2022年微生物学检验复习题.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 名词说明：学习资料欢迎下载微生物学检验复习题（供 2022 级医学检验本科）凝固酶 ：金黄色葡萄球菌可产生游离凝固酶和结合凝固酶两种,前者分泌至菌体外,被血浆中的协同因子激活为凝血酶,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,导致血浆凝固；后者结合于菌体表面不释放,能与纤维蛋白原结合,使纤维蛋白原变为纤维蛋白而引起细菌凝结,故又称为凝结因子；Vi抗原 ：伤寒、希氏沙门菌的表面抗原,是掩盖在 LPS外的荚膜多糖抗原；抗吞噬、抗体、补体,与毒力 有关；能阻挡 O抗原与相应抗体凝集,可进行噬菌体分型；肥达试验： 用已知伤寒、副伤寒沙门菌的 称为肥大反应；O、H抗原,

2、检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验,卫星现象： 当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时,可见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小,这种现象称为卫星现象；抗O试验： 抗链球菌溶素 O抗体检测,是一种体外毒素抗毒素中和试验；抗溶血素 O抗体 ASO可中和溶血素O的活性,常用于风湿热的帮助诊断,活动性风湿热患者抗体效价一般超过 400个单位；MRSA: 1ug苯唑西林纸片的抑菌圈直径 4ug/ml 的金黄色片葡萄球菌称为 MRSA. 对 1ug的苯唑西林抑菌圈 0.5ug/ml 的凝固酶阴性葡萄球菌称 MRCNS. 统称为耐甲氧西林葡萄球菌 MR

3、S. HLARE:氨基糖苷类高水平耐药,D试验： 克林霉素诱导耐药试验,外- 裴反应 : 变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、 X2、 XK、的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原,能出现交叉凝集,临床上用这些变形杆菌代替立克次体与患者血清做凝集反应,可作为立克次体病的帮助诊断试验,称为外 - 裴反应（ Weil-Felix reaction）；迁徙生长现象 ：奇特变形杆菌和一般变形杆菌的大多数菌株在一般琼脂平板上可扩散成菌接种部位为中心的厚薄交替的波纹状薄膜布满整个培育基表面的现象,称为迁徙生长现象神奈川试验 ：副溶血性弧菌在一般血平板（含羊、兔或马等血液）上不溶血或只产生 -溶血；但在在特定条

4、件下 , 副溶血性弧菌中某些菌株在含高盐 70g/LNacl 的人 O 型血或兔血及以 D- 甘露醇为炭源的我妻Wagatsuma 血琼脂平板上可产生 溶血 ,该现象作为鉴定致病性与非致病性菌株的一项重要指标 .结核菌素试验 ：结核菌素是结核杆菌的菌体成分,有两种,旧结核菌素（ OT ）和纯蛋白衍生物 （PPD ）,取 5U（0.1ug ）PPD 或 OT 0.1mL 注射于前臂掌侧皮下,注射后 结,以及其大小判定结果；4872 小时后观看,以是否显现红肿、硬卡介苗 ：有毒力的牛型结核分支杆菌在含甘油、马铃薯和胆汁的培育基中经13 年 230 次传代而获得的减毒变异株；抗酸杆菌 ：分支杆菌属中

5、大多数细菌,菌体内含有分支菌酸,具有抗酸性,一般不易着色,能抗击 3%盐酸 酒精的脱色作用,这类细菌又称为抗酸杆菌有菌免疫：是指细菌进入机体后对细菌再次入侵有免疫力,而当细菌或其成分从体内完全消逝后 机体的免疫力也随之消逝；细菌外膜 ：革兰阴性菌的特有成分,有脂质双层、脂蛋白、脂多糖三部分组成,作为爱护屏障可阻挡或减缓胆汁盐、抗体及其他可能杀死或损害细菌的有毒物质的进入,也可阻挡周质酶等一些细胞成分的缺失；脂多糖 ：由脂质双层向细胞外表伸出的是脂多糖,包括磷脂A 、核心多糖和O-侧链三个组成部分；DNAR 质粒 ：又称耐药质粒,具有编码能够破坏或修饰抗生素的酶基因；毒性噬菌体 ：能在宿主菌细胞

6、内复制增殖 , 产生很多子代噬菌体,并最终裂解细菌,称为毒性噬菌体；温顺噬菌体 ：又称溶原性噬菌体,噬菌体基因与宿主菌染色体整合,不产生子代噬菌体,但噬菌体能随细菌 DNA 复制,并随细菌的分裂而传代；接合 ：细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌；溶原性转换 ：是侵入细菌的噬菌体在溶原期以前噬菌体形式在细菌内与细菌的染色体发生重组,导致细菌的基因型发生转变,溶原性细菌可以获得新的性状；转导 ：以温顺噬菌体为载体,将供体菌的遗传物质转移到受体菌中,使后者获得新的性状；Hfr ：高频重组株,F 质粒基因经接合传递后 ,与染色体重组上的基因,这种染色体被整合进 F 质粒

