临床实验室安全管理二.ppt
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1、临床实验室安全管理二 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望 按照病原微生物实验室生物安全管按照病原微生物实验室生物安全管理条例所规定:理条例所规定:具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备。具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员。具有有效地防止病原微生物扩散和感染。具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。一一.生物安全柜生物安全柜一一.生物安全柜的工作原理和分类生物安全柜的工作原理和分类(一一)、生物安全柜的基本工作原理、生物安
2、全柜的基本工作原理 生物安全柜生物安全柜(biosafety cabinet;biological safety cabinet)是防止操作处理)是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置生物安全柜的基本设计的两个重要改进:生物安全柜的基本设计的两个重要改进:1、HEPA过滤器 2、HEPA过滤器+层流技术n生物安全柜的生物安全柜的工作原理工作原理主要是将柜内空气向外主要是将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压状态,通过垂直气流来抽吸,使柜内保持负压状态,通过垂直气流来保护工
3、作人员保护工作人员;外界空气经高效空气过滤器;外界空气经高效空气过滤器(high-efficiency particulate air filter,HEPA filter)过滤后进入安全柜内,以)过滤后进入安全柜内,以避免避免处理样品被污染处理样品被污染;柜内的空气也需经过;柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中,以过滤器过滤后再排放到大气中,以保护环境。保护环境。生物安全柜的工作原理生物安全柜的工作原理气流示意图气流示意图(二二)、生物安全柜的分类、生物安全柜的分类v生物安全柜领域执行的最重要的标准是生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准欧洲标准EN12469和美国国家卫
4、生基金会的第和美国国家卫生基金会的第49号标准号标准(NSF49)vNSF49在上世纪在上世纪70年代就已经出现,被公认为目前生物年代就已经出现,被公认为目前生物安全柜领域最完善的标准。安全柜领域最完善的标准。2002年,年,NSF49正式获得正式获得了美国国家标准学会(了美国国家标准学会(ANSI)的认可,成为美国生物安)的认可,成为美国生物安全柜的统一标准全柜的统一标准v欧洲标准化委员会(欧洲标准化委员会(CEN)于)于2000年年5月颁布了生物安月颁布了生物安全柜欧洲标准全柜欧洲标准EN12469:2000,成为欧盟区域内生物安,成为欧盟区域内生物安全柜的统一标准全柜的统一标准v这两个标
5、准对这两个标准对生物安全柜的分类、性能和检测生物安全柜的分类、性能和检测均有明确均有明确规定规定(二二)、生物安全柜的分类、生物安全柜的分类v根据防护程度的不同,通常将根据防护程度的不同,通常将生物安全柜分为生物安全柜分为、级级,可,可适用于不同生物安全等级的媒质的操作适用于不同生物安全等级的媒质的操作v按照美国按照美国1992年版年版NSF49标准标准生物安全等级生物安全等级1级(级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物物生物安全等级生物安全等级2级(级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物微生物生物安全等级
6、生物安全等级3级(级(P3)的媒质是指烈性的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生致命细菌、病毒等微生物,但感染后可治愈物,但感染后可治愈生物安全等级生物安全等级4级(级(P4)的媒质是指烈性的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生致命细菌、病毒等微生物,感染后不可治愈物,感染后不可治愈 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是指用于保护操作人员级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜安全柜v适用于适用于对处理样品安全性无要求对处理样品安全性无要求且生物且生物危险度等级为危险度等级为1、2、3的媒质的操作的媒质的操作 级级生物安全柜结构
7、示意图生物安全柜结构示意图 无手套型无手套型 有手套型有手套型级生物安全柜级生物安全柜v因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染,故因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染,故对进入柜内对进入柜内的空气洁净度要求不高的空气洁净度要求不高v空气的流动为空气的流动为单向、非循环式单向、非循环式,空气流经,空气流经HEPA过滤器后进入柜过滤器后进入柜内,通过工作台面后又被过滤、经排气口排出内,通过工作台面后又被过滤、经排气口排出v为为保护操作人员安全保护操作人员安全,其向内的非循环吸入气流必须远离操作者,其向内的非循环吸入气流必须远离操作者,故要求在使用前方有操作窗口、无手套的故要求在使用前方有
