最新微生物学生态PPT课件.ppt
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1、微生物学生态微生物学生态生态学生态学 是一门研究生物系统与其环境条件间相互作用是一门研究生物系统与其环境条件间相互作用规律性的科学。规律性的科学。微生物生态学微生物生态学 就是研究微生物群体与其周围的生物和就是研究微生物群体与其周围的生物和非生物环境条件相互作用关系的科学。非生物环境条件相互作用关系的科学。微生物分布微生物分布 开发菌种资源开发菌种资源微生物与其他生物的关系微生物与其他生物的关系制药、农药制药、农药、肥料、肥料微生物之间的关系微生物之间的关系混菌发酵、污水处理混菌发酵、污水处理微生物在自然界物质循环中的作用微生物在自然界物质循环中的作用揭开地球环揭开地球环境境变迁、生物进化之谜
2、。同时有助于探矿、冶金、环保变迁、生物进化之谜。同时有助于探矿、冶金、环保等等 微生物的数量也与土层的深度有关,一般土壤表层微生物最多,随着土层的加深,微生物的数量逐步减少。水体中含有机物、无机物、水体中含有机物、无机物、O2、毒物以及光照、毒物以及光照、pH、温度、水压、流速、渗透压和生物群体等的明显、温度、水压、流速、渗透压和生物群体等的明显差别,在自然界的江、河、湖、海等各种淡水与咸水差别,在自然界的江、河、湖、海等各种淡水与咸水水域中都生存着相应的微生物水域中都生存着相应的微生物.(二)水体中的微生物(二)水体中的微生物1不同水体中的微生物种类不同水体中的微生物种类(1)淡水型水体的微
3、生物淡水型水体的微生物江、河、湖和水库等,根据其中有机物含量的多少及江、河、湖和水库等,根据其中有机物含量的多少及其与微生物的关系还可分为两类。其与微生物的关系还可分为两类。1)清水型水生微生物)清水型水生微生物 在洁净的湖泊和水库蓄水中,因有机物含量低,在洁净的湖泊和水库蓄水中,因有机物含量低,故微生物数量很少(故微生物数量很少(10103ml),可认为是水体环可认为是水体环境中境中“土生土长土生土长”的土居微生物或土著种的土居微生物或土著种.典型的清水型微生物以典型的清水型微生物以化能自养微生物和光能自化能自养微生物和光能自养微生物养微生物为主,如硫细菌、铁细菌和衣细菌等,以及为主,如硫细
4、菌、铁细菌和衣细菌等,以及含有光合色素的蓝细菌、绿硫细菌和紫细菌等。含有光合色素的蓝细菌、绿硫细菌和紫细菌等。2)腐败型水生微生物)腐败型水生微生物 流经城市的河水、港口附近的海水、滞留的池水以流经城市的河水、港口附近的海水、滞留的池水以及下水道的沟水中,富营养化的湖水,由于流入了大及下水道的沟水中,富营养化的湖水,由于流入了大量的人畜排泄物、生活污物和工业废水等,因此有机量的人畜排泄物、生活污物和工业废水等,因此有机物的含量大增,同时也夹入了大量外来的腐生细菌物的含量大增,同时也夹入了大量外来的腐生细菌.腐败型水生微生物尤其是细菌和原生动物大量繁腐败型水生微生物尤其是细菌和原生动物大量繁殖,
5、每毫升污水的微生物含量达到殖,每毫升污水的微生物含量达到107108个。其中个。其中主要为主要为各种肠道杆菌、芽孢杆菌、弧菌和螺菌各种肠道杆菌、芽孢杆菌、弧菌和螺菌等。这等。这些微生物在污水环境中大量繁殖,逐渐把水中的有机些微生物在污水环境中大量繁殖,逐渐把水中的有机物分解成简单的无机物污水也就逐步净化变清。物分解成简单的无机物污水也就逐步净化变清。包括:包括:好氧菌对有机物的分解作用好氧菌对有机物的分解作用,原生动物对细菌等的吞原生动物对细菌等的吞噬作用,噬菌体对宿主的裂解作用,藻类对无机元素噬作用,噬菌体对宿主的裂解作用,藻类对无机元素的吸收利用,以及浮游动物和一系列后生动物通过食的吸收利
