实验室检查免疫shen1教学文案.ppt

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1、实验室检查免疫shen12、切忌仅根据某肿瘤标志物一时升高，轻易、切忌仅根据某肿瘤标志物一时升高，轻易下诊断；即使明显升高也应根据临床症状、检下诊断；即使明显升高也应根据临床症状、检查结果等综合分析判断。查结果等综合分析判断。3、为了提高诊断的准确性，应用多变量分析，、为了提高诊断的准确性，应用多变量分析，将几项相关的标志物组成联合标志物组，同时将几项相关的标志物组成联合标志物组，同时对某一肿瘤进行检测。对某一肿瘤进行检测。4、观察肿瘤复发和疗效的监测是肿瘤标志物、观察肿瘤复发和疗效的监测是肿瘤标志物应用的重要方面。必须定期、动态地观察检测应用的重要方面。必须定期、动态地观察检测结果。结果。5

2、、要注意假阴性和假阳性问题、要注意假阴性和假阳性问题肿瘤瘤体大小与术前肿瘤标志物肿瘤瘤体大小与术前肿瘤标志物的关系的关系 结直肠肿瘤结直肠肿瘤 CEA 卵巢癌卵巢癌 CA125 肺癌肺癌 CYFRA21-1（CK19）显著相关显著相关 一、甲胎蛋白一、甲胎蛋白(AFP)由卵黄囊和胚胎期肝细胞合成的胚胎由卵黄囊和胚胎期肝细胞合成的胚胎蛋白，属胚胎性抗原标志物。正常肝细胞蛋白，属胚胎性抗原标志物。正常肝细胞不合成不合成AFP，当肝细胞癌变后，当肝细胞癌变后，AFP可重可重新表达。肝脏来源和胚胎来源的新表达。肝脏来源和胚胎来源的AFP存在存在共同的免疫特异性。妊娠妇女怀孕共同的免疫特异性。妊娠妇女怀

3、孕6周开始周开始合成合成AFP，至，至78个月达高峰，血和尿中个月达高峰，血和尿中AFP升高。分娩后升高。分娩后3周降为正常。周降为正常。正常参考值范围：正常参考值范围：成人血浆或血清成人血浆或血清AFP25 g/L(免疫分析法测定免疫分析法测定)注意：胎儿血清中注意：胎儿血清中AFP升高。出生后，升高。出生后，AFP合成受抑制，一年内降至正常水合成受抑制，一年内降至正常水平。平。半衰期半衰期300400 g/L或含量不断增或含量不断增高，肝脏有占位病变者，基本可诊断为原发高，肝脏有占位病变者，基本可诊断为原发性肝癌。必须注意：约性肝癌。必须注意：约2030%的原发性肝癌的原发性肝癌血清血清A

4、FP正常。正常。(2)睾丸癌、畸胎瘤等生殖腺胚胎性肿瘤患者睾丸癌、畸胎瘤等生殖腺胚胎性肿瘤患者AFP显著升高。显著升高。(3)良性肝脏疾病，如肝炎、肝硬化等血清良性肝脏疾病，如肝炎、肝硬化等血清AFP水平也可升高，但常为轻中度。水平也可升高，但常为轻中度。(4)原发性肝癌患者疗效评估和肿瘤复发、转原发性肝癌患者疗效评估和肿瘤复发、转移的监测。移的监测。(5)肝硬化等肝脏疾病动态观察肝硬化等肝脏疾病动态观察AFP浓度变化，浓度变化，对早期诊断原发性肝癌有重要价值。对早期诊断原发性肝癌有重要价值。(6)产前诊断胎儿宫内死亡、神经管畸形、无产前诊断胎儿宫内死亡、神经管畸形、无脑儿等。脑儿等。二、癌胚

5、抗原二、癌胚抗原(CEA)1965年从胎儿和结肠癌组织中发现的，年从胎儿和结肠癌组织中发现的，为一大分子多糖复合物。一般情况下，为一大分子多糖复合物。一般情况下，CEA由胎儿胃肠道上皮组织合成，出生后血清降由胎儿胃肠道上皮组织合成，出生后血清降至正常水平。至正常水平。CEA属非器官特异性肿瘤相关属非器官特异性肿瘤相关抗原，分泌抗原，分泌CEA的肿瘤大多位于空腔脏器，的肿瘤大多位于空腔脏器，如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。正常参考值范围：正常参考值范围：非吸烟健康人血清非吸烟健康人血清CEA浓度浓度5 g/L(免疫分析法免疫分析法)注意：注意：不同方法、不同试剂盒检测，正