7、基因的受体菌称 Hfr；,整合后的细菌能以高效率转移染色体毒血症 ：致病菌进入机体后,只能在机体局部生长繁衍不进入血循环,但其产生的外毒素入血；内素毒 ：是革兰阴性菌细胞壁的脂多糖,当菌体死亡崩解后游离出来；耐热,有毒性作用（发热、白细胞名师归纳总结 反应、内毒素血症、DIC）,抗原性弱,不行脱毒为类毒素；第 1 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习资料 欢迎下载外毒素 ：是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁衍过程中,释放到菌体外的蛋白质；不耐热,毒性强,对组织有挑选性作用,抗原性强,可脱毒为类毒素；中度敏锐 ：常规用药时,达到平

8、均血药浓度,一般相当于或略高于某种细菌的 MIC；对细菌引起的感染仅在应用高剂量该药物时有效,或细菌处于体内抗菌药物浓集的部位或体液 尿、胆汁、肠腔）中时才被抑制；对毒性较小药物,可适当加大剂量仍可获得临床疗效；中介 ：不是敏锐习性的度量,作为“ 缓冲碱”定；,以防止因微小技术因素失控导致的结果偏差,临床意义不确MIC：最低抑菌浓度（ g/ml ,指在体外试验中抗菌药物抑制培育基中某种细菌的生长的最低药物浓度,是药物抗菌活性的指标,提示药物的抑菌才能；汹涌发酵现象：在牛乳培育基中能分解乳糖产酸,使酪蛋白胨凝固,同时产生大量气体,将凝固 的酪蛋白胨冲成蜂窝状,并将液面上的凡士林层向上推挤,甚至冲

9、开管口棉塞,气概凶残,称为“ 汹涌发酵“,是产气荚膜梭菌的特点；无芽胞厌氧菌 ：是指一大群咋爱有氧条件下不能生长,必需在无氧条件下才能生长的无芽孢的革兰阳性及 革兰阴性的球菌与杆菌；二相性真菌 ：有些真菌可因环境条件（如养分、温度；氧气等）转变,可由一种形状转变为另一种形状,此真菌称为二相性真菌；假菌丝 ：又称无隔菌丝,是指酵母菌进行出芽生殖时,子母细胞不立刻分别而以狭小的面积相连,就称这种藕节状的细胞串为假菌丝；病毒 ：是由一个核酸分子（DNA 或 RNA ）与蛋白质构成的非细胞形状的营寄生生活的生命体；病毒体 ：完整的成熟病毒颗粒,由核酸和蛋白质构成,其核心只有一种核酸（壳构成核衣壳,有些

10、病毒的核衣壳外仍被有包膜；DNA或 RNA）,外被蛋白质衣病毒衣壳 : 包围在病毒核酸外的一层蛋白质,由肯定数量壳粒聚合而成；病毒衣壳的排列呈3 种对称型 （20面立体对称、螺旋对称、复合对称）可作为病毒鉴定和分类的依据；包膜 ：是病毒以出芽方式从细胞内释放时穿过核膜、胞质膜、空泡膜等,在核衣壳外获得了宿主细胞的膜成分；血凝素 ：又称红细胞凝集素,为包膜上的柱状突起糖蛋白,与病毒吸附和穿入宿主细胞有关,能与人、鸡、豚鼠等多种红细胞表面的 N-乙酰神经氨酸受体结合引起红细胞凝集；反转录病毒 ：反转录病毒是带有反转录酶（依靠 RNA的 DNA聚合酶）的 RNA病毒,此病毒在反转录酶的作用下以病毒

11、RNA为模板转录出互补 DNA链,单链 DNA进入细胞核内互补另一条 DNA,形成双链 DNA并以前病毒的形式整合于宿主 DNA中；问答题：1、试述微生物的种类及主要特点1 试述微生物的种类及主要特点答：微生物的种类有：非细胞型微生物,原核细胞型微生物,真核细胞型微生物；主要特点非细胞型微生物：无细胞结构,无产生能量酶,一种核酸,专性胞内寄生原核细胞型微生物：拟核,无核仁、核膜,只有核糖体,兼性寄生真核细胞型微生物：细胞核,有核仁、核膜,细胞器完整,腐生为主种类： 非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物特点： 1 个体小（ um/nm 2 结构简洁：单细胞或简洁多细胞结构,无分化；

