2022年分子生物学期末重点.docx
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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 一绪论学习必备欢迎下载广义的分子生物学:对生物大分子结构和功能的讨论;生物大分子:蛋白质,核酸,多糖以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信 息传递中的作用为讨论对象, 从分子水平阐明生命现象和生物学规律;狭义的分子生物学:偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要讨论基因或 DNA 的复制、转录、表达和调控等过程,也涉及与这些过程相 关的蛋白质和酶的结构与功能的讨论;1972 年第一个重组 DNA 分子在试验室制造胜利;1982 年世界上第一个基因重组产品人胰岛素问世;20XX 年人类基因组方案( HGP)序列图完成;二.基因的结构与
2、功能基因现代分子学概念:基因是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是 RNA和蛋白质相关遗传信息的基本存在形式,是指贮存 RNA序列信息和有功能的蛋白质多肽链序列信息、以及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列 ;大部分生物中构成基因的核酸物质是DNA,少数生物(如RNA病毒)中是 RNA;基因现代生物学概念: 基因打算遗传性状的表达, 基因存在于染色体及线粒体 DNA上,呈直线排列并世代相传;名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载基因的化学本质是 DNA(RNA病毒除外);一个基因是 DNA分子中具有特定
3、核苷酸排列次序的一个区段;结构基因序列:表达为蛋白质或功能 RNA 每个基因携带的遗传信息 调控序列:表达结构基因(合成 RNA)脱氧核糖核酸 基本组成单位核酸 核糖核酸 核苷酸DNA是由四种脱氧核糖核苷酸通过 链大分子;3,5- 磷酸二酯键连接而成的长RNA是由四种核糖核苷酸通过 3,5- 磷酸二酯键相连而成的多核苷酸长链;前一位 -OH 下一位磷酸基DNA结构 一级结构:分子中的核苷酸排列次序二级结构:双链反向互补的右手螺旋三级结构:超螺旋结构 高级结构一级结构组成:碱基,磷酸,脱氧核糖有严格的方向性 二级结构:书写方式 5 3 1. Chargaff 规章:摩尔数: A=T C=G 不同
4、生物种属的 DNA 碱基组成不同同一个体不同器官,组织的 2. DNA 是反向平行的互补双链结构:DNA 具有相同碱基组成 a.碱基位于双螺旋内侧b.亲水的脱氧核糖和磷酸骨架位于外侧 c.两条链碱基间氢键结合:A-T 2 C-G 3(较稳固)碱基互补Watson-crick 配对 bp,kbp 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备欢迎下载10 个核苷酸表面有一个大3. 右手双螺旋:沿中心轴每旋转一周有沟和一个小沟(碱基对占据空间不对称所致)螺距 3.4nm 4. 疏水性碱基积累力和氢键是 横向稳固 氢键DNA
5、双螺旋结构的稳固力纵向稳固 碱基平面的积累力(更重要)螺旋内部碱基平面重叠靠近产生的疏水作用5. 双螺旋结构具有多样性:附加氢键Hoogsteen配对 B-DNA 三级结构(致密结构) :超螺旋 a.正超螺旋:盘绕方向与双螺旋相同b.负超螺旋(自然界闭合双链DNA主要存在形式,有利于转录起始)1. 绝大部分原核生物的 DNA 都是共价封闭的环状双螺旋分子原核生物 DNA在细胞内进一步盘绕形成类核 80%DNA 20%蛋白质细菌基因组中 超螺旋可相互独立形成超螺旋区大肠杆菌 平均 200个碱基就有一个负超螺旋形成2. 真核生物 DNA在细胞核内可组装成染色体真核生物 DNA与蛋白质的复合物以致密
6、形式存在于核内 基本结构单位 核小体 DNA 组蛋白(小分子量碱性富含精八聚体核心组蛋白 赖):H1 H2A H2B H3 H4 双链 DNA缠绕于核心组蛋白上形成核小体的 核心颗粒 核心颗粒间由 DNA和组蛋白 H1 构成的连接区相连形成串珠样结构名师归纳总结 细胞周期大部分时间分散存在的染色质非组蛋白)第 3 页,共 42 页细胞分裂期高度组织有序的 染色体 DNA 蛋白质(组蛋白- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 真核生物染色体功能区学习必备欢迎下载染色a.端粒 染色体末端膨大的粒状结构体末端 DNA(端粒 DNA 简洁重复序列)和 DNA结合蛋白