6、用,以及浮游动物和一系列后生动物通过食物链对有机体的摄取和浓缩作用等物链对有机体的摄取和浓缩作用等。水体的自净作用水体的自净作用流水不腐流水不腐在自然水体尤其是快速流动的水体中,存在着对有机在自然水体尤其是快速流动的水体中,存在着对有机或无机污染物的或无机污染物的自净作用自净作用。其原因是多方面的,虽有。其原因是多方面的,虽有物理性的稀释、沉降、吸附等作用和化学性的氧化作物理性的稀释、沉降、吸附等作用和化学性的氧化作用,但更重要的却是用,但更重要的却是各种生物学和生物化学各种生物学和生物化学作用。作用。(三)水体自净及污染水体的微生物生态(三)水体自净及污染水体的微生物生态特特 征征多污带多污
7、带-中污带中污带-中污带中污带寡污带寡污带水色暗灰色,很浑浊灰色,较浑浊浑浊浑浊度低BOD高减少,有悬浮物减少,悬浮物少极少,悬浮极少溶解氧含量极低(或无)少升高恢复正常气体H2S、CO2和CH4NH3、H2S氨及H2S减少H2S消失细菌数量107-8/ml106/ml104/ml极少微生物种类特点(兼)厌气性硫酸还原菌产甲烷菌藻类及原生动物出现藻类大量繁殖纤毛虫活跃鱼腥藻、硅藻、黄藻、钟虫、变形虫动物类型寡毛类(颤蚯蚓)颤蚯蚓,增多轮虫、浮游甲壳动物轮虫、浮游甲壳动物增多显花植物无无出现增多鱼类无无无有底泥大量的有机质部分无机化大量无机化1)海水的含盐量)海水的含盐量3%左右,能在其中生活的
8、微生物为左右,能在其中生活的微生物为嗜盐菌。嗜盐菌。v真正的海洋细菌在缺少氯化钠的情况下是不能生长真正的海洋细菌在缺少氯化钠的情况下是不能生长的,为:一些藻类以及细菌中的芽孢杆菌属、假单的,为:一些藻类以及细菌中的芽孢杆菌属、假单孢菌属、弧菌属及一些发光细菌等。孢菌属、弧菌属及一些发光细菌等。2)除了在热带海水表面外,在其它海水中发现的细菌)除了在热带海水表面外,在其它海水中发现的细菌多为嗜冷菌。多为嗜冷菌。3)在深海或超深海由于黑暗、寒冷和超高压只有少数)在深海或超深海由于黑暗、寒冷和超高压只有少数耐压菌才可生长,少数微生物甚至可在耐压菌才可生长,少数微生物甚至可在600个大气个大气压下生长
9、。如水活微球菌和浮游植物弧菌等。压下生长。如水活微球菌和浮游植物弧菌等。(2)海水型水体微生物海水型水体微生物(三)(三)空气中的微生物空气中的微生物1、无原生的微生物区系无原生的微生物区系空气中不含微生物生长繁殖所必须的营养物、充足空气中不含微生物生长繁殖所必须的营养物、充足的水分和其他条件,且日光中的的水分和其他条件,且日光中的UV还具强烈的杀菌作还具强烈的杀菌作用,因而不宜于微生物的生存。用,因而不宜于微生物的生存。2、来源、来源土壤、水体及人类的生产、生活活动。土壤、水体及人类的生产、生活活动。3、种类、种类主要为真菌和细菌,一般与其所在环境的微生物种主要为真菌和细菌,一般与其所在环境
10、的微生物种类有关。类有关。4、数量、数量取决于尘埃数量。取决于尘埃数量。测定空气中微生物的数目可用培养皿沉降法或液测定空气中微生物的数目可用培养皿沉降法或液体阻留法等方法进行体阻留法等方法进行.凡须进行空气消毒的场所,例如医院的手术室、病凡须进行空气消毒的场所,例如医院的手术室、病房、微生物接种室或培养室等处可以用房、微生物接种室或培养室等处可以用紫外线消毒、福紫外线消毒、福尔马林尔马林等药物的熏蒸或喷雾消毒等方法进行。等药物的熏蒸或喷雾消毒等方法进行。为防止空气中的杂菌对微生物培养物或发酵罐内为防止空气中的杂菌对微生物培养物或发酵罐内的纯种培养物的污染,可用棉花、纱布(的纯种培养物的污染,可