12、3 代谢才能强、繁衍快速4 简洁变异、种类多、分布广泛2、简述正常菌群及生理功能正常菌群： 正常人体的体表及与外界相通的腔道中,都存在着不同种类和数量的微生物；在正常情形下,这些微生物对人类无害,成为正常菌群；生理作用 * 拮抗作用：正常菌群在生物体的特定部位生长后,对其他的菌群有生物拮抗的作用；产生这种生物屏障的往往是一些 厌氧菌 ；正常菌群通过紧密与黏膜上皮细胞结出来占据位置,由于在这些部位数量很大,在养分竞争中处于优势,并通过自身代谢来转变环境的 pH 值或释放 抗生素 ,来抑制外来菌的生长；* 养分作用：正常菌群的存在影响着生物体的物质代谢与转化；如 蛋白质、碳水化合物、脂肪及维生素的

13、合成,胆汁的代谢、胆固醇的代谢及激素转化都有正常菌群的参加；* 免疫作用：正常菌群的抗源刺激可以使宿主产生免疫,从而削减了本身的危害；已有试验说明,某些诱发的自身免疫过程具有抑癌作用；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习资料 欢迎下载* 抗衰老作用：3、简述条件致病菌及致病条件条件致病菌：在正常情形下不致病,在特殊情形下能引起疾病的细菌；致病条件： 1.机体免疫功能低下；2.借居部位转变； 3.菌群失调；4、比较革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁细胞壁革兰阳性菌50%-80% 革兰阴性菌5%-20% 强度较坚强较疏松厚

14、度20-80nm 10-15nm 肽聚糖层数可多达 50 层1-2 层肽聚糖含量占细胞壁干重占细胞壁干重磷壁酸+ + 外膜脂蛋白+ + 脂多糖5、革兰染色的步骤及影响因素（1）步骤：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,详细操作方法是：1）制片：涂片、干燥、固定；2）初染：草酸铵结晶紫染 1 分钟；用细流水水冲洗,甩去积水；3）媒染：加卢戈碘液掩盖涂面染 1 分钟；用细流水水冲洗,甩去积水；4）脱色：加 95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,数秒后水洗,然后斜持玻片,再加酒精,直到流下的酒精无色为止（约 30 秒）,用细流水水冲洗,甩去积水；5）复染：加稀释石炭酸复红染 30 秒

15、；用细流水水冲洗,甩去积水；标本干后,置油镜下镜检；（2）影响因素操作因素：涂图片太厚或太薄,固定时菌体过分受热以及脱色时间长短,均会影响结果染液因素：全部染液应防止染液蒸发而转变浓度,特殊是卢戈碘液久存或受光作用后易失去媒染作用；涂片积水过多会转变染液浓度,影响染色成效；细菌因素：细菌菌龄不同,革兰染色结果也有差异,一般以 影响细菌染色性 ；6、抗酸染色步骤、结果 步骤 1）用接种环挑取约 0.01ml 脓性或呈干酪样部分痰液做成 干燥后用酒精灯火焰固定；1824 小时的培育物染色成效最好,菌龄过长25m m 20mm大小的匀称薄涂片,待自然2）初染 用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红 2

16、-3 滴,在火焰高处渐渐加热,切勿沸腾,显现蒸汽即临时离开,如染液蒸发削减,应再加染液,以免干枯,加热 3-5 分钟,待标本冷却后用水冲洗；3）脱色 3%盐酸酒精脱色至无红色染液脱下为止,用水冲洗；4）复染 用碱性美兰溶液复染 1 分钟,用水冲洗后用吸水纸吸干；用油镜检查并记录结果；结果： 油镜观看涂片, 在淡蓝色背景下可见染成红色瘦长或略带弯曲的杆菌,并有分枝生长趋向,此为抗酸染色阳性菌；其他细菌或者细胞染成蓝色；名师归纳总结 -：认真观看至少300 个视野未发觉抗酸菌；3 遍） ; 第 3 页,共 12 页 ： 100 到 300 个视野内发觉1-2 条抗酸菌（全部涂膜镜检+：100 个视

