华中农大微生物学题库第十一章微生物学实验试题答案.doc

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1、第十一章微生物学实验试题答案一、选择题111818. C111819. D111820. C111821. C111822. D111823. C111824. A111825. B111826. A111827. C111828. C111829. B111830. A111831. C111832. A111833. A111834. A111835. A111836. A111837. D111838. A111839. D111840. A111841. D111842. E111843. A111844. B111845. C111846. C111847. A111848. A11

2、1849. C111850. A111851. A111852. C111853. A111854. C111855. A111856. B111857. B二、判断题111858. 对。111859. 错。111860. 对。111861. 对。111862. 错。111863. 对。111864. 错。111865. 对。111866. 对。111867. 对。111868. 错。111869. 对。111870. 对。111871. 错。111872. 错。111873. 错。111874. 错。111875. 对。111876. 对。111877. 对。111878. 对。111879

3、. 错。111880. 错。111881. 对。111882. 错。111883. 错。111884. 对。111885. 错。111886. 错。111887. 错。111888. 错。111889. 错。111890. 错。111891. 错。111892. 错。111893. 对。111894. 错。111895. 错。111896. 错。111897. 对。111898. 对。111899. 错。111900. 错。111901. 对。111902. 对。111903. 错。111904. 对。111905. 对。111906. 错。111907. 对。111908. 对。111909

4、. 错。111910. 对。111911. 错。111912. 对。111913. 对。111914. 对。111915. 错。111916. 对。三、填空题111917. 加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片111918. 印片,干燥,固定,复红染色2-3分钟,水洗,晾干111919. 洋菜(琼脂)，1.5-2.0%，0.5%111920. 涂片，干燥，固定，复红染色1-2分钟，水洗，晾干111921. 锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条

5、件一般为98kpa，在工艺条件下保压计时一般为30分钟，到时间后切断热源，降温，出锅111922. 照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节pH值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中111923. 无色，红色111924. 紫色，红色111925. 所染染料的颜色111926. 反光镜,聚光镜,物镜,目镜111927. 镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器,粗动螺旋,微动螺旋，聚光镜升降螺旋111928. 放线菌，7.5-8.0111929. 真菌，5-6111930. 细菌、6.8-7.211

6、1931. 自生固氮菌，空气中的N2。111932. 160-170/2h111933. 降低，适当升高111934. 酒精脱色111935. 越小，越小心111936. 液体，固体，半固体111937. 自来111938. 玻璃器材，高压蒸汽灭菌111939. 10倍,9111940. 1molNaOH、1molHCL111941. 选择培养基，加富培养基，鉴别培养基111942. 纤维素，纤维分解菌，酪蛋白，蛋白分解菌111943. 涂片，干燥，固定，结晶紫染色1分钟，水洗,碘液媒染1分钟，水洗，95%的乙醇脱色25秒，水洗，蕃红复染3-5分钟，水洗，晾干111944. 积累代谢产物，天然

7、培养基，合成培养基,，半合成培养基111945. 0.65，40x111946. 1.25，100x或90x111947. 0.25，10x或8x111948. 接种针，接种环111949. 酒精灯，1ml无菌吸管，9ml试管装无菌水，9cm的无菌平皿111950. 红色，绿色111951. 平面，凹面111952. 紫外灯照射，喷洒化学药剂(如酚)111953. 细菌的运动性111954. 将摆斜面用特制木条放在桌面上，将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面，斜面长度不得超过试管长度的1/2，将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上，以防空气中微生物落到棉塞上引起污染111955. 过滤法，蔡

8、氏细菌过滤器，滤膜111956. 无氮111957. 酸性111958. 孟加拉红，链霉素111959. 显微镜，镜台测微尺，目镜测微尺111960. 显微镜血球计数板。111961. 显微镜细菌计数板。111962. 将镜台测微尺置载物台上，调焦找到台尺，在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长，在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长，去掉台尺换上待测样本片，在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数，将校正值乘入，算出十个酵母菌的平均宽和平均长，以平均宽Xm平均长Ym表示酵母菌的大小。111963. 将待测菌进行适当的稀释，将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取

