生药学实验讲解.ppt
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1、生药学实验讲解n水合氯醛刚沸就马上移开,添加水合氯醛防止蒸干。加热至粉末组织变为透明即可。待玻片稍冷再滴加稀甘油一滴,盖上盖玻片,用吸水纸纸擦干净盖玻片周围。于显微镜下观察。n(1)可见草酸钙簇晶(众多,棱角大多短钝)、淀粉粒(大多圆球形,脐点常呈星状和十字状)、网纹和具缘纹孔导管(具缘纹孔椭圆形或斜方形)。(注意观察淀粉粒时用水制临时装片)n(2)显微测量n完成不同放大倍数下显微标尺的定标 n定标n拍摄测微尺图片(拍摄时注意尽量保持测微尺水平)图片保存打开保存的测微尺图片打开保存的测微尺图片,点击工具栏上的图标点击添加按钮画线,计算实际距离(多次测量)保存入库n数据测量及标注n打开图片文件设
2、定倍数(单击工具箱中的定标)选择定标号(当前倍率改为“是”)测量 n直线测量:点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键即得直线的长度。直线测量:点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键即得直线的长度。n角度测量:当想要知道一个分析对象的角度时,单击工具栏中的,将鼠标移角度测量:当想要知道一个分析对象的角度时,单击工具栏中的,将鼠标移至分析区域,按住鼠标左键移动,在合适的位置松开,根据要测量的角度再至分析区域,按住鼠标左键移动,在合适的位置松开,根据要测量的角度再次按住左键移动鼠标,松开即得角度值。次按住左键移动鼠标,松开即得角度值。n多边形测量:将鼠标移至分析区域,点击鼠标左键确定第一点,松开后再多边
3、形测量:将鼠标移至分析区域,点击鼠标左键确定第一点,松开后再移动,到指定位置后再点击鼠标左键确定第二点,移动鼠标确定测量的范围,移动,到指定位置后再点击鼠标左键确定第二点,移动鼠标确定测量的范围,双击鼠标左键结束范围的确定,即得多边形的周长和面积。双击鼠标左键结束范围的确定,即得多边形的周长和面积。n自由线段测量:在做例如细胞分析实验时,我们要知道一个细胞的周长,线自由线段测量:在做例如细胞分析实验时,我们要知道一个细胞的周长,线段测量就不可能实现,因为它只能测量直线类的线段。自由线段测量可知道段测量就不可能实现,因为它只能测量直线类的线段。自由线段测量可知道任意线段的长度,按住左键沿要测量的
4、目标边界移动。任意线段的长度,按住左键沿要测量的目标边界移动。n三点定圆测量三点定圆测量:点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键后,再次点击鼠标:点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键后,再次点击鼠标左键获得第二点,最后再点击鼠标左键获得第三点。左键获得第二点,最后再点击鼠标左键获得第三点。n点到直线距离测量点到直线距离测量 :点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键后,再次点击:点击鼠标左键获得第一点,松开鼠标左键后,再次点击鼠标左键获得一条直线,系统将自动产生一条垂直于第一条直线的线段,点鼠标左键获得一条直线,系统将自动产生一条垂直于第一条直线的线段,点击鼠标左键得出距离。击鼠标左键得出距离。n数
