下一个样品检测了。Oligo Calc 用来计算特定核酸序列的分子量,消光系数,浓度因子要使用Oligo Calc:1.使用如下方法来输入一个碱基序列:使用碱基序列显示框下的按键。键盘(仅仅能使用A,C,G,T,和U来输入碱基)复制和粘贴一个序列到显示框(仅仅能使用A,C,G,T,和U来输入碱基)清除碱基序列框中的序列,点击序列框右侧的Clear键,单个可以手动来删除。2.选择磷酸化程度,可以选择:DNA单磷酸化,RNA单磷酸化和三磷酸化。3.如果需要可以选择双链,互补的双链序列能够包括在计算中。4.在下拉框中,选择检测的核酸类型,默认的为DNA。5.如果要添加序列选择Modification并输入相关的分子量。thanks
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