17、野内发觉3-9 条抗酸菌（全部涂膜镜检1 遍）；- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - +：10 个视野内发觉1-9 条抗酸菌；学习资料欢迎下载+：每个视野内发觉 1-9 个抗酸菌；+ ： 每个视野内发觉 9 条以上抗酸菌；7、细菌常用生化试验的培育基、底物、指示剂、结果判定 A 碳水化合物代谢试验一 . 糖 醇 .苷类发酵试验底物：糖醇苷产物：酸酸和气（）（开放封闭）指示剂：溴甲酚紫（黄紫）培育基：肉膏汤h.（含相应糖醇苷）结果：紫黄（+）紫（ -）二.葡萄糖的氧化发酵试验底物：葡萄糖产物：有机酸指示剂：溴色香草酚蓝（黄绿蓝）培育基：葡萄糖培育管结果：氧化

18、管（开）发酵管（封）绿黄绿黄发酵型（ F）绿黄绿氧化型（ O）绿/绿蓝绿不利用 /产碱型（ -）三 -半乳糖苷酶试验底物：邻硝基酚 -半乳糖苷（ ONPG）产物：邻硝基酚（黄色）结果：黄（ +）不变（ -）四 七叶甘水解试验培育基： ONPG 培育基底物：七叶甘 产物：七叶素 指示剂： Fe2+ 培育基：七叶甘培育基结果：黑色（ +）不变（ -）五甲基红试验（试验）底物：葡萄糖产物：酸指示剂：甲基红（红 h .黄 h .）培育基：葡萄糖蛋白胨水结果：无色红（ +）不变（ -）六 VP 试验底物：葡萄糖 产物：乙酰甲基甲醇指示剂： 10%KoH -萘酚（ VP 甲乙液）培育基：葡萄糖蛋白胨水 结

19、果：红色（ +）不变（ -）B 蛋白质和氨基酸代谢试验一吲哚试验（靛基质试验）底物：色氨酸 产物：吲哚 指示剂：对二氨基苯甲醛（靛基质试剂）培育基：蛋白胨水 结果：玫瑰色（ +）不变（ -）二. 硫化氢试验（ H2S）底物：含硫氨基酸 产物：硫化氢指示剂：醋酸铅硫酸亚铁（Fe2+）培育基：含铁琼脂结果：黑色（ +）不变（ -）三尿素酶试验底物：尿素 产物：氨 指示剂：酚红（黄红）培育基：尿素肉汤尿素琼脂培育基结果：黄红（ +）黄（-）四苯丙氨酸脱氨酶试验底物：苯丙氨酸 产物：苯丙酮酸 指示剂： 10%三氯化铁培育基：苯丙氨酸琼脂斜面 结果：绿色化合物（+）不变（-）五氨基酸脱羧酶试验底物：氨基

20、酸 产物：胺和二氧化碳指示剂：溴甲酚紫（黄紫）培育基： oeller 脱羧培育基（含葡萄糖和氨基酸）结果：对比管不变（-）试验管黄紫（ +）黄此试验需做对比（不含氨基酸的培育基）C 碳源利用试验名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 一枸橼酸盐利用试验学习资料欢迎下载底物：枸橼酸盐 产物：碳酸盐指示剂：溴色香草酚蓝（绿蓝）培育基：枸橼酸盐培育基结果：绿蓝（ +）绿（ -）D 呼吸酶试验一 细胞色素氧化酶试验（OX 试验）OX 原理：细胞色素 C 氧化型细胞色素 C+苯二胺醌类化合物（红色）指示剂： 1%盐酸四甲基对苯二胺

21、 /盐酸二甲基对苯二胺产物：醌类化合物（红色）结果： 10s 内红色（ +）不变（ -）二 过氧化氢酶试验 /触媒（ H2O2 试验）原理：触媒H2O2 H2O+O2 指示剂： 3% H2O2 底物：3% H2O2 产物： O2 结果：大量气泡 O2 产生（ +）无（ -）留意：做对比三血细胞中有H2O2 ,可产生假阳性硝酸盐仍原试验原理：酶系 硝酸盐亚硝酸盐+ -萘胺 +对氨基苯磺酸 N - -萘胺偶氮苯磺酸（红色）底物：硝酸盐产物：亚硝酸盐指示剂：对氨基苯磺酸 / -萘胺（甲液 /乙液）培育基：硝酸盐培育基结果：红色（ +）不变（ -）留意：不变色,加入锌粉红色 真阴性 不变 假阴性E 其

22、他生化试验一 凝固酶试验原理：方法；结合型血浆凝固酶玻片法凝集（ +） /不凝集（ -）游离型血浆凝固酶试管法凝固（ +）/不凝固（ -）结果：金黄色葡萄球菌（+）其他（ -）留意：做对比试验二 卵磷脂酶试验原理：酶+Ca2+ 卵磷脂甘油脂（混浊）底物：卵磷脂 产物：甘油脂培育基：卵黄琼脂平板 结果：混浊（ +）不变（ -）三 DNA 酶试验原理：DNA 酶长链 DNA 寡核苷酸链（被酸沉淀）（溶于酸）底物：长链 DNA 产物；寡核苷酸链培育基： DNA 琼脂平板 结果：菌落四周透亮环（+）无透亮环（ -）四 胆汁溶菌试验原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌,而其他细菌就能耐受；指示剂： 10%去

