2022年植物组织培养试题与答案.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 植物组织培育练习题 1. 植物组织培育：指要人工掌握的条件下,将植物体的任何部分,或 器官、或组织、或细胞,进行离体培育,使之发育形成完整植物 体；所谓人工掌握的条件,即养分条件和环境条件；植物体的任何 一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞；2. 愈伤组织培育：将外植体接种在人工培育基上,由于植物生长调剂 剂的存在,而使其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成 再生植株；3. 外植体： 植物组织培育中的各种接种材料,包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等；4. 脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形

2、成未分 化的愈伤组织的现象；5、接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分别出器官、组织、细 胞,转放到无菌培育基上的全部操作过程； 6、褐变：外植体在培育过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚 类物质氧化成棕褐色的醌类物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散 使培育基逐步变成褐色,而且仍会抑制其他酶的活性,严峻影响外植 体的脱分化和器官分化,最终变褐而死亡的现象；二 填空 植物组织培育依据培育方式分为固体培育和液体培育；2、植物组织培育类型分为愈伤组织培育、器官培育、胚培育、细胞和 原生质体培育；3、组织培育的主要应用领域有快速繁衍、脱毒、体细胞无性系变异和新 品种培育、单倍体育种、种质储存、遗

3、传转化、次生代谢物的生产等几个方 面；4、茎尖培育依据培育目的和取材大小可分为快速繁衍和脱毒培育两种类 型；5、一般组织培育的几道工序如下：培育器皿的清洗、培育基的配制、分装和高 压灭菌；无菌操作材料的表面灭菌和接种,培育；试管苗的驯化、移栽与1 / 4 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 4 页精选学习资料 - - - - - - - - - 初期治理；6、在进行植物组织培育室设计时,其设计应包括洗涤室、预备室、灭菌室、无 菌操作室、培育室、细胞学试验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚；7、培育基的成分主要包括无机养分、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼 脂、激素、

4、活性炭、 PH；8、植物器官培育主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培育；9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成 完整植株的潜在才能；10、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁衍 时,有些培育物的嫩茎、叶片往往会显现半透亮状和水渍状,这种现象称为玻璃化；其苗称为玻璃化苗；11、液体培育是将培育物方在液体培育基中培育,又称为液体震荡培育；三、1、简述培育基的配制、分装、包扎和灭菌；答：（1）确定培育基的配方；（2）贮备液（或母液）的配制与储存配一些浓 溶液,用时稀释,这种浓溶液叫贮备液或母液；按药品种类和性质分别配制,单项、单独储

5、存或几种混合储存；一般应按配方次序依次称量,分别溶解在少 量蒸馏水中,最终再依次加到一起,并定容到规定体积；贮备液配好后贴上标 签,储存在冰箱中；（3）配制培育基 先在干净的不锈钢锅理放入约750ml 蒸馏水,加入所需要的琼脂和糖,最好能在水浴锅理将琼脂溶化,如直接加热应不停地搅拌,防止在锅底烧焦或 沸腾溢出； 按需要加入相应量的母液； 按需要加入相应量的植物激素和其它物质；加蒸馏水定容, 充分混合 好后,用 1NKOH（或 NaOH）调整 PH值到所需值；（ 4）分装：按容器的大小和 培育要求,趁热将适量培育基分注到三角瓶或试管中,并即刻用封口膜封住瓶 口；（5）灭菌：压力108kPa,温度

6、 121 度,时间 1530 分钟； 2、什么叫接种？简述无菌操作留意事项；答：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分别出器官、组织、细胞,转放到 无菌培育基上的全部操作过程叫接种；无菌操作留意事项好下：（ 1）进无菌室之前,操作人员需着经灭菌的白色工作服,戴口罩；操作 人员双手必顺进行灭菌；植物组织培育室的核心是无菌室（又叫接种室）,怎样进行无菌室的灭菌？2 / 4 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 4 页精选学习资料 - - - - - - - - - 答：（ 1）常规灭菌法 用 70%酒精（或 0.1%新洁尔灭）朝天花板、四周墙壁方向喷洒； 待整个室喷洒完毕后依次用70%