7、 人TTAGGG端粒在爱护染色体结构的稳固与爱护复制过程中 DNA 的完整性方面有重要作用,仍与衰老与肿瘤的发生进展有关 的连接位点b.着丝粒两个染色单体基因的功能: a.荷载遗传信息 b.通过复制,将遗传信息遗传给子代 c.基因表达的模板基因组构:单个基因的组成结构及个体内的基因组织排列方式mRNA的非翻译区: 为蛋白质编码的结构基因 (断裂基因) 中除含有一段储存着一个特定多肽链的一级结构信息外,仍存在一些与多肽链编码无关的 必需的调控序列DNA序列,这些序列是多肽链翻译和加工的所名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - -
8、- 学习必备 欢迎下载内含子数 = 外显子数 -1 外显子数是描述基因结构的重要特点之一外显子和内含子同时显现于最初合成 接mRNA 前体中,在合成后被剪高等真核生物内绝大部分编码蛋白质的结构基因都有内含子(组蛋白编码基因除外);原核生物的结构基因基本没有内含子;不同生物结构基因特点断裂 连续 病毒取决于宿主顺式调剂:一个基因的调控区和结构基因位于同一个 DNA 分子中的相邻部位顺式作用元件: 与转录调控有关的 加尾信号和一些反应元件;DNA 序列,包括启动子、 增强子、反式调剂: 由某一基因表达产生的蛋白质因子,对另一个基因的表达有调控作用反式作用因子:是通过直接结合或间接作用于DNA,对基
9、因表达发挥不同作用(激活或抑制)的各类蛋白因子 阻遏蛋白 5端 上游 负 3端 下游 正 零不用于标记碱基位置原核生物基因的调控序列:启动子和转录终止信号(最基本)1. 启动子供应转录起始信号(本身不被转录)RNA 聚合酶特异识别和结合的DNA 序列,具有方向性,一般位于结构基因转录起点的上游大肠杆菌功能区: a.RNA 合成起点( +1 位碱基) b.RNA 聚合酶结 合部位( -10bp 区) 普里布诺盒 TATAAT c.转录起始识别部位(-35bp 区) TGACA 名师归纳总结 原核生物:强启动子弱启动子第 5 页,共 42 页- - - - - - -精选学习资料 - - - -
10、- - - - - 学习必备 欢迎下载启动子序列越接近共有序列,起始转录的作用越强;反之2. 终止子供应 RNA 合成终止信号在结构基因下游接近3端的一段 DNA 序列中由 GC富集区组成的具有回文特点的重复序列;转录后在 RNA 分子中形成特别的茎环结构以终止 RNA 链的延长;3. 操纵元件被阻遏蛋白识别与结合操纵元件(操纵序列)是一些启动子邻近部位的一小段特定序列,可被具有抑制转录作用的阻遏蛋白识别并结合;分重叠通常与启动子区域有部4. 正调控蛋白结合位点可加强下游结构基因的转录在原核基因的弱启动子邻近常有一些特别的DNA 序列,某些具有转录激活作用的正调控蛋白可以识别并结合这种 DNA
11、 序列,加快转录的启动;真核生物基因的调控序列其顺式作用元件:启动子、上游调控元件、增强子、加尾信号和一些细胞信号反应元件1. 启动子供应转录起始信号通常本身不被转录,有一些启动子(如编码 列可位于转录起始点的下游,可被转录tRNA 基因的启动子)的 DNA 序启动子 II 最为复杂,和原核的启动子有很多不同;TATA 盒位于转录起始点上游 合成的起始位点-25bp 处,核心序列是 TATA,打算 RNA名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载上游启动子:a.TATA 盒上游的一些特定DNA 序列 b.
12、与 TATA 盒共同组成启动子 c.是反式作用因子(转录激活因子)的识别与结合的位点 d.打算转录的效率常见: a.CAAT 盒 含有 5GGNCAATCT3核心序列-80-90bp b.GC 盒 含有 5CCGCC3核心序列-70bp 和-120bp RNA 聚合酶转录因子启动子类型启动子构成含有该启动子的基因I TF I I 核心元件、上rRNA 游调控元件(UCE)II TF II II TATA 盒、几个mRNA 上游启动子元件、转录起始位点III TF III III A 盒和 B 盒、tRNA 转录起始点5S rRNA U6 snRNA 真核生物 RNA 聚合酶及其对应的转录因子和
13、启动子类型2. 增强子增强邻近基因的转录增强子是增强真核生物基因启动子的工作效率的顺式作用元件,是真核生物基因中最重要的调控序列, 打算每一个基因在细胞内的表达水平;位置:不固定一般位于转录起始点上游-100-300bp处3. 缄默子是负性调剂元件缄默子是可抑制基因转录的特定序列,当其结合一些反式作用因子(转录抑制因子)时对基因的转录起阻遏作用,使基因缄默;反应元件:是一类能介导基因对细胞外的某种信号产生反应的特定DNA 序列特点:a.具有较短的保守序列 子内或增强子区域b.通常位于启动子邻近、 启动名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 42 页精选学习资料 - - - -
14、- - - - - 学习必备 欢迎下载PolyA信号:a.结构基因 3端下游b.由 AATAAA序列和 GC丰富区,或 T 丰富区组成 c.终止 mRNA 转录和为其加上 PolyA 尾PolyA尾: a.可能有助 mRNA 从核到细胞质转运 到核酶降解,增强 mRNA 的稳固性原核生物基因的基本结构 5启动序列结构基因终止子 3真核生物基因的基本结构b.防止在细胞中受5增强子 + 上游启动子元件(启动子)+ 结构基因(断裂基因)+ 加尾信号 + 转录终止点 3RNA的结构与功能:mRNA:1.真核生物和原核生物的mRNA 中都有编码区和非翻译区mRNA 中间的一部分序列是一个特定多肽链的序列
