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1、专题强化练1(2019广东汕头质检)某转基因牛的破费 技能 流程如图。请据图回答以下征询 题:(1)运用进程 的办法构建的基因文库是_(填“基因组文库或“局部基因文库);PCR技能 需在肯定 的_中停顿;PCR扩增进程 经过变性、复性跟 _三个步伐 。(2)转入生长 激素基因的牛可经过乳腺细胞分泌 乳汁来破费 人生长 激素,进程 中,将目的 基因与_的启动子等调控组件重组在一同 构建重组质粒,经过_技能 将其导入受精卵中,然后 运用胚胎工程的_(答出2项)技能 手段取得转基因牛。(3)该转基因牛进入泌乳期后,其分泌 的乳汁中并未含有人的生长 激素,能够 的缘故是_。答案 (1)局部基因文库缓冲
2、溶液 延伸 (2)乳腺蛋白 基因显微注射 晚期胚胎培育 、胚胎移植(3)目的 基因未成功 导入或导入的目的 基因未能精确表达 剖析 (1)题图表示 生长 激素基因是经过以mRNA为模板反转录形成 的,故经过进程 构建的为局部基因文库。PCR技能 需求 在肯定 的缓冲溶液中停顿;运用PCR扩增目的 基因的进程 由高温变性(9095 )、高温复性(5560 )、适温延伸 (7075 )三个步伐 形成 一个循环 。(2)进程 为基因表达 载体的构建,假定 要人的生长 激素基因在牛的乳腺细胞中表达 并随乳汁分泌 出来,需求 将人的生长 激素基因与乳腺蛋白 基因的启动子等调控组件重组在一同 构建重组质粒
3、。将目的 基因导入植物 细胞常用显微注射 技能 。将导入目的 基因的受精卵在体外运用晚期胚胎培育 技能 培育 形成 晚期胚胎,并运用胚胎移植技能 将晚期胚胎移入母牛体内孕育成转基因团体。(3)由于 构建基因表达 载体时载体不用定 跟 目的 基因结合 ,以及在结合 目的 基因时能够 与载体停顿了反向结合 ,因而 虽然在导入目的 基因后检测到了受体细胞中含有载体,但如此 的受体细胞中并不会形成 目的 基因的产物 。综上剖析,假定 该转基因牛进入泌乳期后,其分泌 的乳汁中并未含有人的生长 激素,能够 的缘故是目的 基因未成功 导入或导入的目的 基因未能精确表达 。2(2019广西梧州2月联考)某竹芋
4、科植物 果实中含有一种甜蛋白 ,其甜度为蔗糖的三千倍,是梦想 的甜味剂。为了改进 黄瓜的质量 ,迷信家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白 基因成功 导入黄瓜细胞,失落 失落 落 了转基因植株。回答以下征询 题:(1)为猎取 甜蛋白 基因,可从竹芋科植物 的细胞中提取对应mRNA,在_酶的感染 下剖析 双链cDNA片段 ,取得的cDNA片段 与竹芋科植物 中该基因碱基序列_(填“一样或“差异 )。(2)用农杆菌感染 时,应优先选用黄瓜_(填“受伤的或“完好的)叶片与含重组质粒的农杆菌共同 培育 ,选用这种叶片的因由 是_。(3)目的 基因进入受体细胞,同时在受体细胞内坚持 坚定跟 表达 的进程 ,称为
5、_。经测定,甜蛋白 基因导入了黄瓜细胞的一条染色体上并成功 表达 ,该转基因植株自交发作 的F1中,存在 甜蛋白 的植株占总数的_。(4)运用外植体停顿结构 培育 时,_跟 _的比例对愈伤结构 的形成 跟 生长 存在 要紧 阻碍 。答案 (1)逆转录差异 (2)受伤的叶片伤口处的细胞释放 出大年夜 批酚类物质 ,可吸引农杆菌移向这些细胞(3)转化3/4(4) 生长 素细胞分裂 素剖析 (1)以mRNA为模板剖析 双链DNA的进程 为反转录,需求 逆转录酶的催化;由于 DNA转录形成 mRNA的进程 中,非编码序列不转录,因而 该进程 取得的cDNA片段 与竹芋科植物 中该基因碱基序列差异 。(