8、操作窗口、无手套的级生物安全柜时,避级生物安全柜时,避免人员在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从免人员在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从柜内抽出柜内抽出v为为保护环境,保护环境,安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过HEPA过滤器过滤过滤器过滤 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜样品安全与环境安全的通风安全柜v通常适用于生物危险度等级为通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的媒质的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用的操
9、作。当有毒化学物质或放射性核物质被用于微生物研究或制药的添加物时,应使用专为于微生物研究或制药的添加物时,应使用专为此目的设计制造的此目的设计制造的II级生物安全柜级生物安全柜 级生物安全柜为级生物安全柜为临床生物防护中应用最普遍临床生物防护中应用最普遍的一类生物的一类生物安全柜安全柜临临床中床中处理高浓度或大容量感染性材料处理高浓度或大容量感染性材料时,以时,以级生物安级生物安全柜应用最多全柜应用最多 v级生物安全柜至少需装置一个级生物安全柜至少需装置一个HEPAHEPA空气过滤器对外空气过滤器对外排气体进行净化,排气体进行净化,工作空间为经工作空间为经HEPAHEPA过滤器净化的无过滤器净
10、化的无涡流的单向流垂直空气涡流的单向流垂直空气v工作时正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下工作时正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下部为操作窗口部为操作窗口v由于外排风机将安全柜内空气不断地向外抽吸,使由于外排风机将安全柜内空气不断地向外抽吸,使柜柜内保持负压状态内保持负压状态,故操作窗口处虽然处于开放状态,故操作窗口处虽然处于开放状态,外部空气只可能经操作窗口被吸入,而柜内的空气不外部空气只可能经操作窗口被吸入,而柜内的空气不可能由操作窗口逸出,避免了气溶胶污染,保护了操可能由操作窗口逸出,避免了气溶胶污染,保护了操作人员的安全作人员的安全 v操作窗口操作窗口内侧垂直气流和外部吸入气
11、流交汇点的平衡内侧垂直气流和外部吸入气流交汇点的平衡是生物安全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强,是生物安全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强,此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染操作平台;若垂直气流过强,则有可能使柜内含有微操作平台;若垂直气流过强,则有可能使柜内含有微生物的空气逸出生物的空气逸出v级生物安全柜分为级生物安全柜分为A1、A2(原(原B3)、B1、B2四四个类型个类型级生物安全柜级生物安全柜-A1型生物安全柜型生物安全柜A1型生物安全柜型生物安全柜结构示意图结构示意图A1型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的
12、最小平均吸入口风速(计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为或测量值)为0.38m/s(75ft/min)v由静压箱送出的,经由静压箱送出的,经HEPA过滤器过滤的垂直气流是垂过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内柜内70%气体气体通过通过HEPA过滤器再循环至工作区,过滤器再循环至工作区,30%的气体通过的气体通过排气口排气口HEPA过滤器过滤排除过滤器过滤排除)v允许经排出口允许经排出口HEPA过滤器过滤后的气流返回实验室过滤器过滤后的气流返回实验室v允许有正压的污染风道和静压箱允许有正压的污染风道和静压箱 级
13、生物安全柜级生物安全柜-A2型生物安全柜型生物安全柜级级A2型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图A2型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为或测量值)为0.5m/s(100ft/min)v经经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内柜内30%气体气体通过排气口通过排气口HEPA过滤器排除,过滤器排除,70%的气体通过供气的气体通过供气口口HEPA过滤器再循环至工作区过滤器再循环至
14、工作区)v必须经必须经HEPA过滤器过滤后,所有废气才能排到室外,过滤器过滤后,所有废气才能排到室外,但但废气不可再进入安全柜循环或返回实验室废气不可再进入安全柜循环或返回实验室v所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围压的风道和静压箱包围 级生物安全柜级生物安全柜-B1型生物安全柜型生物安全柜当使用微量挥发性有毒化学当使用微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素用于物质和痕量放射性核素用于微生物学研究时,可采用微生物学研究时,可采用B1B1型生物安全柜,但是对这些型生物安全柜,但是对这些化学物质和放射性核素的处化学物质和放
