高中生物选修一《生物技术实践》导学案(学生填空)(共37页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上6.2胡萝卜素的提取导学案山东省平度市第一中学刘贵溪学习要求了解胡萝卜素的基础知识和提取原理;学会提取胡萝卜素的技术和纸层析的操作要求。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P77“课题背景”和“基础知识”两部分,讨论并回答下列问题:1胡萝卜素在人体内可以被氧化成维生素A,因而胡萝卜素具有预防夜盲症等疾病。另外还可以用作食品、饮料、饲料的添加剂。2胡萝卜素是橘黄色晶体,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。3提取天然胡萝卜素的方法有:从植物(如胡萝卜)中提取;从养殖的岩藻(如海带、马尾藻、裙
2、带菜等)中提取;利用微生物发酵(如产氢红杆菌、工程菌等)生产。【思考1】在蒸馏法、压榨法和萃取法中,由于胡萝卜素的水溶性和挥发性差,因而不能用蒸馏法提取;由于胡萝卜素的熔点高,因而不能用压榨法提取;由于胡萝卜素易溶于石油醚等有机溶剂,因而可用萃取法提取胡萝卜素。二、实验设计【活动2】阅读教材P78【资料一】和【资料二】,讨论并回答下列问题:1有机溶剂包括水溶性有机溶剂(如乙醇、丙酮等)和水不溶性有机溶剂(如石油醚、乙酸乙酯、苯、乙醚等)。2乙醇和丙酮不能(能、不能)用于胡萝卜素的萃取。原因是萃取中乙醇和丙酮能与水混溶而影响萃取效果。3在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这五种有机溶剂中,由于
3、石油醚的沸点最高,在加热萃取时不易挥发,所以最适宜用作萃取剂。4萃取效率的主要取决于萃取剂的性质和用量,其次还受到原料颗粒大小、紧密程度、含水量;温度、时间等条件的影响。【思考2】从影响萃取效率的因素来看,应当如何控制萃取的过程条件?用石油醚作为萃取剂,用量相对多一些;原料要粉粹、干燥;萃取温度高;萃取时间长。【活动3】结合教材图66,阅读教材P78【资料三】,讨论并回答下列问题:1填写萃取法提取胡萝卜素的实验流程:2实验步骤:原料加工:取500g新鲜胡萝卜,清水清洗、沥干、粉碎、烘干。原料装填:将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。加热萃取:安装冷凝回流装置,沸水浴加热萃取30min。过滤
4、:待降温后,将萃取物进行过滤,除去固体物,得到萃取液。浓缩:安装水蒸气蒸馏装置,加热萃取液,萃取剂挥发,得到胡萝卜素粗提物。【思考3】在烘干过程中要注意什么问题?温度不能太高、时间不能太长,以防止胡萝卜素分解。三、粗提物的纯度鉴定【活动4】结合教材图68、9,阅读教材P79“结果分析与评价”,讨论并回答下列问题:1胡萝卜素粗提物的纸层析鉴定制备滤纸条:取1830cm滤纸条,于距底端2cm处划基线,取ABCD四个点。点样:用最细注射器针头分别吸取标准样品和提取样品在AD和BC点样,吹干。层析:将滤纸卷成筒状并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中层析。观察:取出滤纸条,使石油醚充分挥发后观察层
5、析带。2纸层析过程中的注意事项:滤纸条预先干燥处理,目的是有利于层析液的扩散;点样时应该快速细致、样点圆而细小,目的是有利于形成规整的色素斑点;滤纸筒的竖直边缘不能接触,以防止层析液沿着缝隙快速扩散;由于石油醚易挥发,因而层析容器要密封。【思考4】“胡萝卜素的提取和鉴定实验”与“叶绿体中色素的提取和分离实验”相比较,相同点是都用到了萃取法和纸层析法;不同点是前者的萃取温度高、纸层析时与标准样品进行了对比实验。【活动4】观看视频:观看“胡萝卜素的提取”视频,体会并学会相关技术和方法。课后学习1尝试提取植物芳香油。2基础训练册:将基础知识整理到作业本上;完成该节训练题。6.1植物芳香油的提取导学案
6、山东省平度市第一中学刘贵溪学习要求设计简易实验装置提取植物芳香油;了解提取植物芳香油的基本原理;学会玫瑰精油和橘皮精油的提取技术。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P72“基础知识”部分和栏旁资料,讨论并回答下列问题:1(记忆)天然香料的主要来源是动物和植物,另外还有微生物中的真菌。2(记忆)植物芳香油的特点是挥发性强,易溶于有机溶剂,成分复杂,以萜类化合物及其衍生物为主。3(记忆)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨、萃取等,而具体采用哪种提取方法要根据植物原料的特点来决定。4(理解)水蒸气蒸馏法原理:水蒸气可将挥发性较强