6、2)由于 叶片伤口处的细胞释放 出大年夜 批酚类物质 ,可吸引农杆菌移向这些细胞,因而 用农杆菌感染 时,应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同 培育 。(3)基因工程把持 中将目的 基因导入受体细胞,并在受体细胞内坚持 坚定跟 表达 的进程 称为转化。依照题意剖析,甜蛋白 基因导入了黄瓜细胞的一条染色体上并成功 表达 ,此黄瓜细胞能够 看作是一个显性杂合子Aa,其假定 停顿自交,那么后代 中表示 为甜蛋白 的植株占总数的3/4。(4)生长 素与细胞分裂 素的比例对愈伤结构 的形成 跟 生长 存在 要紧 阻碍 。3(2019辽宁葫芦岛一模)频年 来,生物工程运用 分子生物学的最新成果
7、 ,展开 出一系列的技能 ,能够 为人类安康 、破费 、生活 等供应 效力 。运用 所学知识 回答以下征询 题:(1)迷信家为了树破 破费 干扰素的乳腺生物反响 器,运用基因工程技能 ,构建含有启动子、目的 基因、停顿 子、复制原点跟 _的基因表达 载体,普通经过_技能 导入哺乳植物 的_中,然后 再将它送入母体内,最终 发育成能破费 干扰素的转基因哺乳植物 。(2)单克隆抗体存在 特异性强、_、能够 大年夜 批制备等优点 。制备单克隆抗体有两个要紧 的理论基础:一是在植物 免疫反响 的进程 中每一个B淋巴细胞_;二是小鼠骨髓瘤细胞能够 _。(3)在胚胎工程中,经过对供体母羊注射 _,促使其超
8、数排卵,从而取得大年夜 批羊的卵母细胞。答案 (1)标志 基因显微注射 受精卵(2)灵敏 度高只分泌 一种特异性抗体有限增殖(3)促性腺激素剖析 (1)一个基因表达 载体的形成 ,除了目的 基因外,还必需 有启动子、停顿 子以及标志 基因等。由于 受精卵发育的全能 性最高,因而 常采用显微注射 技能 将目的 基因导入哺乳植物 的受精卵中。(2)单克隆抗体存在 特异性强、灵敏 度高、能够 大年夜 批制备等优点 。制备单克隆抗体有两个要紧 的理论基础:一是在植物 免疫反响 的进程 中每一个B淋巴细胞只分泌 一种特异性抗体;二是小鼠骨髓瘤细胞能够 有限增殖。(3)在胚胎工程中,经过对供体母羊注射 促
9、性腺激素,促使其超数排卵,从而取得大年夜 批羊的卵母细胞。4(2019河南洛阳二模)草莓养分价值 高且有保健成效 ,但却随便 遭到 病毒的感染 。迷信家常采用两种办法培育 新种类:其一,培育 无病毒组培苗;其二,将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白 基因(SMYELVCP)导入草莓基因组中,培育 出转基因抗病香花 莓。请剖析回答以下征询 题:(1)假定 培育 无病毒组培苗,素日 取植株的_停顿结构 培育 。(2)运用PCR技能 扩增目的 基因 SMYELVCP,依照 _原那么。(3)重组载体上应含有特定的_(填“复制原点“启动子或“标志 基因),它能被受体细胞的_所识不,以便于催化转录进程 。为检测目
10、的 基因能否 转录出mRNA,常采用分子杂交技能 ,该技能 的详细 做法是_。(4)草莓根系散布浅,蒸腾量大年夜 ,对水分恳求 严格 。我国东南一些地域 曾大年夜 批种植 草莓,但由于 落雨量少,致使 非常多 地点 的草莓长势不佳 ,其失落 败的缘故要紧是违犯 了_情理 。答案 (1)分生结构 (茎尖、根尖)(2)碱基互补配对(3)启动子RNA聚合酶从转基因生物中提取mRNA,用标志 的目的 基因作探针与mRNA杂交。假定 表示 出杂交带,那么阐明目的 基因转录出了mRNA(4)调跟 与均衡剖析 (1)植物 的茎尖或根尖中分 生结构 细胞简直不含病毒,因而培育 无病毒组培苗素日 采用植株茎尖或
11、根尖中分 生结构 停顿结构 培育 。(2)运用PCR技能 扩增目的 基因依照 碱基互补配对原那么。(3)为保证 目的 基因的表达 ,重组载体上应含有特定的启动子,它能被受体细胞的RNA聚合酶所识不,以便于催化转录进程 。为检测目的 基因能否 转录出mRNA,常采用分子杂交技能 ,该技能 的详细 做法是从转基因生物中提取mRNA,用标志 的目的 基因作探针与mRNA杂交。假定 表示 出杂交带,那么阐明目的 基因转录出了mRNA。(4)我国东南一些地域 曾大年夜 批种植 草莓,但由于 落雨量少,致使 非常多 地点 的草莓长势不佳 ,其失落 败的缘故要紧是不 思索 生物与状况 相习惯 ,违犯 了生态
