实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察.ppt

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1、实验一普通光学显微镜的使用及细菌三形观察 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、目的要求一、目的要求了解显微镜的构造和各部分的作用，掌握了解显微镜的构造和各部分的作用，掌握显微镜的使用方法显微镜的使用方法学习并掌握油镜的原理和使用方法学习并掌握油镜的原理和使用方法了解细菌的三种基本形态了解细菌的三种基本形态u 普通光学显微镜的基本结构普通光学显微镜的构造可分为两部分：一为机械装置，二为光学系统。机械装置由镜座、镜筒、物镜转换器、载物镜座、镜筒、物镜转换

2、器、载物台、推动器、粗动螺旋台、推动器、粗动螺旋和微动螺旋微动螺旋等部件组成。光学系统由目镜、物镜、聚光器、光源、滤目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈光片、虹彩光圈等组成 二、基本原理二、基本原理普通光学显微镜基本构造u 油镜的工作原理油镜的工作原理 滴加镜油的作用滴加镜油的作用 （1）增加照明亮度增加照明亮度 （2）增加显微镜的分辨率增加显微镜的分辨率 分辨率（最大可分辨距离）分辨率（最大可分辨距离）=/2NA 式中式中=光波波长光波波长；NA=物镜的数值孔径值物镜的数值孔径值 NA=nsin(/2)n:n:物镜和被检标本间介质的折射率物镜和被检标本间介质的折射率 ：镜口角（即入射角

3、）镜口角（即入射角）油镜，即油浸接物镜。油镜，即油浸接物镜。当光线通过玻片与镜当光线通过玻片与镜头之间的空气时，由头之间的空气时，由于空气与玻片的密度于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲不同，使光线受到曲折，发生散射，降低折，发生散射，降低了视野的照明度。若了视野的照明度。若中间的介质是一层油中间的介质是一层油（其折射率与玻片的其折射率与玻片的相近相近），则几乎不发），则几乎不发生折射，增加了视野生折射，增加了视野的进光量，从而使物的进光量，从而使物象更加清晰。象更加清晰。三、实验器材 显微镜、擦镜纸、双层瓶（香柏油、二甲显微镜、擦镜纸、双层瓶（香柏油、二甲苯）等。苯）等。细菌三型标本片（球菌

4、、杆菌、螺旋菌）细菌三型标本片（球菌、杆菌、螺旋菌）四、操作步骤四、操作步骤（一）观察前的准备（一）观察前的准备1.1.取镜和安放取镜和安放 置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为34cm。镜。镜检者姿势要端正。检者姿势要端正。2.2.光源调节光源调节 安装在镜座内的光源灯可通过调节电流或电压来获得适当的照明安装在镜座内的光源灯可通过调节电流或电压来获得适当的照明亮度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。亮度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。3.3.根据使用者个人情况，调节双目显微镜的目镜根据使用者个人情况，调节双目显微镜的目镜 双目显微镜的目镜间

5、距可以适当调节，使其与观察者两个眼睛瞳双目显微镜的目镜间距可以适当调节，使其与观察者两个眼睛瞳孔的距离相符。孔的距离相符。（二）显微观察（二）显微观察1.1.低倍镜观察低倍镜观察将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移动螺旋，使目的物处于物镜的正下方。本移动螺旋，使目的物处于物镜的正下方。调节粗调螺旋，使物镜（调节粗调螺旋，使物镜（1010）与标本靠近，眼）与标本靠近，眼睛在侧向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。睛在侧向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。张开双眼向物镜里观察，如果见到目的物，但不张开双眼向物镜里观察，如果见到目的物，但不十分清楚，可用

6、细调螺旋，至目的物清晰为止。十分清楚，可用细调螺旋，至目的物清晰为止。2.高倍镜观察高倍镜观察使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的物后将它移至视野正中处。的物后将它移至视野正中处。旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。节。（物镜的同焦现象）物镜的同焦现象）如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细调如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细调螺旋，直

7、到视野清晰。螺旋，直到视野清晰。3.3.油镜观察油镜观察先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。用粗调螺旋下降载物台。正中。用粗调螺旋下降载物台。在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，尽量贴近载玻片。节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，尽量贴近载玻片。然后再用细调螺旋微微向上调（切忌用粗调螺旋）。然后再用细调螺旋微微向上调（切忌用粗调螺旋）。油镜观察完毕，用油镜纸将镜头上的油揩净，另用擦油镜观察完毕，用油镜纸将镜头上的油揩净，另用擦镜纸蘸少许二甲苯揩拭镜头，再

8、用擦镜纸揩干。镜纸蘸少许二甲苯揩拭镜头，再用擦镜纸揩干。（应特别注意不要因在下降镜头时用力过猛，或者调焦（应特别注意不要因在下降镜头时用力过猛，或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）实验结束时实验结束时 请确保油镜头擦拭干净！请确保油镜头擦拭干净！1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。以免损坏。2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度保证光洁度3.观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用观察标本时，必须依次用低、高倍镜，最后用油镜。当目视接目

9、镜时，特别在使用油镜时，油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。镜面。4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。时，右眼注视绘图。5.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。不可单手拿，更不可倾斜拿。显微镜保养和使用中的注意事项显微镜保养和使用中的注意事项五、实验结果绘图，记录所观察到的细菌三种绘图，记录所观察到的细菌三种基本形态。基本形态。六、问题与讨论六、问题与讨论 1 1、使用高倍镜与油镜调焦时应注意、使用高倍镜与油镜调焦时应注意什么？什么？2 2、使用油镜时，在载玻片和镜头之、使用油镜时，在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？间加滴什么油？起什么作用？3 3、什么是物镜的同焦现象？它在显、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？微镜观察中有什么意义？