6、常参不同方法、不同试剂盒检测，正常参考范围可略有差异，应根据各医院的正常值。考范围可略有差异，应根据各医院的正常值。临床意义临床意义(1)良性疾病：良性疾病：部分重度吸烟者部分重度吸烟者(2040%)血清血清CEA升高。血清升高。血清CEA升高还升高还见于肠梗阻、尿毒症、胰腺炎、肝硬化、结见于肠梗阻、尿毒症、胰腺炎、肝硬化、结直肠息肉、胃溃疡等直肠息肉、胃溃疡等(约约2030)，但为短暂，但为短暂性、轻中度升高。性、轻中度升高。(2)恶性疾病：恶性疾病：CEA显著升高见于结直显著升高见于结直肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、甲状肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、甲状腺髓样癌等，一般无助于各肿瘤

7、的早期诊断。腺髓样癌等，一般无助于各肿瘤的早期诊断。（3）肿瘤患者血清）肿瘤患者血清CEA水平与肿瘤的进展水平与肿瘤的进展相关，相关，CEA值升高提示病变残存或进展；值升高提示病变残存或进展；显著升高者，大多为肿瘤浸润，其中显著升高者，大多为肿瘤浸润，其中70%为转移癌。为转移癌。(4）监测监测CEA有助于肿瘤术后观察及疗效有助于肿瘤术后观察及疗效判断。一般情况手术切除肿瘤后判断。一般情况手术切除肿瘤后6周，周，CEA水平恢复正常，否则提示肿瘤残存。应注水平恢复正常，否则提示肿瘤残存。应注意：约意：约710%患者肿瘤复发时血清患者肿瘤复发时血清CEA升升高不明显。高不明显。(5)胃液、唾液、尿

8、液中胃液、唾液、尿液中CEA浓度明显升浓度明显升高于血清，且较血中升高出现早，故对胃高于血清，且较血中升高出现早，故对胃癌、膀胱癌的诊断价值高于血清标本。癌、膀胱癌的诊断价值高于血清标本。三三、CA 15-3 1984年年Hilkens等以人乳脂肪球糖蛋白等以人乳脂肪球糖蛋白制备的单克隆抗体所识别的抗原，主要位于制备的单克隆抗体所识别的抗原，主要位于乳腺癌细胞，分子量为乳腺癌细胞，分子量为400Kd，分子结构至，分子结构至今不清楚。今不清楚。正常参考值范围正常参考值范围25KU/L(免疫分析法免疫分析法)临床意义临床意义(1)5070%乳腺癌患者血清乳腺癌患者血清CA 15-3浓度明浓度明显升

9、高，晚期患者约显升高，晚期患者约100%出现升高。出现升高。(2)是监测乳腺癌术后复发的最佳指标。是监测乳腺癌术后复发的最佳指标。(3)50%肺癌、肺癌、4050%的胃肠道肿瘤、的胃肠道肿瘤、30%卵巢癌出现升高。卵巢癌出现升高。(4)透析肾衰患者（透析肾衰患者（20%）、慢肝（）、慢肝（5%）、）、良性乳腺疾病（良性乳腺疾病（4%）可能会出现升高。）可能会出现升高。四、四、CA-125 1981年年Bast用卵巢囊腺癌细胞系作用卵巢囊腺癌细胞系作抗原制备的单克隆抗体抗原制备的单克隆抗体OC125结合的上皮结合的上皮性卵巢癌抗原，分子量为性卵巢癌抗原，分子量为200Kd的糖蛋白。的糖蛋白。存在