9、样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数，计算出单位体积(如每ml)中的含菌数。111964. 涂片，风干，加复红染色3-5分钟，水洗，晾干，加墨素涂抹，风干。111965. 涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色15分钟，水洗，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。111966. 孔雀绿加热染色适当111967. 印片时不能移动111968. 涂抹墨素要薄111969. 好气，专性厌氧111970. 结构，组成，紫，无111971. 前者计数区的深度是后者的五倍111972. 浅兰111973. 间生，透明，极节，氧气，低氧分压，固定分子氮111974. C:N比(碳氮比)，菌体生长，积累代谢产物1

10、11975. 青霉素(链霉素)，细菌和放线菌，真菌，结晶紫111976. G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后，菌体紫色脱去，故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体。111977. 玻片置反，菌体着色太浅111978. 新陈代谢，pH值，碳酸盐(CaCO3)，磷酸盐111979. 酸，pH下降,碱，pH上升111980. Petri，Petri，Hesse，琼脂。111981. 0.1毫米111982. 酒精脱色时间过长，菌体培养时间太长111983. 大肠杆菌(E.Coli)，伊红-美兰，大肠杆菌(E.Coli)，金属111984. 褐111985. 红111986. 金属器皿

11、，铝四、名词解释111987. 电子显微镜是利用电子波波长短，分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。111988. 用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。111989. 由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。111990. 人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。111991. 由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。111992. 由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。111993. 革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法，细菌首先用结晶紫染色，再用碘液固定，然后用95%的酒精脱色,

12、最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后，又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色，也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。111994. 用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。111995. 将一定量的样品经十倍稀释后，用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后，计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数，即为样品中的含菌数。111996. 利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后，再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。111997. 巴氏消毒是法国微生物学家巴斯德发明的一种消毒方

13、法。是在62-63的条件下，保温半小时杀死微生物的营养体(主要是病原菌)的方法。111998. 利用100的温度杀死微生物的营养体.每次1小时连续三天，中间的空隙时间让未杀死的芽胞萌发成营养体，在下一次100的温度下被杀死。如此反复两次可将培养基的微生物(包括芽胞)全部杀死。该方法适用于没有高压灭菌器的地方进行灭菌处理。111999. 只杀死微生物的营养体(主要是病原菌)，而不能杀死微生物的芽胞的除菌方法。112000. 利用物理或化学方法杀死所有微生物包括细菌的芽胞的除菌方法称为灭菌。112001. 利用一定孔径的滤膜阻止微生物的通过而除去溶液中或者空气中微生物的除菌方法。112002. 利

14、用热的蒸汽杀死微生物的灭菌方法。湿热灭菌又分常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌。112003. 利用干热空气杀死微生物的方法。其灭菌工艺条件通常为160-170/2h。112004. 根据使用的目的，控制培养基的组成成分，使之有利于某种微生物的生长而限制其它微生物的生长，从而能从自然界混杂的群体中分离出某一种单一的微生物。如无氮培养基用来分离土壤中的自生固氮菌。112005. 在基本培养基中加入血清，动植物组织液或者其它生长因子而配制出来的营养特别丰富的培养基。112006. 根据微生物的代谢特点，通过指示剂的显色反应，用以鉴别不同微生物的培养基。112007. 数值孔径是判断物镜和聚光镜性能的重要指

15、标，通常用N.A表示。N.A=n.sin/2(n为介质折光率，为镜口角)。112008. 分辨力是指显微镜能够分辨出的物体两点间最小距离的能力。它与波长及物镜的数值孔径有关。112009. 利用过滤除菌的原理而设计出来的一种无菌操作工作台，鼓风机鼓出的空气通过孔径很小的薄膜将空气中的微生物过滤后变成无菌空气吹向操作台，可防止周围有菌空气流入，能保证操作台始终保持无菌状态，便于无菌操作。112010. 纯培养技术是培养某个单一微生物的方法。包括培养基的制作与灭菌。单一微生物的分离与纯化,和无菌操作接种技术。112011. 焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看见的物象之间的距离。它与放大倍数成反比

16、，即放大倍数越大,焦深越小。112012. 利用暗视野聚光器能阻止光线直接照射标本，而使光线斜射在标本上。在显微镜中见到黑暗视野中明亮物象的镜检技术。112013. 以紫外光作光源的显微镜检技术。112014. 在黑暗视野中看到明亮物体的相差镜检技术。112015. 在明亮视野中看到黑暗物体的相差镜检技术。五、问答题112016. 测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:1.先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠,看台尺的X格正好与目尺的Y格重叠，然后用计算目尺每格的长.分别校正目镜测微尺在低倍镜,高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。2.将待测微生物制