15、信息,这一段核苷酸序列称为多肽链编码区或开放阅读框 的一级结构ORF ORF 打算多肽链分子非翻译区又称非编码区 UTR:ORF 的 5端上游和 3端下游 主要功能:参与翻译调控2.真核生物 mRNA 特有的 5末端的帽结构大部分真核生细胞的mRNA 的 5末端以 7-甲基鸟嘌呤 -三磷酸鸟苷名师归纳总结 为起始结构,这种GpppN-结构被称为帽结构帽结构可以与帽结合第 8 页,共 42 页蛋白CBPs结合 功能: a.有助于 mRNA 从细胞核向细胞质的转运b.- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载爱护 mRNA 的稳固,不被降解 结合
16、;c.翻译起始时,与起始因子和核糖体3.真核生物 mRNA 的 3末端有多聚 A 尾结构 转录完成后加入 在真核生物 mRNA 的 3 末端,大多数有一段由数十个至百余个腺苷酸连接而成的多聚腺苷酸结构,称为多聚 结构负责 mRNA 从细胞核向细胞质的转运译起始调控A 尾 polyA 功能:a.与帽 b.爱护 mRNA 的稳固 c.翻去除 polyA 尾和帽结构是细胞内 mRNA 降解的重要步骤;tRNA:a.氨基酸接纳茎 tRNA3末端最终 3 个碱基,氨基酸结合部位 Tyr-tRN代表 tRN的氨基酸接纳茎已经结合有酪氨酸b.反密码环 含反密码子 c.稀有碱基:双氢尿嘧啶 DHU 假尿嘧啶
17、甲基化的嘌呤 ,位于两侧的环状结构: DHU环和 TC环rRNA:细胞中含量最多的RNA,是核糖体的主要组成成分,构成核糖体的骨架 核糖体(核糖核蛋白体)小分子 RNA,又称非 mRNA小 RNAsnmRNA 分类snRNA snoRNA scRNA miRNA、siRNA、antisenseRNA 作用真核细胞rRNA的加工蛋白质翻译RNA前体中合成后的转以及核糖体的装配运的内含子的剪接名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载核酸酶:指全部可以水解核酸的酶 a.DNA 酶 b.RNA酶有的核酸酶可以在
18、 DNA或 RNA分子内部切断磷酸二酯键, 称为核酸内切酶;在核酸内切酶中,有的要求序列特异性4-8bp ,称为限制性核酸内切酶 RE;有的没有序列特异性, 称为非限制性核酸内切酶;核酸外切酶仅能水解位于核酸分子链末端的核苷酸;依据其作用的 方向性,又有 53或 35核酸外切酶之分;功能:生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解;1. 参与 DNA的合成与修复、 RNA合成后的剪接 2. 清除余外的、结构和功能反常的核酸,同时也可以清除侵入细胞 的外源性核酸 3. 体外重组 DNA技术中的重要工具酶 4. 消化液中降解食物内的核酸加以利用核酶是一类具有催化作用的RNA,其底物亦是核酸,因此从
19、功能上来说,也属于核酸内切酶,且为序列特异性的核酸内切酶;基因组的结构与功能基因组:细胞或生物体中, 一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组; 基因组结构:指不同的基因功能区域在核酸分子中的分布和排列情形;功能:储存和表达遗传信息;进化程度越高的生物其基因组越复杂;人基因组:1. 只有不到三万种基因 (只有很少一部分DNA序列编码蛋白质)3. 存在大量重复序列: (高度重复、中度重复、低度重复也称单拷贝)名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 42 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载高度重复序列: a. 反向重复序列: 由两个相同次序的互
20、补拷贝在同一DNA链上反向排列而成散在分布反向重复序列易形成链内碱基配对而呈“ 发夹” 式或“+” 字形结构 b. 卫星 DNA(随体 DNA):成串排列 可用等密度梯度离心法将其与主体 DNA分别开 人类基因组中可分别出三类卫星 DNA ,共占人类基因组的 5 6%:大卫星 DNA(macrosatellite DNA):其重复单位为 5171 bp,主要分布于染色体的着丝粒区;小卫星 DNA(minisatellite DNA):其重复单位为1570 bp,存在于常染色体;微卫星 DNA(microsatellite DNA):其重复单位为25 bp,存在于常染色体高度重复序列的功能:参与
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- 2022 年分 生物学 期末 重点
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