10、于上皮性卵巢癌组织和病人血清中。存在于上皮性卵巢癌组织和病人血清中。正常参考值范围正常参考值范围35KU/L(免疫分析法免疫分析法)临床意义临床意义(1)轻度升高可见于健康妇女、轻度升高可见于健康妇女、36%良性卵巢良性卵巢疾病或非肿瘤患者，如行经期等。疾病或非肿瘤患者，如行经期等。(2)是上皮性卵巢癌和子宫内膜癌的标志物，是上皮性卵巢癌和子宫内膜癌的标志物，约约80%的患者出现升高。此外，透明细胞癌、的患者出现升高。此外，透明细胞癌、未分化卵巢癌等均可升高。未分化卵巢癌等均可升高。(3)肿瘤复发肿瘤复发CA-125升高先于临床症状，因此，升高先于临床症状，因此，监测血清监测血清CA-125水

11、平有助于肿瘤复发、转移水平有助于肿瘤复发、转移的观察。的观察。(4)非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率，是非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率，是一种较广谱的肿瘤标志物，约一种较广谱的肿瘤标志物，约50%胰腺癌、胰腺癌、40%肺癌等可出现升高。肺癌等可出现升高。(5)良性和恶性胸腹水中良性和恶性胸腹水中CA 125升高，羊升高，羊水中也有较高水平。水中也有较高水平。(6)早期妊娠妇女（早期妊娠妇女（3个月内），个月内），CA 125有有升高的可能。慢性肝病（升高的可能。慢性肝病（57%）、腹膜炎）、腹膜炎（59%）、子宫良性疾病（）、子宫良性疾病（20%）、心和）、心和肾脏功能不全（肾脏功能不全（10%

12、）出现升高。）出现升高。五、五、CA 19-9 1979年年Koprowski将人结直肠细胞株将人结直肠细胞株SW1116表面分离出的单唾液酸神经节糖苷表面分离出的单唾液酸神经节糖苷脂作抗原，制备的单克隆抗体识别的肿瘤相脂作抗原，制备的单克隆抗体识别的肿瘤相关抗原，分子量约关抗原，分子量约36Kd。胎儿的胰腺、肝。胎儿的胰腺、肝脏、肠等组织也存在此种抗原。脏、肠等组织也存在此种抗原。正常参考范围正常参考范围37KU/L（免疫分析法）（免疫分析法）临床意义临床意义（1）胰腺炎、胆囊炎、胆管壶腹癌时，血清）胰腺炎、胆囊炎、胆管壶腹癌时，血清CA19-9水平升高，尤其是诊断胰腺癌敏感性水平升高，尤其

13、是诊断胰腺癌敏感性为为7095，特异性为，特异性为7290，是重要的，是重要的辅助诊断指标。辅助诊断指标。（2）胃癌阳性率为）胃癌阳性率为50、结直肠癌为、结直肠癌为60、肝癌阳性率为肝癌阳性率为51。（3）急性胰腺炎、胆囊炎、肝硬化、肝炎等）急性胰腺炎、胆囊炎、肝硬化、肝炎等疾病，疾病，CA19-9也有升高，注意鉴别诊断。也有升高，注意鉴别诊断。六、前列腺特异性抗原六、前列腺特异性抗原(PSA)PSA是由前列腺上皮细胞合成的糖蛋白，是由前列腺上皮细胞合成的糖蛋白，仅存在于前列腺上皮细胞的胞质、导管上皮和仅存在于前列腺上皮细胞的胞质、导管上皮和粘液内，具有糜蛋白酶样和胰蛋白酶活性，在粘液内，具

14、有糜蛋白酶样和胰蛋白酶活性，在血中半衰期仅为血中半衰期仅为 23.5天。天。PSA在血清中以游在血清中以游离型和结合型存在，结合型离型和结合型存在，结合型PSA在前列腺癌病在前列腺癌病人血清中约占人血清中约占80%，称为复合，称为复合PSA（C-PSA)；20%的的PSA为非结合形式，称为游离为非结合形式，称为游离PSA（F-PSA）。）。正常参考值范围正常参考值范围正常男性血清正常男性血清T-PSA4.0 g/L;F-PSA0.25注意：注意：PSA水平受年龄、前列腺的体积、水平受年龄、前列腺的体积、前列腺损伤性检查的影响。前列腺损伤性检查的影响。临床意义临床意义 （1）PSA是目前诊断前列