11、用棉花、纱布(8层以上)、层以上)、石棉滤板、活性炭或超细玻璃纤维过滤纸进行空气过石棉滤板、活性炭或超细玻璃纤维过滤纸进行空气过滤滤.极端环境:极端环境:高温、低温、高酸、高碱、高盐、高温、低温、高酸、高碱、高盐、高毒、高渗、高压、干旱或高辐射强度等绝高毒、高渗、高压、干旱或高辐射强度等绝大多数生物都无法生存的环境。大多数生物都无法生存的环境。极端微生物(嗜极菌):极端微生物(嗜极菌):凡依赖于这些极端凡依赖于这些极端环境才能正常生长繁殖的微生物。环境才能正常生长繁殖的微生物。(五)极端环境下的微生物(五)极端环境下的微生物极端环境极端环境不同生物的不同生物的pH极限极限红色为古细菌红色为古细
12、菌,蓝色为细菌,蓝色为细菌,浅绿色为藻类浅绿色为藻类,棕色为真棕色为真菌菌,黄色为原生动物,黄色为原生动物,绿色为植物绿色为植物,紫色是动物紫色是动物。不同生物的温度极限不同生物的温度极限红色为古细菌红色为古细菌,蓝色为细菌蓝色为细菌,浅绿色为藻类浅绿色为藻类,棕色为真棕色为真菌菌,黄色为原生动物黄色为原生动物,绿色为植物绿色为植物,紫色是动物紫色是动物。Life in extreme environments.LynnJ.Rothschild&RoccoL.MancinelliNature,2001,Vol.409,1092-1101极端环境微生物的研究意义极端环境微生物的研究意义v由于极端
13、环境微生物能产生许多独特的稳定蛋由于极端环境微生物能产生许多独特的稳定蛋白,在生物技术产业上有很高的价值,它们产白,在生物技术产业上有很高的价值,它们产生的许多酶已经在市场上得到广泛的应用。生的许多酶已经在市场上得到广泛的应用。v在生物学上,极端环境微生物的意义也不能被在生物学上,极端环境微生物的意义也不能被低估,通过对低估,通过对16s rDNA的研究,的研究,Woese在在1990年提出了新的分类系统。年提出了新的分类系统。v对极端环境微生物中古细菌的研究,显示这一对极端环境微生物中古细菌的研究,显示这一类微生物和已知的微生物有显著的差别,从而,类微生物和已知的微生物有显著的差别,从而,提
14、出了新的分类系统,即三域分类系统古菌、提出了新的分类系统,即三域分类系统古菌、细菌和真核生物。细菌和真核生物。极端环境微生物在工业上的应用极端环境微生物在工业上的应用Lifeinextremeenvironments.LynnJ.Rothschild&RoccoL.MancinelliNature,2001,Vol.409,1092-1101人体的正常菌群人体的正常菌群 在人类的皮肤、粘膜以及一切与外界环境相通的腔在人类的皮肤、粘膜以及一切与外界环境相通的腔道,如口腔、鼻咽腔、消化道和泌尿生殖道中经常有道,如口腔、鼻咽腔、消化道和泌尿生殖道中经常有大量的微生物存在着。大量的微生物存在着。生活在
15、健康动物各部位,数量大、种类较稳定且生活在健康动物各部位,数量大、种类较稳定且一般是有益无害的微生物,称为正常菌群一般是有益无害的微生物,称为正常菌群.正常菌群与人体的关系:一般能维持平衡,菌群正常菌群与人体的关系:一般能维持平衡,菌群内部的各种微生物之间,也相互制约而维持相对稳定。内部的各种微生物之间,也相互制约而维持相对稳定。机体防御机能减弱时,一部分正常菌群会成为病原微机体防御机能减弱时,一部分正常菌群会成为病原微生物;生物;正常菌群在非正常部位时也可引起疾病;正常菌群在非正常部位时也可引起疾病;由于外界因素的影响,破坏了各种微生物之间的相互由于外界因素的影响,破坏了各种微生物之间的相互