12、工程依照 的调跟 与均衡情理 。5(2019宁夏银川质检)以以以下图表示 我国首例绿色荧光蛋白 转基因克隆猪的详细 培育 进程 。请据图回答以下征询 题:(1)进程 A欲取得大年夜 批绿色荧光蛋白 基因可运用PCR技能 扩增,其全然 情理 是_,延伸 进程 中需求 运用 _酶。(2)进程 C处置 所用的酶是_,处置 的目的 是_。(3)进程 G中细胞的总体积_。进程 H的称号 是_。晚期胚胎移入代孕母猪的子宫后,能成活并生长 的心思 学基础是_。答案 (1)DNA双链复制热坚定DNA聚合(Taq)(2)胰蛋白 酶(或胶原蛋白 酶)将结构 分散 成单个细胞(3)波动 或略有添加 胚胎移植受体子宫
13、对外来胚胎全然 上不发作 免疫排挤剖析 (1)PCR又称多聚酶链式反响 ,情理 是DNA双链的复制,所需的酶是耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)。(2)C表示 用胰蛋白 酶或胶原蛋白 酶处置 猪胚胎,将结构 分散 成单个细胞的进程 。(3)进程 G晚期胚胎培育 进程 中,随细胞分裂 的停顿,细胞数量 添加 ,但细胞总体积波动 或略有添加 。晚期胚胎移入代孕母猪的子宫后,能成活并生长 的心思 学基础是受体子宫对外来胚胎全然 不发作 免疫排挤。6(2019河南洛阳模仿)依照材料回答以下征询 题:材料一:PCR(多聚酶链式反响 )三个全然 反响 步伐 是模板DNA在体外加热至9095 时解旋成单链,温
14、度落至55 左右 ,引物与模板单链按碱基互补配对的原那么结合 ,再调至72 左右 时,DNA聚合酶沿53(磷酸到五碳糖)的倾向 延伸 引物剖析 互补链。三个步伐 完成 一次称为一个循环 。材料二:图甲表示 了目的 基因及其上的限制 酶切点,A、B、C、D是四种单链DNA片段 ;图乙是质粒(表示 限制 酶切点跟 标志 基因),普通来说,为了使切割后的目的 基因与载体结合 ,屡屡 运用 两种限制 酶,同时还要毁坏载体上的一个标志 基因。(1)假定 运用PCR技能 扩增目的 基因,由图甲可知,A、B、C、D四种单链DNA片段 中应拔取 _作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环 后会发作 DN
15、A片段 _个。(2)为了提高目的 基因跟 质粒的重组成功 率,同时有利于受体细胞的选择 ,该当 选择 的限制 酶是_。假定 用限制 酶Pst、EcoR跟 Hind 对质 粒停顿切割,假定 同时只要 恣意 两个位点被切割且每次时机 相当 ,那么形成 的含有完好抗四环素基因的DNA片段 有_种。(3)将目的 基因导入植物 细胞采用最多的办法是_。(4)以下对基因组文库的描画 ,不精确 的选项是_。A含有某种生物的全体 基因B基因中含有启动子跟 内含子C文库的基因是经过受体菌承载的D文库中的全体 基因能够 在物种间交流 答案 (1)B跟 C16(2)Pst跟 EcoR1(3)农杆菌转化法(4)D剖析
16、 (1)运用PCR技能 扩增目的 基因时,DNA复制需求 引物,当引物与DNA母链经过碱基互补配对结合 后,DNA剖析 总是 从子链的5端向3端延伸 ,DNA聚合酶就能从引物的3端开场延伸 DNA链,因而应选用B、C单链DNA片段 作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环 后会发作 DNA片段 共2416(个)。(2)为了提高目的 基因跟 质粒的重组成功 率,同时有利于受体细胞的选择 ,普通选用双酶切法,且选用的限制 酶不克不迭 毁坏目的 基因,假定 选用限制 酶EcoR 跟 Hind ,那么载体上的两个标志 基因都会 被毁坏,因而该当 选用的限制 酶是Pst 跟 EcoR 。假定 用限