15、腺癌最敏感的特是目前诊断前列腺癌最敏感的特异性标志物，具有器官特异性。可用于前异性标志物，具有器官特异性。可用于前列腺癌的早期诊断、疗效监测及预测复发。列腺癌的早期诊断、疗效监测及预测复发。T-PSA4.0g/L对前列腺癌诊断的阳性率对前列腺癌诊断的阳性率为为50 80%。（2）前列腺肥大、前列腺炎等良性疾病也）前列腺肥大、前列腺炎等良性疾病也可见可见T-PSA和和F-PSA的轻度升高。的轻度升高。(3)前列腺癌血清结合型前列腺癌血清结合型PSA明显升高，游明显升高，游离型显著下降。特别当离型显著下降。特别当T-PSA 4.020.0g/L，测定，测定PSA类型有助于鉴别良性和恶性疾类型有助于

16、鉴别良性和恶性疾病。当游离型病。当游离型PSA(F-PSA)结合型结合型PSA(T-PSA)比例比例0.25提示可提示可能为前列腺增生，特异性达能为前列腺增生，特异性达90，正确性，正确性80。（4）约有）约有5前列腺癌患者前列腺癌患者T-PSA在正在正常范围，但前列腺酸性磷酸酶升高，同常范围，但前列腺酸性磷酸酶升高，同时检测可提高前列腺癌的诊断率。时检测可提高前列腺癌的诊断率。七、神经元特异性烯醇化酶七、神经元特异性烯醇化酶（NSE)NSE是烯醇化酶的一种同工酶是烯醇化酶的一种同工酶（亚基）亚基）,分子量为分子量为87Kd，参与糖酵，参与糖酵解，催化解，催化2磷酸甘油变成烯醇式磷酸丙酮磷酸甘

17、油变成烯醇式磷酸丙酮酸。酸。NSE是小细胞肺癌和神经母细胞瘤是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。的肿瘤标志物。正常参考范围正常参考范围血清血清15g/L(免疫分析法）免疫分析法）临床意义临床意义（1）小细胞肺癌患者）小细胞肺癌患者NSE水平明显高于肺水平明显高于肺腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌等，可用于鉴腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌等，可用于鉴别诊断和监测小细胞肺癌放疗、化疗效果。别诊断和监测小细胞肺癌放疗、化疗效果。（2）神经母细胞瘤患者）神经母细胞瘤患者NSE异常升高，可异常升高，可用于鉴别诊断及疗效评价。用于鉴别诊断及疗效评价。（3）神经内分泌细胞肿瘤患者血清）神经内分泌细胞肿瘤患者血清NSE

18、也也可升高。可升高。（4）也存在于红细胞内，标本溶血会）也存在于红细胞内，标本溶血会影响检测结果。影响检测结果。(1)乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与亚型与亚型：是病毒吸附易感细胞的受体成分，可诱是病毒吸附易感细胞的受体成分，可诱导机体产生特异性保护性抗体抗导机体产生特异性保护性抗体抗-HBs。HBsAg主要有主要有4种亚型：种亚型：adw、ayw、adr、ayr。我国。我国HBV感染以感染以adr亚型多见亚型多见，少数民族基本为少数民族基本为ayw。可以出现不同亚型。可以出现不同亚型HBV的重复感染。的重复感染。第二节第二节 乙肝病毒标志物检测乙肝病毒标志物检测 HBsAgu

19、血清、唾液、精液等中存在表明有急性乙血清、唾液、精液等中存在表明有急性乙肝或慢性乙肝或无症状携带者，可以维持数肝或慢性乙肝或无症状携带者，可以维持数月、或长期存在，是月、或长期存在，是HBV现行感染的重要指现行感染的重要指标。标。u典型典型HBV感染，感染，HBsAg在在ALT和症状出现和症状出现前前24周检出，急性乙肝恢复后周检出，急性乙肝恢复后14个月消失。个月消失。是乙肝早期诊断的主要指标。是乙肝早期诊断的主要指标。最新文献报道：最新文献报道：HBsAg浓度可以反映体内浓度可以反映体内HBV cccDNA的水平，作为抗病毒治疗的有的水平，作为抗病毒治疗的有用评价指标（派罗欣、用评价指标（