7、酒精将台子揩一遍； 用湿拖把（ 70%酒精打湿）,把地板拖一次； 然后将无菌室的门关闭,开紫外灯,照耀 530分钟； 0.52 小时后进入室内操作,待工作完毕后,将室门打开换气；以后每用一次 灭菌一次；（2）无菌室发觉霉斑（墙上）时的灭菌 用 70%酒精擦一遍（里里外外）； 用新配 70%酒精重复再擦一遍； 甲醛蒸：方法是每立方 M 空间用 2ml 甲醛（福尔马林）加 0.2 克高锰酸钾的 比例,蒸房间 24 小时（门窗密闭）,然后开启房门,放走甲醛气体； 常规灭菌法再灭菌一次；待用；4、什么叫污染？污染的缘由有哪些？简述预防污染的措施？污染是指在组培过程中,由于真菌、细菌等微生物的浸染,在培

8、育器内滋生大 量的菌斑,使培育材料不能正常生长和发育的现象；污染缘由有以下几种： 培育基及各种使用器具消毒不完全； 外植体灭菌时不完全,在菌残存在细胞组织中； 操作时人为因素带入； 环境不清洁； 超净工作区域污染；预防污染的措施：做好器具灭菌、外植体灭菌,做好无菌操作技术,搞好组培 室环境条件,正确使用和保护好超净工作台；5、简述培育物的玻璃化现象及其预防措施；答：玻璃化是试管苗的一种生量失调症状,当植物材料进行离体繁衍时,有些 培育物的嫩茎、叶片往往会显现半透亮状和水渍状,这种现象称为玻璃化；其 苗称为玻璃化苗；结果是瓶内的小苗过渡生长,但有用的苗很少；各种不同植 物,玻璃化的发生频率各不相

9、同；大量的试验说明：玻璃幕化苗是在芽分化启 动后的生长过程中,由碳水化合物、氮代谢和水分状态等发生生理性反常所引 起,它由多种因素影响和掌握,产生玻璃化的主要缘由有：激素浓度、温度、湿度、培育基的硬度、光照时间和培育成分；针对以上缘由,可以通过降低培 养基的水位；削减培育基中含氮化合物的用量；增加光照强度；调整培育温 度；降低培育基中细胞分例素的用量；提高培育基的硬度等措施,来削减玻璃 化现象的发生；6、简述外植体的褐变及其预防措施；褐变是指在组培过程中,由培育材料向培育基中释放褐色物质,致使培育基逐 渐变成褐色,培育材料也随之渐渐变褐而死亡的现象；它的发生是由外植体中 的酚类化合物与多酚氧化

10、酶作用被氧化形成褐色的醌类化合物,醌类化合物在 酪氨酸酶的作用下,与外植体组织中的蛋白质发生聚合,进一步引起其他酶系 数失活,导致组织代谢紊乱,生长受阻,最终逐步死亡；引起褐变的缘由包括 外植体本身、培育基及培育条件等方面的影响；减轻褐化现象的途径有以下： 外植体和培育材料进行2040 天的遮光培育或暗培育； 挑选相宜的培育基,调整激素用量； 掌握温度和光照,在不影响正常生长和分化的前提下,尽量降低温度,削减 光照；3 / 4 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 4 页精选学习资料 - - - - - - - - - 冬春季节挑选年龄相宜的外植体材料进行组培,并加大接种数量； 在培育基中加入抗氧化剂和其他抑制剂,如抗坏血酸、硫代硫酸钠、有机酸、半光氨酸及其盐酸盐、亚硫酸氢钠、氨基酸等,可以有效地抑制褐化； 加快继代传瓶的速度,添加活性炭等吸附剂（0.5%2.5%）,是生产上常用的有效方法； 四、请设计一个组织培育室,说明规模、面积、作用、目的、各 室作用,并绘出平面图；4 / 4 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 4 页