23、氧胆酸钠结果：加胆盐的培育基变透亮,而对比管仍混浊（+）-）加胆盐的培育基仍混浊,而对比管仍混浊（五CAMP 试验原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌,而其他细菌就能耐受；指示剂： 10%去氧胆酸钠名师归纳总结 结果：加胆盐的培育基变透亮,而对比管仍混浊（+）-）第 5 页,共 12 页加胆盐的培育基仍混浊,而对比管仍混浊（F 复合生化试验一克氏双糖铁琼脂培育基试验（KIA 试验）培育基：克氏双糖铁琼脂培育基底物：乳糖和葡萄糖指示剂：酚红产物：酸- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 结果：乳糖葡萄糖产气学习资料欢迎下载硫化氢二 动力 -靛基质 -尿素酶试验（

24、MIU 试验）培育基：培育基为含尿素、蛋白胨成分的半固体培育基指示剂：酚红 底物：蛋白胨中的色氨酸、尿素结果：动力 吲哚 尿素8、何为细菌的质粒,质粒的主要特点及种类 质粒：质粒为细菌染色体外的遗传物质,环状双股可独立复制,与细菌的遗传变异有关；特点： 1）自我复制DNA；质粒携带有遗传信息,掌握某些特定的遗传性状,2）独立掌握特定的性状（F 质粒、 R 质粒、 Col 质粒、 Vi 质粒）3）可在细菌间转移、可丢失、一个细菌体内可带有多个质粒种类：致育质粒（F 质粒）、耐药质粒（ R 质粒）、细菌素养粒 Col 质粒 、毒力质粒 Vi 质粒 、代谢质粒9、构成细菌侵袭力的物质基础有哪些？（1

25、）菌体表面结构：主要包括荚膜及其他表面物质；如微荚膜、Vi 抗原、 K 抗原等,都具有抗吞噬、抵抗抗体和补体的作用；（2）菌毛：通过与宿主细胞表面的相应受体结合而粘附定居在黏膜表面,有助于细菌侵入；（3）侵袭性酶：是某些细菌代谢过程中产生的与致病性有关的胞外酶,分泌到菌体四周,协助细菌抗吞噬或有利于细菌在体内扩散；主要的侵袭性酶有：固物沉积在菌体表面或病灶四周,爱护细菌不被吞噬细胞吞噬和杀灭；1）血浆凝固酶：使血浆发生凝固；凝 2）透亮质酸酶：又称扩散因子,因而有利于细菌及其毒素向四周及深层扩散；3）链激酶：使细菌易于扩散；4）胶原酶：促使细菌在组织间扩散；5）脱氧核糖核酸酶：有利于细菌扩散；

26、6）其他可溶性物质：杀白细胞素,溶血素；4芽孢 增强细菌的侵袭力10、高压灭菌的温度、时间、适用范畴,如何对高压灭菌成效进行监测 答： 134, 1320min,适用于耐高温耐湿的物品,如一般培育基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射 器、敷料等物品的灭菌；监测：高压蒸汽灭菌成效的监测：有以下三种方法；第一种是物理监测；依据安装在灭菌器上的量器（ B-D 试验,排气、 抽真空, 反应压力、 温度, 时间 ）、图表、指示针、报警器等,指示灭菌设备工作正常与否；此法能快速指出灭菌器的故障,但不能确定待灭 菌物品是否达到灭菌要求；此法作为常规监测方法,每次灭菌均应进行 .；其次种是化学指示监测；化学

27、指示卡或化学指示胶带 100% 变色来指示灭菌成效；利用化学指示剂在 肯定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点,以判定是否达到灭菌所需参数；第三种是生物指示剂监测；嗜热脂肪芽孢菌菌片,121 19 分钟 -溴甲酚紫葡糖蛋白胨培育基-7 天培养-显紫色无嗜热脂肪芽孢菌生长,灭菌合格；11、简述医院感染及其病原学特点；,简述医院感染及其病原学特点；医院感染 :指住院病人在医院内获得的感染,包括在住院期间发生的感染和 在医院内获得出院后发生的感染,但不包括入院前已开头或者入院时已处于埋伏期的感染；医院工作人员 在医院内获得的感染也属医院感染；病原学特点 :流行基本环节包括三个基本要素,感染源,感