5、据区:在工具条菜单中点击数据区,在系统界面的右边将显示数据区,刚数据区:在工具条菜单中点击数据区,在系统界面的右边将显示数据区,刚才所做的所有结果都被保存在这里。才所做的所有结果都被保存在这里。n(3)测定大黄粉末中簇晶和淀粉粒的直径。选最大、最小和常见的中等大小的簇晶和淀粉粒各五粒,进行测量。最后取平均值作为淀粉粒和簇晶的直径最大、最小和范围。n2.观察所列生药标本n 绵马贯众、虎杖、大黄、黄连、升麻、北豆根、延胡索、川芎、苍术、白术等n三、作业n1.绘大黄粉末组织的显微特征图。n2.记录标化的结果和簇晶、淀粉粒的直径测定结果。定标定标拍摄测微尺图片(拍摄时注意尽量保持测微尺水平)拍摄测微尺
6、图片(拍摄时注意尽量保持测微尺水平)图片保存图片保存打开打开保存的测微尺图片保存的测微尺图片打开保存的测微尺图片,点击工具栏上的图标打开保存的测微尺图片,点击工具栏上的图标 点击添加按钮点击添加按钮画线,计算实际距离(多次测量)画线,计算实际距离(多次测量)保存入库保存入库数据测量及标注数据测量及标注设定倍数(单击工具箱中的定标)设定倍数(单击工具箱中的定标)选择定标号(当前倍率改为选择定标号(当前倍率改为“是是”)打开图片文件打开图片文件测量测量 大黄簇晶大黄淀粉粒大黄网纹导管实验二实验二 生药挥发油的测定生药挥发油的测定n一、实验目的与要求n 1.掌握挥发油测定的原理。n 2.掌握生药挥发
7、油测定的两种方法。n 3.了解挥发油测定的意义。n二、原理n 含有挥发油的生药与水共同蒸馏,在低于100时,挥发油与水一起蒸馏出来,凝集于刻度管中,冷却后,油水会自动分离为两层,依据刻度可以读出样品中挥发油的含量。n论证:P总=1大气压 液体沸腾 n P总=P油(PA+PB+PC+)+P水n混合物的沸点比任一液体的沸点都低,而水的沸点为100,所以该混合物的沸点低于100。n意义:提取生药的挥发油并用于含量测定,可以评价某一含挥发油生药的品质,进而控制其质量。n三、实验仪器与装置n 仪器:挥发油测定装置 1000ml圆底烧瓶 电热套n 试剂:二甲苯 水n四、实验材料n丁香,为桃金娘科植物丁香的
8、干燥花蕾。89月花蕾由绿经黄至开始带红色时采集,去花柄,晒干或于50以下干燥。具有温中降逆,补肾助阳的功效。用于治疗脾胃虚寒、呃逆呕吐、食少吐泻、心腹冷痛、肾虚阳痿等病症。含挥发油14%21%,油中主要含丁香酚,药典中规定本品含量的挥发油不得少于16%(ml/g)丁香油为无色或淡黄色液体,具丁香的特异香气相对密度.,大于水的相对密度n五、实验方法n依据挥发油相对密度大小的不同,挥发油测定有甲、乙两法。n甲法:用于测定相对密度在.以下的挥发油。n乙法:用于测定相对密度在1.0以上的挥发油。在测定时先在测定管中加入ml与水饱和的二甲苯混溶后相对密度比水小,可以浮于水面,便于读数,而二甲苯能于水混溶
9、而不混合,并相对密度比水小n六、实验内容及步骤n采用乙法:取300 ml水与玻璃珠数粒,置1000 ml圆底烧瓶中,连接挥发油测定装置,从测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶为止,再用移液管加入二甲苯 ml,然后连接球形冷凝管,将圆底烧瓶置电热套上加热至瓶内容物沸腾,继续蒸馏,其速度以保持冷凝管中部呈冷却状态为度。30分后,停止加热,放置15分以上。读取二甲苯的容积。取丁香3.5克,称定重量(准确至0.01克)加入烧瓶中,再加入数粒玻璃珠,振摇混合后,从冷凝管中上端加水并n溢流入烧瓶时为止,开始缓缓加热至沸腾,关小火保持微沸小时,至测定器中油量不再增加为止,放置片刻,开启测定器下端的活塞