7、的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水和油分层。方法:根据原料放置位置,水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏。不足:有些原料不适宜于水蒸气蒸馏,如柑橘、柠檬等易焦糊,有效成分容易水解。5(理解)萃取法:原理:芳香油易溶于有机溶剂,有机溶剂挥发后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法:原料浸泡在溶剂中得到浸泡液有机溶剂挥发芳香油。不足:有机溶剂必须事先精制,除去其中的杂质,否则会影响芳香油的质量。二、实验设计【活动2】阅读教材P73“玫瑰精油的提取”和P75“提示(一)”,讨论并回答下列问题:1(记忆)玫瑰精油化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,能随水蒸气一同蒸馏。2(学会)填
8、写并分析下列实验流程图:采集玫瑰花:采集盛花期(5月中上旬)的玫瑰花,清水清洗沥干。装入蒸馏原料:称取50g玫瑰花放入蒸馏瓶,添加200mL蒸馏水。安装蒸馏装置:按照从左向右、自下到上的次序安装水蒸气蒸馏装置。加热蒸馏:控制蒸馏时间和速度(12滴/秒),获得乳白色乳浊液。特别注意蒸馏时间不能过短,温度不能过高。分离油层:向乳浊液加入NaCl,目的是促进油水分层,然后利用分液漏斗分离出下(上、下)层的玫瑰油。除去水分:向玫瑰油中加入无水硫酸钠,除去其中的水分,24h后过滤得到玫瑰精油。【活动3】阅读教材P74“橘皮精油的提取”和P75“提示(二)”,讨论并回答下列问题:1(记忆)橘皮精油的主要成
9、分是柠檬烯,其有效成分在用水蒸气蒸馏法提取时容易发生部分水解,使用水中蒸馏法提取时原料容易焦糊,所以一般采用压榨法提取橘皮精油。2(学会)填写并分析下列实验流程图:橘皮预处理:将新鲜橘皮用清水清洗、沥干。石灰水浸泡:用78石灰水浸泡橘皮24h,目的是防止压榨时滑脱,提高出油率,降低压榨液的黏稠度,过滤时不堵塞筛眼。清水漂洗:浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净、沥干。粉碎压榨:将橘皮粉碎,加入小苏打和硫酸钠,目的是促进油和水的分离,然后用压榨机压榨,得到压榨液。过滤压榨液:用布袋过滤,滤液再高速离心处理,分离出上(上、下)层的橘皮油。静置处理:将橘皮油在510冰箱中静置57d,目的是使果蜡等杂质沉淀
10、,用吸管吸出上层的澄清橘皮油。再次过滤:将下层的橘皮油用滤纸过滤,目的是除去其中的水分和果蜡等杂质,将滤液与吸出的上层橘皮油合并,得到橘皮精油。【活动4】观看视频:观看“植物芳香油的提取”视频,体会并学会相关技术和方法。课后学习1尝试提取植物芳香油。2基础训练册:将基础知识整理到作业本上;完成该节训练题。5.1DNA的粗提取与鉴定导学案山东省平度市第一中学刘贵溪学习要求知道DNA的粗提取与鉴定的原理;掌握并能分析DNA粗提取的技术方法和要求;学会DNA分子的鉴定方法【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P54“基础知识”,讨
11、论并回答下列问题:1(记忆)提取生物大分子的基本思路是利用它们的理化性质的不同进行分离。2(记忆)DNA的溶解性特点:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。【思考1】据图51分析:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?在0.14mol/L时溶解度最小;要使DNA溶解,需要使用什么浓度?较高浓度,可使DNA溶解;要使DNA析出,又需要使用什么浓度?0.14mol/L可使DNA析出。【思考2】利用DNA不溶于酒精的原理,可以达到将DNA和蛋白质进一步分离目的。3(记忆)DNA的耐受性特点:蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA;在6080时蛋白质变性沉淀而