28、染途径,感染者 格外源性医院感染,内源性医院感染传播途径：接触传播;空气传播 ;共同媒介传播（水,食物,医源性（血液）诊疗器械和设备,一次性用品）;生物媒介传播；流行形式：散发性,爆发性；易感人群：机体免疫功能严峻受损者；婴幼儿及老年患者；养分不良者；接受各种免疫抑制剂治疗者；接 受各种侵入性操作者；长期应用光谱抗菌药物者；住院时间长着；手术时间长者；以革阴为主,也有革阳和真菌感染；12、 L 型菌及特点 概念 ：某些药物作用于细菌,可抑制的肽聚糖的合成或破坏细胞壁的结构,在高渗环境下,细菌仍可存活,成为细胞壁缺陷型 L 型细菌的生物学特性：1、细菌 L 型的形状和染色性：细菌 L 型呈高度多

29、形性,大小不一；着色不匀,无论其原为革兰阳性或阴 性菌,形成 L 型大多染成革兰阴性；2、细菌 L 型生长缓慢,养分要求高,对渗透压敏锐,一般养分基上不能生长,培育时必需用高渗的含血清 的培育基；（3-5%Nacl ,10-20% 蔗糖, 10-20% 人或马血清）,细菌 L 型在高渗的含血清的培育基上生长后形 成三种类型的菌落；3、L 型细菌的其他特点：生化反应和抗原结构不典型,无法进行常规的菌种鉴定；人工传代后可回复为野 生型；常引起慢性及反复发作的感染,对作用于细胞壁的常规药物不敏锐；名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - -

30、 - - 学习资料 欢迎下载13、 K-B 法药敏试验的影响因素及质量掌握1.药敏纸片的药量和 pH 值；2.纸片的规格 药敏纸片的厚度要求在 1mm 左右,这样适合药物的扩散速度和细菌的生长；药敏纸片的直径为 6.006.35mm；假如纸片的厚度过厚或过薄,药敏纸片直径过大或过小将影响药敏试验的结果；3.含药纸片储存和含药纸片片间差；4.药敏纸片应用标准菌株定期监测是否失效；5 试验操作过程中的影响因素6 细菌的纯度7 菌液浓度8 菌液在培育基上的分布9 贴药敏纸片时,每取一种药敏纸片必需烧一下镊子口,防止药敏纸片之间相互混淆,以提高药敏的精确性；10 培育基种类,在大多数情形下,采纳WHO

31、 组织统一要求的M-H 培育基进行的药敏试验成效较好11 孵育的温度和时间14、液体稀释法的原理答：原理：以水解酪蛋白（M-H ）液体培育基将抗生素作不同浓度的稀释,然后种入待检菌,定量测定抗菌药物对该菌的 MIC ；以外观清晰, 肉眼看无细菌生长的最低药物浓度（最高抗生素稀释度）作为 MIC ；15、联合抑菌试验可能显现的结果、及判定标准联合抑菌试验可能显现的结果、及判定标准可能显现的结果有：1,拮抗作用, 2,无关作用3 累加作用4 协同作用FIC 指数 =A 药联合时的 MIC/A 药单测 MIC+B 药联合时的 MIC/B 药单测 MIC. 判定标准： FIC 指数 2 为拮抗作用；1

32、6、细菌产生耐药性的生化机制 答： 1、产生一种或多种水解酶,钝化酶和修饰酶；2、抗生素作用的靶位转变,包括青霉素结合蛋白位点和 DNA 解旋酶的转变；3、细菌膜的通透性下降, 包括细菌生物被摸的形成和通道蛋白丢失；4、细菌主动外排系统的过度表达；17、 - 内酰胺酶的种类及目前临床最常用的检测方法,菌有哪些？常规需做直接 -内酰胺酶检测的细答：B-内酰胺酶的种类： 按结构 （功能） 分为丝氨酸 （ A、C、D）和 金属酶 （ B）；按分子生物学分类 （ Bush 分类）： 1C、2aA、 2bA 、 2bc（ A）、 2brA 、2cA 、2dD、 2cA、 2fA 、3B 、 4.其它 ；

33、临床检测方法：1、纸片法（头孢硝噻吩纸片）, 10 分内观看结果纸片由黄变红为阳性,表示有B-内酰胺酶产生； 2、碘淀粉法, 10 分后蓝色消逝为阳性；常规需进行 B-内酰胺酶的检测的细菌有：肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌、卡他 莫拉菌葡萄球菌、肠球菌、大肠埃希菌、奇特变形杆菌、产酸克雷伯菌等；18、何为 ESBL,临床意义及 CLSI 举荐的检测方法,哪些细菌应常规检测 ESBL？ESBL 为超广谱 内酰胺酶 临床意义： 临床上以革兰阴性杆菌产生的超广谱 内酰胺酶 （ESBLs）最受重视, 一旦 ESBLs 阳性,ESBLs 菌在体 不管体外药敏如何,均应视为对青霉素和全部