16、制约关系,正常菌群也会引起疾病(菌群失调症)。制约关系,正常菌群也会引起疾病(菌群失调症)。人体肠道正常菌群与宿主间的关系,主要是互生关系,人体肠道正常菌群与宿主间的关系,主要是互生关系,但在某些特殊条件下,也会转化为寄生关系。所谓正但在某些特殊条件下,也会转化为寄生关系。所谓正常菌群,实际上是相对的、可变的和有条件的。常菌群,实际上是相对的、可变的和有条件的。v正常菌群失调:正常菌群的微生态平衡是相对的、正常菌群失调:正常菌群的微生态平衡是相对的、可变的、有条件的。一旦宿主的防御功能减弱、正常可变的、有条件的。一旦宿主的防御功能减弱、正常菌群生长部位改变或长期服用抗生素等制菌药物后,菌群生长
17、部位改变或长期服用抗生素等制菌药物后,就会引起菌群失调。就会引起菌群失调。v条件致病菌:条件致病菌:由于正常菌群失调,原先某些不致病的正由于正常菌群失调,原先某些不致病的正常菌群成员就会乘机转移或大量繁殖,成为致病菌。常菌群成员就会乘机转移或大量繁殖,成为致病菌。v内源感染:内源感染:由条件致病菌引起的感染。由条件致病菌引起的感染。v微生态制剂:微生态制剂:根据微生态学理论而制成的含有有益菌的根据微生态学理论而制成的含有有益菌的活菌制剂。活菌制剂。v微生态学:微生态学:从细胞和分子水平上研究微观层次上的生态从细胞和分子水平上研究微观层次上的生态学规律。学规律。v人体五大微生态系统:人体五大微生
18、态系统:消化道、呼吸道、泌尿生殖道、消化道、呼吸道、泌尿生殖道、口腔及皮肤。口腔及皮肤。v益生菌剂:益生菌剂:一类分离自正常菌群,以高含量活菌为主体,一类分离自正常菌群,以高含量活菌为主体,以口服或粘膜途径投入,以改善宿主特定部位微生态平以口服或粘膜途径投入,以改善宿主特定部位微生态平衡并有其他有益生理活性的生物制剂。衡并有其他有益生理活性的生物制剂。二、二、菌种资源的开发菌种资源的开发菌种开发的一般步骤:菌种开发的一般步骤:采集菌样采集菌样富集培养富集培养纯种分离纯种分离性能测定。性能测定。研究微生物的研究微生物的分布规律分布规律,有助于开发丰富的菌种有助于开发丰富的菌种资源,防止有害微生物
19、的活动;资源,防止有害微生物的活动;现代分子生态学v微生物生态学研究什么?v1,有什么v2,做什么v3,能做什么v4,我们利用他们做什么v对环境中微生物种群的类型和数量进行及时和准确的分析测定在微生物生态研究中十分重要,传统的微生物分析测定方法,包括显微镜微生物形态观察、选择性培养基计数、纯种分离和生理生化鉴定等,在环境样品研究中都存在巨大缺陷。v近年来,v人们运用微生物生物化学分类的一些生物标记,包括呼吸链泛醌、脂肪酸和核酸,来进行环境样品中的微生物种群分析。v其中,以16S rRNADNA为基础的分子生物学技术已成为普遍接受的方法,该技术主要利用不同微生物在16S核糖体RNA(rRNA)及
20、其基因(rDNA)序列上的差异来进行微生物种类的鉴定和定量分析。微生物多样性与DNA指纹技术v环境样品中的微生物DNA提取物通常是不同微生物的DNA混合物,经过PCR后,其产物是序列等长但不同源DNA片段的混合物。混合物中序列的多样性和不同序列的丰度在一定程度上反映了原始样品中微生物种群的多样性和不同物种的丰度。如果可以将这些序列等长但不同源DNA片段分离开,则可对样品中微生物群落的组成进行初步的分析。经过多年的研究,现在已经有多种DNA指纹技术,又称为指纹技术,又称为多态性分析多态性分析变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE
21、)vDGGE的原理是:在碱基序列上存在差异的不同DNA双链解链时需要不同的变性剂浓度,DNA双链一旦解链,其在聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度将会急剧下降;因此,将PCR扩增得到的等长的DNA片段加入到含有变性剂梯度的凝胶中进行电泳,序列不同的DNA片段就会在各自相应的变性剂浓度下变性,发生空间构型的变化,导致电泳速度的急剧下降,以至停留在其相应的不同变性剂梯度位置,染色后可以在凝胶上呈现为分开的条带。每个条带代表一个特定序列的DNA片段。在不同泳道中停留在相同位置的条带,一般可视为具有相同的DNA序列。16S rDNA文库v有了微生物16S rDNA序列,不论是全长还是部分,都可以提交到GenBa
22、nk采用BLAST程序与已知序列进行相似性分析。Gen Bank将按照与测得序列的相似性高低列出已知序列名单、相似性程度以及这些序列相对应的微生物种类,但更为精确的微生物分类还取决于系统发育分析(phylogenetic analysis)。系统发育分析,就是根据能反映微生物亲缘关系的生物大分子(如16S rDNA、ATP酶基因)的序列同源性,计算不同物种之间的遗传距离,然后采用聚类分析等方法,将微生物进行分类,并将结果用系统发育树(phylogenetic tree)表示。基因探针设计v虽然上述从核酸提取到PCR、克隆、测序和系统发育分析的技术路线,可以给出v详细的微生物种群分析结果,但费时
23、费力,不能对目标种群进行原位和实时的检测,v而且由于核酸提取和PCR过程中存在的偏差,上述实验结果也有可能存在错误。因此v还需要根据测序和系统发育分析的结果进行DNA探针设计,将其施用于原系统v基因探针是一段特异性的DNA单链,通常长度为15到30个碱基,并可根据碱基互补的原理与待测样品中的互补序列在特定条件下结合(称为杂交),杂交前这段序列被标记上一些可检测的物质(如放射性同位素、荧光染料、或催化特异性反应的酶),然后就可利用与目标基因结合的基因探针上的放射性信号或荧光信号识别样品中的目标核酸,如16S rRNA荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridizatio
24、n,FISH)v将基因探针用荧光染料标记,再使之与固定在载玻片上的微生物样品杂交,将未杂交的荧光探针洗去后用普通荧光显微镜或是共聚焦激光扫描显微镜进行观察和摄像。v采用这一技术可以同时对不同类群的细菌在细胞水平上进行原位的定性定量分析和空间位置标示In situ identification of archaea/SRB aggregates with fluorescently labelled rRNA-targeted oligonucleotide probes.The archaea are shown in red,and the SRB in green.The aggregat
25、es were visualized using filter sets specific for DAPI,CY3 and FLUOS for identical microscopic fields.第二节第二节 微生物与生物环境间的关系微生物与生物环境间的关系自然环境中的微生物一般都不是单独存在的。自然环境中的微生物一般都不是单独存在的。生物间的关系既多样又复杂杂。微生物与生物环生物间的关系既多样又复杂杂。微生物与生物环境间的关系分为:境间的关系分为:一、互生一、互生二、共生二、共生三、寄生三、寄生四、拮抗四、拮抗五、捕食五、捕食一、互生一、互生 两种可单独生活的生物,当它们在一起时,通
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