实验十四糖发酵试验教案.ppt

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1、实验十四糖发酵试验 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望目的要求目的要求v了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用的重要作用v掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法基本原理基本原理v糖发酵是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠糖发酵是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。道细菌的鉴定上尤为重要。v绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源

2、，但不同的细菌分解糖类物质的能力不同。但不同的细菌分解糖类物质的能力不同。v有些细菌能分解某种糖类产生有机酸和气体，有些细菌能分解某种糖类产生有机酸和气体，有些细菌只产酸而不产气。有些细菌只产酸而不产气。例如：例如：大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。v发酵培养基发酵培养基含有蛋白胨、指示剂（溴甲酚含有蛋白胨、指示剂（溴甲酚紫）、倒置德汉氏小管和不同的糖类。紫）、倒置德汉氏小管

3、和不同的糖类。v当发酵当发酵产酸产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（）变为黄色（pH5.2）。）。v气体的产生气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。气泡来证明。糖发酵试管糖发酵试管德汉氏小管德汉氏小管发酵培养基：发酵培养基：含蛋白胨、溴含蛋白胨、溴甲酚紫和糖甲酚紫和糖产酸使培产酸使培养基变黄养基变黄产酸使培产酸使培养基变黄养基变黄德汉氏小管中有德汉氏小管中有气体证明产气气体证明产气器材器材v菌种：菌种：大肠杆菌、普大肠杆菌、普通变形杆菌斜面。通变形杆菌斜面。v培养基：培养基：葡萄糖发酵葡萄糖发酵鉴定管和乳糖发酵鉴鉴

4、定管和乳糖发酵鉴定管各定管各3 3支。支。v仪器和其它用具：仪器和其它用具：酒酒精灯、接种针等。精灯、接种针等。各种细菌生化微量鉴定管各种细菌生化微量鉴定管操作步骤操作步骤v在在3 3支葡萄糖发酵鉴定管和乳糖发酵鉴定管上支葡萄糖发酵鉴定管和乳糖发酵鉴定管上分别标明大肠杆菌、普通变形杆菌和对照。分别标明大肠杆菌、普通变形杆菌和对照。v在作好标记的葡萄糖发酵鉴定管中相应接入大在作好标记的葡萄糖发酵鉴定管中相应接入大肠杆菌、普通变形杆菌，留肠杆菌、普通变形杆菌，留1 1支作对照管不接支作对照管不接菌；乳糖发酵鉴定管进行同样操作。菌；乳糖发酵鉴定管进行同样操作。v将接菌的鉴定管和对照管一起置将接菌的鉴定管和对照管一起置3737 C C培养培养242448hr.48hr.v观察各管中的颜色变化及有无气泡。观察各管中的颜色变化及有无气泡。作业作业v书书P116 P116 结果表结果表Micro-ID Enterotube微量多项试验鉴定系统微量多项试验鉴定系统