34、头孢菌素类耐药,应改用其它抗菌药物；产 外对多种抗生素敏锐而在感染者体内却表达临床意义耐药；检出 ESBL 菌株可对症下药,缩短病人住院 时间,削减病人痛楚,仍可以大大削减院内感染且为患者节约开支； CLSI 举荐的检测方法：双纸片协同法； 哪些细菌应常规检测 ESBL：肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌、奇特变形杆菌、阴沟肠杆菌 等革兰阴性杆菌；19、何为 MRSA？临床意义及检测方法 MRSA 是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的缩写,是金黄色葡萄球菌家族中的一种检测方法名师归纳总结 1 、纸片扩散法（ K-B 法） 2、肉汤稀释法 敏检测 7 、 DNA 探针杂交 8、PCR 技术3 、琼脂

35、稀释法4 、琼脂挑选法5 、浓度梯度法6、自动化药第 7 页,共 12 页20、淋病的确诊应如何进行微生物学检查NYC 、MTM 、ML ,立刻置于5CO2 气体答：先培育 :即疑为淋病奈瑟菌感染的标本接种于挑选培育基如- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 条件下 3537孵育,培育基需观看学习资料欢迎下载24 小时观看,淋病奈瑟菌的72 小时后无菌生长可报告为阴性,每隔菌落呈灰褐色、光滑、半透亮呈露滴状凸起的菌落；然后进行革兰染色镜检 :将菌落涂片,革兰染色后显微镜下见革兰阴性双球菌,再进行氧化酶和触酶试验,葡萄糖发酵试验阳性,其他糖类试验阴性于是可确诊

36、为淋病奈瑟菌；21、链球菌是如何分类和鉴定的？链球菌的分类：依据溶血现象分类：甲型溶血性链球菌、乙型、不显现溶血的丙型；依据 Lancefield 抗血清分型将分为 ABCD .等 20 个群；对人类治病主要是 A 群；鉴定：羊血脂平板识别溶血特性,涂片格兰染色,镜检,假如为 G+,进一步做触酶试 验, 6.5%的 NaCL 不生长着,可确定为链球菌细菌；22、肺炎链球菌致病因素及鉴定要点,如何区分肺炎链球菌与草绿色链球菌？肺炎链球菌的致病因素：肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用；肺炎链球菌的溶血素、神经 氨酸酶也是其主要致病物质 鉴定要点：发酵葡萄糖和多种糖,不产气,乳酸为代谢终末

37、产物,触酶阴性,胆汁溶菌试验和 Optochin 阳性； a 溶血性链球菌；荚膜多糖使菌落呈粘液状；可产生自溶酶,培育 霉素耐药甚至多重耐药；48h 后显现“ 脐窝状” 菌落；对青如何区分肺炎链球菌和草绿色链球菌：肺炎链球菌：Optochin为 S,胆汁溶菌试验阳性；草绿色链球菌：Optochin 为 R,胆汁溶菌试验阴性；23、肠杆菌科细菌有哪些共同的生物学特性？如何区分肠杆菌科细菌与其他革兰阴性杆菌？答： 共同的生物学特性：均无芽胞, 多数有动力；1. 形状与染色： G 杆菌, 多数有周鞭毛、 有荚膜或微荚膜, 致病菌株多数有菌毛,2、培育：需氧或兼性厌氧,养分要求不高,在普特培育基上和M

38、AC 上生长良好；3、生化反应：氧化酶；发酵葡萄糖（产酸或产酸产气）；触酶；硝酸盐仍原试验发酵多种糖类,多数能发酵乳糖,产酸产气利用乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌：肠道致病菌多数不发酵乳糖肠道非致病菌多数发酵乳糖4、抗原构造复杂：鞭毛抗原（H）、 K 或 Vi 抗原、菌体抗原（O）5、抗击力不强,加热 6030min 即被杀死,不耐干燥,对一般化学消毒剂如漂白粉、酚、甲醛等均敏锐；对低温有耐受力,能耐胆盐,并在肯定程度上能抗击染料的抑菌作用；6、易变异：通过接合、转导、溶源性转换引起耐药性变异、毒力性变异、生化反应性变异7、临床意义：致病物质：菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素传染途