12、DNA分子不变性。洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。4(记忆)DNA的鉴定原理当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用二苯胺(甲基绿)进行鉴定。在沸水浴条件下,该试剂与DNA反应,呈现(浅)蓝色。二、实验设计【活动2】阅读教材P55“实验设计”,讨论并回答下列问题:1(记忆)实验材料的选取:选取材料时应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。【思考3】你认为教材提供的材料中哺乳动物的血液不适合提取DNA。2(记忆)破碎细胞,获取含DNA的滤液:鸡血:向鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并玻棒搅拌,用纱布过滤后,收集滤液。洋葱:向研钵中加入一定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,用纱布过滤
13、后,收集滤液。【思考4】在以上实验中,蒸馏水的作用是使血细胞大量吸水而胀裂,洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,食盐的作用是溶解DNA物质。3(学会)去除滤液中的杂质:方案一:30mL滤液加NaCl使DNA溶解过滤得滤液加蒸馏水使DNA析出过滤得过滤物放到2mol/LNaCl溶液中溶解DNANaCl溶解液方案二:30mL滤液加嫩肉粉(木瓜蛋白酶)静置10分钟得DNA滤液方案三:30mL滤液6067处理过滤得DNA滤液【思考5】以上三个方案的原理分别是什么?方案一原理:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二原理:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三原理:DNA耐高温而蛋白质不耐高温。【思考6】
14、方案一中:“加NaCl使DNA溶解过滤得滤液”的目的是除去不溶(可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质;“加蒸馏水使DNA析出过滤得过滤物”的目的是除去可溶(可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质。4(记忆)DNA的析出:DNA滤液与等体积冷却酒精混合,静置一段时间后析出的白色丝状物就是DNA。5(记忆)DNA的鉴定:取2支洁净的试管,编号甲、乙,各加入等量的2mol/L NaCl溶液。甲中放入少量白色丝状物,使之溶解。在甲、乙试管中各加4mL二苯胺,混合均匀。沸水浴5min,观察颜色变化,甲试管呈现蓝色。三、操作提示【活动3】(记忆)阅读教材P56“操作提示”和P57“课题延伸”,关注下列注
15、意事项:1在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静置或离心后除去血浆,以提高细胞悬液浓度。2实验中使用塑料烧杯和尼龙布,以免DNA被吸附。3玻棒沿同一方向缓慢搅拌(细胞破裂时快速搅拌),玻棒不要碰到烧杯壁。4二苯胺试剂要现用现配。5为提高DNA纯度,实验中通常使用的洗涤剂有CTAB、SDS等。【活动4】观看视频:观看“DNA的粗提取与鉴定”视频,体会并学会相关技术方法。课后学习1尝试从植物组织中提取DNA分子。2基础训练册:将基础知识整理到作业本上;完成该节训练题。5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段导学案 山东省平度市第一中学刘贵溪学习要求尝试PCR技术的基本操作,体验PCR技术的分子生物学实验方
16、法;理解PCR技术的原理;讨论PCR技术的应用【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P58“PCR原理”,讨论并回答下列问题:1(记忆)PCR技术扩增DNA的过程与细胞内的DNA复制过程类似。【思考1】填写下表:(记忆)细胞内DNA复制条件分析条件参与的组分在DNA分子复制中的作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核苷酸合成DNA子链的原料酶解旋酶打开DNA双螺旋RNA聚合酶合成RNA引物DNA聚合酶催化合成DNA子链;切除引物DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来能量ATP为解螺旋和合成子链提供能量引物RNA