17、制 酶Pst 、EcoR 跟 Hind 对质 粒停顿切割,假定 同时只要 恣意 两个位点被切割且每次时机 相当 ,那么只要 Pst 跟 EcoR 切割后会形成 含有完好抗四环素基因的DNA片段 。(3)常采用农杆菌转化法将目的 基因导入植物 细胞。(4)基因组文库的确是把某种生物基因组的全体 遗传信息经过克隆载体储存在一个受体菌克隆子群体中;基因组文库含有某种生物的全体 基因,基因中含有启动子跟 内含子,只要 局部基因能够 在物种间交流 。7乳糖不耐受症是由于 乳糖酶(LCT)分泌 少,不克不迭 完好 消化剖析 母乳或牛乳中的乳糖所惹起 的非感染 性腹泻。科研任务 者运用生物技能 培育 出转基
18、因低乳糖奶牛新种类,给乳糖不耐受症患者带来福音。图甲为转基因低乳糖奶牛培育 流程,图乙是运用 限制 酶BamH切割DNA分子发作 的结果。请据图剖析回答以下征询 题:(1)图甲培育 进程 触及 的生物技能 有_(至多写出三项),重组质粒T导入牛胎儿成纤维细胞的办法是_,晚期胚胎植入代孕母牛子宫的时期 是_。(2)图甲中的牛胎儿成纤维细胞无法 单刀直入 发育成团体,需求 运用去核卵母细胞构建重组细胞才干培育 出新团体,其依照的情理 是_存在 全能 性。(3)据图乙剖析,BamH的识不序列以及切割位点(用“表示 )是_。(4)图甲中,切割质粒S用的酶是_,切割后形成 1.8 kb跟 8.2 kb(
19、1 kb1 000对碱基)两种片段 。假定 用BamH跟 EcoR两种酶切割重组质粒T,取得1.6 kb跟 8.8 kb两种片段 ,那么转入的LCT基因长度为_ kb。(5)在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中,可检测到的物质 有_。ALCT基因BLCTmRNACLCT答案 (1)基因工程、核移植、植物 细胞培育 、晚期胚胎培育 、胚胎移植(写出三项即可)显微注射 技能 桑椹胚或囊胚(2)植物 细胞核(3) (4)BamH跟 Hind2.2(5)ABC8长江的水体污染要紧是由于 流入长江的次级河流 在流经城镇时,城镇中的生活 污水、工业 废水大年夜 批排入而形成 的。某小组运用人工浮床技能 对次级河
20、流 中的水质停顿污染剖析,实验 安装如以以以下图。请据图回答以下征询 题:(1)图中植物 的感染 是_。该植物 采收后,可单调 处置 用来提取_等金属。(2)此案例属于_生态工程的实例,它依照 的生态工程情理 是_(写出一个即可)。(3)该小组运用人工浮床展开 了“茭白跟 菖蒲对生活 污水污染结果 的研讨 ,你以为 该研讨 所用的实验 安装应至多设置_组,应采用 的处置 办法 是_。(4)为了避免实验 倾向 ,你以为 每个实验 安装中的植物 株数应_。(5)该工程能无效避免“水华发作 ,提高水体的通明度。其缘故是_。答案 (1)接纳 水中的化学元素铜、锌、汞(2)都会 状况 调跟 与均衡情理
21、、全体 性情理 、物质 循环 再生情理 等 (3)4一组只栽茭白,一组只栽菖蒲,一组混栽等量的茭白跟 菖蒲,一组不栽植物 (4)相当 且尽管 多(5)一方面浮床植物 在生长进程中能运用水中的氮、磷污染物,添加 藻类生长 所需的无机盐;另一方面又能经过遮光感染 来抑制 水体中藻类的生长 繁衍 剖析 (1)浮床植物 在生长进程中能运用水中的氮、磷污染物,接纳 水中的金属离子,因而将该植物 单调 处置 后可用来提取铜、锌、汞等金属。(2)人类对都会 生活 污水的管理 运用 了生态工程的调跟 与均衡情理 、全体 性情理 、物质 循环 再生情理 等。(3)依照比照 原那么,应至多设置4组安装,一组只栽茭白,一组只栽菖蒲,一组混栽等量的茭白跟 菖蒲,一组不栽植物 作空白 比照 。(4)为了避免实验 倾向 ,每个实验 安装中的植物 株数应相当 且尽管 多。(5)提高水体的通明度,即抑制 水中藻类的生长 ,可从添加 水中矿质元素含量跟 削弱藻类植物 的光协作 用两方面思索 。
限制150内