39、径：肠道传染、肠道外传染所致疾病： 肠道致病菌引起肠道传染病（细菌性痢疾、伤寒等） 条件致病菌：是医院感染的主要病原菌肠杆菌科细菌与其他革兰阴性杆菌区分非发酵菌 O/- + 杆状 单、丛、周或无肠杆菌科细菌与其它G-b 鉴定要点 : 肠杆菌科弧菌科O/F（葡萄糖）F - F + 氧化酶形状杆状弧形鞭毛周毛或无单毛24、哪些是主要引起人类肠道感染的肠杆菌科细菌？埃希菌属,志贺菌属,沙门菌属,耶尔森菌属；25、如何进行肠杆菌科细菌的微生物学检验？答:尿液标本1 第一是直接图片染色 ,给出初步报告2 接种在 BAP 和 MAC 上 ,35培育箱中培育 1824 小时3 培育好后 , 做涂片染色 ,

40、和氧化酶试验 . 然后转种到 KIA 和 MIU上以及 O/F,37 培育 1824 小时 . 4 然后观看结果,全面生化鉴定和血清学分型5 药敏试验名师归纳总结 注:1 血清和脑脊液标本需要先增菌,然后做 1 4 步第 8 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 2 粪便呕吐物的分别培育是在学习资料欢迎下载SS/HE/XLD 和 MAC/EMB/中国蓝 上边进行 , 然后同尿标本以上试验步骤为肠杆科菌属的检验程序 报告依据 : 革兰阴性无芽孢杆菌 O/F 为发酵型 吲哚 / 甲基红 /V-P/ 枸橼酸盐 IMVC MAC上面的菌落 KIA

41、试验的结果 肠杆菌的定科主要依靠 O/F 试验和氧化酶试验,以及菌的形状和有无鞭毛（有鞭毛的细菌才具有致病性）来定；属种的鉴定可以用自动仪和商品鉴定盒来定；手工操作结果判定各种属特点：大肠埃希氏菌 ：在挑选性平板上课发酵如糖,形成有色菌落：EMB上市粉红色有金属光泽；MAC上粉红或红 色；HE上中度抑制, 菌落呈橙红色或橘红色；SS上受抑制, 菌落呈粉红色或者中间粉红色,四周无色； XLD 上市不透亮的黄色；KIA 上为 AA+-, 上下产酸产气, H2S阴性 MIU（动力 / 吲哚 / 尿素） +-. IMVC+- 沙门菌属 ：KIA 结果可能为葡萄糖分解阳性,乳糖分解阴性,有的产气,有点不

42、产气,有的 H2S阳性 有的阴性； MIU+- ；IMVC:-+- 或者 -+-+ ；沙门菌属的血清学鉴定中,诱导 . H血清分型假如其次相不凝,可能是位相志贺菌属 ：无鞭毛,在增菌培育是在 GN肉汤上, 37培育 4 到 6 小时即可； KIA 上,产碱 / 产酸、不产气、H2S阴性； MIU-+/-,IMVC 上（ +/- ）+- ；血清定型原就是先多价,后单价,需对比；小肠结肠炎耶尔森菌：粪便标本在增菌时采纳冷增菌培育,45培育 2 到 3 周； 25动力阳性, 37动力阴性；尿素阳性克雷伯菌属 ：对氨苄西林自然耐药,对头孢简洁耐药；肠杆菌属 ：IMVC结果与大肠埃希氏菌属相反,为-+,

43、 动力和鸟氨酸均阴性；变形杆菌属 ：周身鞭毛, H2S 阳性,同种间的鉴定,一般变形杆吲哚阳性,一般变形杆与豪氏主要依靠七叶苷和水杨苷试验,前者两项为阳性,后者为阴性,奇特变形杆的特点是鸟氨酸阳性,产黏变形杆是木糖发酵阴性,潘氏变形杆是氯霉素耐药；26、变形杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌鉴定要点变形杆菌1、 G- 杆菌2、普琼：有迁徙现象；SS：中心呈黑色3、氧化酶 - 4、尿酶 + 5、 KIA ：KA+ 小肠结肠炎耶尔森菌1、 G-杆菌2、 CIN：菌落为粉红色,偶有一圈胆盐沉淀3、氧化酶： - 4、尿酶 + 5、 KIA ：KA- 6、 TSIA ：AA 7、血清定型27、不发酵革兰阴性杆菌的共同特点是什么？临床常见菌属有哪些？答: 1 培育 在一般培育基上生长良好,包括血平板,巧克力平板； 2 革兰染色 革兰阴性杆菌； 3 氧化酶试验大多为阳性； 4