17、为DNA聚合酶提供合成的3端起点2(理解)细胞内DNA的复制(1)DNA的结构:脱氧核苷酸分子通过3,5磷酸二酯键连接形成核苷酸长链,两条脱氧核苷酸长链反向平行排列并螺旋化,形成DNA双螺旋结构。(2)DNA的复制:首先,在解旋酶的作用下,由ATP供能,DNA发生解旋形成两条DNA单链。其次,在DNA单链的3端,在RNA聚合酶在作用下,合成RNA引物。再次,在DNA聚合酶的作用下,从引物的3端开始合成DNA子链。最后,DNA聚合酶将引物切去,并合成空缺处DNA单链,再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来。3(记忆)DNA分子复制的人工控制解开螺旋:在80100时,DNA双螺旋打开,形成两
18、条DNA单链,称为变性。恢复螺旋:在5060左右时,两条DNA单链重新形成双螺旋结构,称为复性。复制条件:缓冲液,DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。控制仪器:PCR仪(温度周期性自动调节仪)。【思考2】缓冲液相当细胞内的什么成分?核液。【活动2】阅读教材P59“PCR的反应过程”,讨论并回答下列问题:1(记忆)填写PCR反应流程:2(理解)PCR反应过程是:在升温至90以上时DNA解旋;在降温至50左右时引物与DNA单链结合;在升温至72左右时合成DNA子链。二、实验操作【活动3】阅读教材P62“实验操作”,讨论并回答下列问题:1(记忆)在PCR反应体系的配方中,含有的
19、成分有缓冲液、DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物、水。2(了解)实验操作步骤:按照PCR反应体系配方配制反应液;将PCR反应体系50L用微量移液器转移到微量离心管(0.5mL)中;将微量离心管放到PCR仪中;设置PCR仪的工作参数;DNA在PCR仪中大量扩增。3(了解)水浴法:将微型离心管依次在95、55、72恒温水浴锅中循环处理。三、操作提示【活动4】阅读教材P62“操作提示”,讨论并回答下列问题:1(记忆)避免外源DNA污染,所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。2(记忆)将缓冲液和酶分装成小份,20低温保存。3(记忆)每添加一种反应成分,更换一个移液器枪头
20、。4(记忆)混匀后离心处理,使反应液集中在离心管底部。四、结果分析与评价【活动4】阅读教材P63“结果分析与评价”,讨论并回答下列问题:1(记忆)反应液稀释:取2?LPCR反应液,添加98?L蒸馏水。2(记忆)分光光度计调零:将100?L蒸馏水添加到比色杯中,在260nm处将分光光度计读数调节为零。3(记忆)将100?L反应稀释液倒入比色杯中,测定在260nm处的光吸收值。4(记忆)DNA含量计算:DNA含量(?g)50光吸收值稀释倍数。【活动4】观看视频:观看“多聚酶链式反应扩增DNA片段”视频,学会相关技术方法。课后学习1尝试从植物组织中提取DNA分子。2基础训练册:将基础知识整理到作业本
21、上;完成该节训练题。5.3血红蛋白的提取与分离导学案 山东省平度市第一中学刘贵溪学习要求理解凝胶色谱法、电泳法的基本原理,了解缓冲液的组成及其作用;掌握血红蛋白的提取与分离的基本过程和方法。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P64第1自然段和“凝胶色谱法”部分,讨论并回答下列问题:1(理解)提取和分离蛋白质的原理:利用蛋白质的各种理化特性(如形状、大小、电荷性质和电量、溶解度、吸附性和亲和力等)的差异,将不同的蛋白质分离开来。2(记忆)凝胶色谱法是根据相对分子量的大小分离蛋白质的一种有效方法。3(理解)凝胶大多数是由多糖
22、化合物(如葡聚糖、琼脂糖等)构成的微小多孔球体。当相对分子量不同的蛋白质分子通过凝胶时,相对分子量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;相反,相对分子量较大的蛋白质在凝胶颗粒外部移动,路程较短,移动速度较快。【活动2】阅读教材P65 “缓冲溶液”部分,讨论并回答下列问题:1(理解)在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,而保持pH基本不变。2(记忆)缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水配制而成。调节缓冲剂的使用比例可以制成在不同pH范围内使用的缓冲液。【思考1】维持人体血液pH稳态的缓冲对有H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4。【活动3】
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