15、射性核素的处理应在安全柜的直接排风区理应在安全柜的直接排风区内进行内进行级级B1型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图B1型生物安全柜型生物安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min)v经经HEPA过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成(即分是由未污染的循环吸入气流组成(即柜内柜内70%气体通过排气口气体通过排气口HEPA过滤器排除,过滤器排除,30%的气体通过供气口的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至过滤器再循环至工
16、作区工作区)v经经HEPA过滤器过滤后的大部分污染的垂直气过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流,通过专用风道过滤后排入大气流,通过专用风道过滤后排入大气v所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压,所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压,或被负压的风道和静压箱包围或被负压的风道和静压箱包围 级级B2型生物安全柜(也称为型生物安全柜(也称为“全排全排”型)型)级级B2型生物安全柜结构示意图型生物安全柜结构示意图适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合级级B2型生物安全柜型生物
17、安全柜v维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算维持穿过工作台开口面的最小平均吸入口风速(计算或测量值)为或测量值)为0.5m/s(100ft/min)v经经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的(即:气送入的(即:安全柜中排出的气体不进入垂直气流安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程的循环过程)v所有的吸入气流和垂直气流经所有的吸入气流和垂直气流经HEPA过滤器过滤后排入过滤器过滤后排入大气,大气,不再进入安全柜循环或返回实验室不再进入安全柜循环或返回实验室v所有污染的风道和静压箱应保持负压,或是被直接排所有污染的风道和静压
18、箱应保持负压,或是被直接排风的风道和静压箱包围风的风道和静压箱包围 级生物安全柜级生物安全柜v级生物安全柜是级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构完全密闭、不漏气结构的通的通风安全柜风安全柜v工作空间内为经工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的过滤器净化的无涡流的单向流空气单向流空气v安全柜正面上部为观察窗,下部为手套箱式操安全柜正面上部为观察窗,下部为手套箱式操作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行的接的橡皮手套进行的级生物安全柜级生物安全柜v安全柜应维持至少安全柜应维持至少120Pa的负压,方可确保人的负压,方可确保人体与柜内物品完
19、全隔绝体与柜内物品完全隔绝v进入气流经数个进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全过滤器过滤后送入安全柜,排出气流应经双层柜,排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过滤器过滤或通过过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理过滤器过滤和焚烧来处理v级生物安全柜适用于生物危险度等级为级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和和4的媒质的操作的媒质的操作(三三).).生物安全柜的应用生物安全柜的应用 (生物安全实验室选用生物安全柜的原则生物安全实验室选用生物安全柜的原则)实验实验室室级级别别生物安全柜生物安全柜选选用原用原则则一一级级一般一般无无须须使用使用生物安全柜,或使用生物安全柜,或使用级级生物安
20、全柜生物安全柜二二级级当可能当可能产产生微生物气溶胶或出生微生物气溶胶或出现溅现溅出的操作出的操作时时,可使,可使用用I级级生物安全柜;当生物安全柜;当处处理感染性材料理感染性材料时时,应应使用部分使用部分或全部排或全部排风风的的级级生物安全柜;若涉及生物安全柜;若涉及处处理化学致癌理化学致癌剂剂、放射性物、放射性物质质和和挥发挥发性溶媒,性溶媒,则则只能使用只能使用-B级级全全排排风风(B2型型)生物安全柜。生物安全柜。三三级级应应使用使用II级级或或级级生物安全柜;所有涉及感染材料的生物安全柜;所有涉及感染材料的操作,操作,应应使用使用全全排排风风型型-B级级(B2型型)或或级级生物安全生
21、物安全柜。柜。四四级级应应使用使用级级全排全排风风生物安全柜。当人生物安全柜。当人员员穿着正穿着正压压防防护护服服时时,可使用,可使用-B-B级级生物安全柜。生物安全柜。小小 结结v生物安全柜生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置安全装置v 其其工作原理工作原理是将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压是将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压状态,通过垂直气流来保护工作人员;外界空气经状态,通过垂直气流来保护工作人员;外界空气经HEPA过滤器过滤后进入安全柜内,
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