20、派罗欣、PEG-IFN-）。）。抗抗-HBsu是一种保护性抗体是一种保护性抗体，能清除已感染的能清除已感染的HBV或或防止防止HBV感染。可持续数年，滴度与保护作用感染。可持续数年，滴度与保护作用平行，一般认为具有平行，一般认为具有2030IU/ml机体具有保护机体具有保护力。是力。是评价乙肝疫苗有效性的重要标志。评价乙肝疫苗有效性的重要标志。u一般在一般在HBsAg转阴后出现，常示疾病恢复转阴后出现，常示疾病恢复。u既往感染过既往感染过HBV，现已恢复。，现已恢复。u被动免疫被动免疫HBeAgu 急性乙肝或慢性乙肝均可阳性，急性乙肝急性乙肝或慢性乙肝均可阳性，急性乙肝持续阳性者，可发展为慢性

21、乙肝。持续阳性者，可发展为慢性乙肝。u 是是HBV复制活跃和血清具有复制活跃和血清具有强传染性强传染性的标的标志。志。u e抗原阳性孕妇，抗原阳性孕妇，HBV母婴传播率很高。母婴传播率很高。u HBeAg抗抗-HBe的转换是抗病毒药物疗的转换是抗病毒药物疗效评价指标。效评价指标。抗抗-HBeu 急性乙肝阳性表示病情恢复，传染性降低。急性乙肝阳性表示病情恢复，传染性降低。u 慢性乙肝阳性应结合慢性乙肝阳性应结合HBV-DNA检测，若检测，若 HBV-DNA阴性，表示病毒复制减少；若阴性，表示病毒复制减少；若HBV-DNA阳性，可能是前阳性，可能是前C区基因变异病毒区基因变异病毒株感染。株感染。u

22、HBeAg和抗和抗-HBe双阳性，可能为野生株和双阳性，可能为野生株和变异株同时存在，预后差。或为转换之中。变异株同时存在，预后差。或为转换之中。抗抗-HBcu包括包括IgG、IgM和和IgA，目前常检测的是总抗，目前常检测的是总抗-HBc。不是中和抗体，不是中和抗体，而是反映肝细胞受而是反映肝细胞受HBV侵害的指标。侵害的指标。u抗抗HBc-IgM阳性是阳性是HBV感染后在血液中最早感染后在血液中最早出现的抗体，通常在出现的抗体，通常在ALT升高时出现。是诊断升高时出现。是诊断急性乙肝和判断病毒复制活跃的指标。急性乙肝和判断病毒复制活跃的指标。u约约515%慢性乙肝患者抗慢性乙肝患者抗HBc

23、-IgM阳性，在阳性，在活动期更为明显。活动期更为明显。u是既往是既往HBV感染的指标，可数年不消退。感染的指标，可数年不消退。前前S抗原和抗抗原和抗-前前Su前前S抗原出现较早，与抗原出现较早，与HBeAg和和HBV-DNA显著相关，可作为显著相关，可作为HBV早期感染的指标，并早期感染的指标，并反映反映HBV复制。复制。u抗抗-前前S的出现与抗的出现与抗-HBs相关，是相关，是HBV的中的中和抗体，可作为清除病毒和疾病预后的参考和抗体，可作为清除病毒和疾病预后的参考指标。指标。HBV自限性感染不同病毒标志物检测时相图自限性感染不同病毒标志物检测时相图Incubation(4-12 week

24、s)Active Infection(2-12 weeks)Improve(2-16 weeks)Recovery(Years)SymptomsHBsAganti-HBc Totalanti-HBsTimeRelative Concentrationanti-HBeHBeAganti-HBc-IgM HBV慢性感染不同病毒标志物检测时相图慢性感染不同病毒标志物检测时相图HBeAgAnti-HBc TotalIncubation(4-12 weeks)Acute Infection(6 months)Chronic Infection(Years)Relative ConcentrationTi

25、meHBsAgAnti-HBcIgMSymptoms临床常见临床常见HBV血清标志物的阳性模式血清标志物的阳性模式HBsAg 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 未感染未感染HBV+俗称俗称“大三阳大三阳”示急、慢性乙肝，病毒复制活跃，传染性强。示急、慢性乙肝，病毒复制活跃，传染性强。+俗称俗称小三阳小三阳病毒复制减弱；病毒变异；病毒复制减弱；病毒变异；HBV感染趋恢复感染趋恢复 +既往感染过既往感染过HBV，机体对，机体对HBV仍有免疫力仍有免疫力此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