10、,将水缓缓放出,至油层上端到达刻度线或上面毫米处为止,放置小时,再开启活塞使油层下降至上端恰与刻度线平齐,读取油层量从油层量中减去二甲苯的量即为挥发油的量再计算样品中含挥发油的百分数n七、实验结果及计算n样品中挥发油的含量()n油层二甲苯100n样品的重量n结论:参照药典与之比较是否合格n八、作业:写报告,记录结果并讨论实验过程中出现的问题及体会实验三实验三 根和根茎类生药的鉴定(一)根和根茎类生药的鉴定(一)n一、实验目的与要求n 1.掌握根类生药甘草、人参的性状与显微特征。n 2.掌握临时制片的方法。n 3.熟悉双子叶植物根类生药性状及显微鉴别点。n 4.认识所列的生药标本。n二、实验内容
11、n 1.甘草解离组织片的制备:取甘草切割成火柴杆粗细的条状,按硝酸-铬酸法制备。具体:将材料置试管中,加20%硝酸与20%铬酸等量混合液适量,浸没材料为好。n室温放置30-60分钟至用玻璃棒挤压材料可以离散为止,压散,倾出混合液。材料用水洗涤后,取少许置载玻片上,用针撕开或用玻璃棒压散,以稀甘油封藏观察。观察导管、纤维和木薄壁细胞。n2.甘草的粉末制片:用水合氯醛透化法和水装片法。观察晶鞘纤维具缘纹孔导管多角形红棕色的木栓细胞淀粉粒棕色块。n3.人参根横切面组织永久装片的观察(由外向内)可见木栓层皮层韧皮部(外有裂隙,有圆形或长圆形树脂道并且内含黄色分泌物,在近形成层处排列成环)形成层环明显薄
12、壁细胞中含草酸钙簇晶、淀粉粒。n4.观察生药标本n 何首乌、怀牛膝、川牛膝、川乌、附子(黑顺片)、白芍、赤芍、白头翁、木防己、粉防己、板蓝根、黄芪、甘草、人参、远志、葛根、独活、山豆根、乌药、苦参、徐长卿、缬草、羌活n三、作业n 1.绘甘草解离组织和粉末显微特征图。n 2.绘人参根横切面简图。n 人参根横切片 n 甘草粉末图 实验四实验四 根和根茎类生药的鉴定(二)根和根茎类生药的鉴定(二)n一、实验目的与要求n 1.掌握生药黄芩、黄连、天麻和麦冬的性状和 显微特征。n 2.掌握单子叶植物根和根茎类生药的性状及显微鉴别,并与双子叶植物进行对比。n 3.认识所列的生药标本。n二、实验内容n 1.
13、黄芩粉末显微特征的观察n 韧皮纤维略黄色、梭形、壁甚厚、木化石细胞淡黄色、壁厚韧皮薄壁细胞纺锤形或长圆形,n有时壁呈连珠状增厚网纹、具缘纹孔导管木纤维细长、壁稍厚。n2.黄连粉末的显微特征观察n 鲜黄色石细胞中柱鞘纤维鲜黄色,壁厚,具单纹孔具缘纹孔导管木纤维成束,细长,壁稍薄,具纹孔鳞叶表皮细胞绿黄色或黄棕色,细胞壁微波状弯曲或呈连珠状增厚可见淀粉粒、草酸钙方晶。3.黄连的理化鉴别n(1)黄连根茎的折断面在紫外灯光下,木质部显金黄色荧光。n(2)取黄连的粉末或切片,加70%乙醇1滴,片刻后加稀盐酸或30%硝酸1滴,置显微镜下观察;可见黄色针状或针簇状结晶析出(小檗碱的盐酸盐或硝酸盐),加热结晶
