2022年各种PH值的磷酸盐缓冲液配制.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 各种 PH 值的磷酸盐缓冲液配制PH=PKa+lga/b K1=7.52X10-3, K2=6.23X10-8, K3=2.20X10-13.设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1 磷酸氢二钾浓度为C2 pH=pK-lg （C1/C2）=7 这里的 pK 是 7.2（这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对,公式是通用的）解得 C1：C2=1.585（mol 比） 磷酸的二级电离常数）Ka,求出 PKa,然后依据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比 C1：C2；这时混合物中 P 的质量分数为（31/1361.585+31/174 1）/（ 1.585

2、+1）=20.87% 混合盐的质量比 1361.585：1741=215.56： 174 10mg/20.87%=47.916mg （47.916/（215.56+174 ）215.56=26.51mg （47.916/2.575 ）174=21.40mg 应取磷酸二氢钾 26.51mg 磷酸氢二钾 21.40mg 用蒸馏水稀释至 1L磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠 38.0g ,与磷酸氢二钠 5.04g, 加水使成 1000ml, 即得；磷酸盐缓冲液 pH2.0 甲液 :取磷酸 16.6ml ,加水至 1000ml ,摇匀；乙液：取磷酸氢二钠 71.63g ,加水使溶解成 1000ml ；取上述

3、甲液 72.5ml 与乙液 27.5ml 混合,摇匀,即得；磷酸盐缓冲液 pH2.5 取磷酸二氢钾 100g ,加水 800ml ,用盐酸调剂 pH 至 2.5, 用水稀释至1000ml ；磷酸盐缓冲液pH5.0 取 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液肯定量, 用氢氧化钠试液调剂pH 值至 5.0 ,即得；磷酸盐缓冲液pH5.8 取磷酸二氢钾8.34g 与磷酸氢二钾0.87g, 加水使溶解成1000ml ,即得；磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钾pH6.5 0.68g, 加 0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml ,用水稀释至100ml ,即得；磷酸盐缓冲液pH6.6 取磷酸二氢钠1.74g 、磷酸氢二钠

4、2.7g 与氯化钠1.7g ,加水使溶解成400ml ,即得；名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 4 页精选学习资料 - - - - - - - - - 磷酸盐缓冲液 含胰酶 pH6.8 取磷酸二氢钾6.8g, 加水 500ml 使溶解 ,用 0.1mol/L氢氧化钠溶液调剂 pH 值至 6.8 ；另取胰酶10g ,加水适量使溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml ,即得；磷酸盐缓冲液pH6.8 取 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml ,加 0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml ,用水稀释至1000ml ,摇匀,即得；0.68g ,加 0.1mol/L氢氧化钠溶

5、液29.1ml ,用水稀释至磷酸盐缓冲液pH7.0 取磷酸二氢钾100ml ,即得；磷酸盐缓冲液pH7.2 取 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml 与 0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml ,加新沸过的冷水稀释至200ml ,摇匀,即得；1000ml ,磷酸盐缓冲液pH7.3 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g, 加水使溶解成调剂 pH 值至 7.3 ,即得；磷酸盐缓冲液pH7.4 取磷酸二氢钾1.36g , 加 0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml ,用水稀释至200ml ,即得；磷酸盐缓冲液 pH7.6 取磷酸二氢钾 27.22g ,加水使溶解成 1000ml ,取

6、50ml ,加 0.2mol/L氢氧化钠溶液 42.4ml ,再加水稀释至 200ml ,即得；磷酸盐缓冲液 pH7.8 甲液：取磷酸氢二钠 35.9g ,加水溶解,并稀释至 500ml ；乙液：取磷酸二氢钠 2.76g ,加水溶解,并稀释至 100ml ；取上述甲液 91.5ml 与乙液 8.5ml 混合,摇匀,即得；磷酸盐缓冲液pH7.8 8.0 取磷酸氢二钾5.59g 与磷酸二氢钾0.41g ,加水使溶解成1000ml ,即得；-磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）试剂：NaH2PO4 2H2O Na2HPO4 12H2O配制方法：配制时,常先配制 0.2mol/L

7、的 NaH2PO4 和 0.2mol/L 的 Na2HPO4 ,两者按肯定比例混合即成 0.2mol/L 的磷酸盐缓冲液（PB）,依据需要可配制不同浓度的 PB 和 PBS；1）0.2mol/L 的 Na2HPO4 ；称取 Na2HPO4.12H2O 31.2g 或 NaH2PO4 H2O 27.6g 加重蒸水至1000ml 溶解；名师归纳总结 2）0.2mol/L的 Na2HPO4 ：称取 NaHPO4. 12H2O 71.632g（或 Na2HPO4 7H2O 53.6g或第 2 页,共 4 页Na2HPO4 2H2O 35.6g ）加重蒸水至1000ml 溶解；- - - - - - -

8、精选学习资料 - - - - - - - - - 3）0.2mol/L pH7.4的 PB 的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4 和 81ml 0.2mol/L的Na2HPO4 12H2O, 充分混合即为0.2mol/L的 PB（pH 约为 7.4 7.5 ）；如 pH 偏高或偏低,可通过转变二者的比例来加以调整,室温储存即可；0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7 8.0 ）pH 0.2M NaH2PO4ml 0.2M Na2HPO4ml5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 8

9、1.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.0名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 4 页精选学习资料 - - - - - - - - - 7.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.7名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 4 页