14、溶解并显红色。n4.麦冬根横切面永久装片的观察n 根毛、根被内皮层外侧为一列石细胞(内壁及侧壁增厚)内皮层细胞壁均匀增厚,有通道细胞薄壁组织中的黏液细胞含针晶束髓小n5.观察生药标本n 三七、当归、柴胡、白芷、防风、北沙参、龙胆、秦艽、丹参、黄芩、地黄、玄参、天花粉、党参、桔梗、南沙参、木香、百部、麦冬、泽泻、香附、天南星、半夏、石菖蒲、川贝、浙贝母、知母、黄精、土茯苓、山药、莪术、天麻、白及。n三、作业n 1.绘黄芩、黄连粉末显微特征图。n 2.绘天麻根茎的横切面组织特征详图。n 3.记录黄连理化鉴别的方法及结果。实验五实验五 茎木类、皮类生药的鉴定茎木类、皮类生药的鉴定n一、实验目的与要求
15、n 1.掌握茎木类生药沉香、皮类生药黄柏的性状和显微特征。n 2.熟悉黄柏的理化鉴别方法。n 3.熟悉茎木类、皮类生药的性状和显微鉴别要点。n 4.认识所列的生药标本。n二、实验内容n 1.观察沉香的三切面特征n 横切面:木射线1-2列导管圆形、多角形木纤维多角形、木化木间韧皮部:扁长椭圆形或条带状n 切向纵切:木射线细胞同型性,宽1-2列细胞,高4-20个细胞木纤维细长导管多为短节导管,两端平截,内含黄棕色树脂团块n 径向纵切:木射线横向带状,细胞方形或略长方形n 2.黄柏粉末显微特征n 纤维及晶纤维较多,鲜黄色,壁极厚、木化石细胞鲜黄色,类圆形、类长方形或略呈不规则分枝状,壁极厚、层纹细密
16、,纹孔多不明显。淀粉粒单粒球形,稀复粒。黏液细胞少见。n3.黄柏的理化鉴别n 取生药黄柏粉末0.5-1g,加乙醚10ml,冷浸数分钟,浸出液水浴(30-40)挥去乙醚。残留物加冰醋酸1-2滴,浓硫酸1滴,呈棕紫色。(黄柏酮反应)n 取生药黄柏粉末水浸液1ml,加浓硫酸4滴,搅匀,沿壁加饱和氯水或溴水1ml,使成两层,接触面呈红色。(小檗碱反应)n4.观察生药标本n 关木通、沉香、钩藤、鸡血藤、厚朴、肉桂、黄柏、杜仲、牡丹皮、香加皮n三、作业n 1.绘沉香切向纵切面的组织特征详图。n 2.绘黄柏的粉末显微特征图。n 3.记录黄柏的理化鉴别方法和结果。横切面:横切面:1.1.木射线宽木射线宽1 1
17、2 2列细胞,周围的薄壁细胞因含列细胞,周围的薄壁细胞因含棕色树脂状物质形成不整齐的树脂带。棕色树脂状物质形成不整齐的树脂带。2.2.导管呈圆形、多角形,往往成群存在。导管呈圆形、多角形,往往成群存在。3.3.木纤维多角形,具单斜纹孔。木纤维多角形,具单斜纹孔。4.4.韧皮部薄壁组织含树脂状及丝状物(菌丝)。韧皮部薄壁组织含树脂状及丝状物(菌丝)。国产沉香横切面 射线导管木纤维木间韧皮部射线导管木纤维木间韧皮部 切向纵切面:1.木射线细胞同型性,12列宽,420列高。2.导管具缘纹孔,多为短节导管,具缘纹孔排列紧密,导管内含黄棕色树脂块。3.纤维细长,壁较薄,有单纹孔。4.韧皮部细胞长方形。国
18、产沉香切向纵面 径向纵切面:1.木射线排列成横向带状细胞为方形或略长方形。2.纤维径向壁上有单纹孔。国产沉香径向纵切面 川黄柏粉末:黄色或深黄色。分枝状石细胞较多,鲜黄色,形较大,壁厚层纹细密,孔沟不明显;黄色粘液细胞多个散在,壁薄,内含无定形黏液质;木栓层碎片较易察见,木栓细胞表面观呈多角形。草酸钙方晶较多,呈正方形、多面形或双锥形。筛管端壁倾斜,有复筛板。晶纤维石细胞草酸钙方晶 川黄柏横切面:1.残存的木栓层为数列长方形木栓细胞,内含棕色物质,木栓形成层明显。2.皮层狭窄,散有多数石细胞,单独或数个相聚,多为分枝状,壁甚厚,层纹明显,木化。3.韧皮部宽阔,韧皮纤维束略呈带状,断续成层排列,
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