17、成水浸片或染色涂片置载物台上，调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格，长几格,然后乘上相应放大倍数下的校正值。3.一般测10个微生物，然后以平均值表示。4.若是酵母、细菌等单细胞微生物,通常测其宽和长，然后以平均宽平均长表示,单位为m。112017. 1.测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管,9cm无菌平皿，9ml试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。2.称取10克工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟，让菌体分散。3.将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10-8。4.取9cm无菌平板皿9套用记号笔在平皿底编号，10-8编3套，10-7编3套，10-6编3套。5

18、.用1支1ml的无菌吸管，取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平皿中，如此将三个重复做完。同法取10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平皿中。同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6平皿中.(均要按无菌操作法做)。6.将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平皿中，每个加入量大约15-20ml，边加边摇动平皿,，使培养基与菌液充分混匀。7.待培养基凝固后,将平板倒过来，置28-30下培养48小时后计数。112018. 1.取9ml无菌平皿一套在火焰旁按无菌操作法倒人15-20ml营养琼脂，让其冷凝成平板。2.左手拿上述平板,右手拿接种环在

19、火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条。3.将接种环在火焰上灭菌,左手平板转动大约70度，用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线，亦划三条。4.同上法再作第三次,，第四次划线。5.盖上平板盖，将平板倒过来置28-30下培养2-4天后观察结果。划的好应在第四次划线处出现单个菌落。注:本答案也可画图说明。112019. 检查细菌的运动性有两种方法:1.镜检法将待检样品制成菌悬液,滴一点菌液于一盖玻片上，取一凹窝载玻片，将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上，然后将盖玻片和载玻片一起翻转，让菌悬液在凹窝上的盖玻片下。然后在显微镜下观察，观察应找悬液的边缘，因细菌为了更多地接触空气，总向水滴的边缘运

20、动。观察时要注意将细菌的运动与分子的布朗运动区别开。2.半固体穿刺法将待检细菌穿刺接种在半固体试管培养基中,若细菌仅沿穿刺线生长,说明细菌不运动。若细菌沿穿刺线向周围扩散生长,说明细菌有运动性。112020. 培养基是人工配制的供不同微生物生长繁殖，或用于积累代谢产物的营养基质。所以配制培养基时应注意以下原则：1.根据微生物的不同选用不同的培养基，以满足微生物对营养物的需要。如自养型微生物所要求营养较简单，而异养型微生物营养要求较复杂。培养细菌，放线菌，真菌等各有不同的培养基。2。注意各种营养物质的浓度与配比。微生物生长所需要的营养物质往往在适当时才生长良好。浓度大往往会抑制微生物的生长。如糖

21、类，各种重金属盐类如果浓度太高，也会影响微生物的生长。同时各种营养物质的浓度比也应注意，特别是C/N比。3.注意将培养基的pH值控制在一定范围内。为了防止因微生物生长繁殖或积累代谢产物后影响培养基pH值，常在其中加入磷酸盐，碳酸盐，以维持培养基pH值的相对恒定。4.同时还应考虑培养基的氧化还原电位及原材料的经济、易购和来源广泛的原则。112021. 配制培养基的基本过程是:1.按培养基的配方称取各种药品，用量太少的药品应配制成溶液后再取一定量加入。2.将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。3.若配固体培养基，按2%的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入2的溶液

22、中。4.加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。5.用1molNaOH和1molHCL调节pH至要求值。6.用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，灭菌后备用。注意事项:1. 配制过程中，在加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。2.分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。112022. 显微计数通常用来测微生物单细胞的数量，大一点的细胞如酵母菌用血球计数板，小一点的细胞如细菌用细菌计数板。该测数方法不能区别死活细胞，测出的是微生物总的细胞数量。血球计数板和细菌计数板构造相似，计数区的面积都是1mm2，两者的差别在于血球计数板的深度为0.1mm。细菌计数板

23、的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是细菌计数板计数区都划为25个大方格，每个大方格又划为16个小格。所以每小格的体积为1/4000mm3或1/20000mm3。计数时,先在显微镜下找到计数区，然后将菌液稀释到适当浓度，取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片，亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。计数时采取五点取样法数数，即四角各取一个大方格，再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边，以防增加数量。将5个大方格的菌数加起来除以80得出每个小格的菌数，再乘以4000即为1mm3的菌数，再乘上1000即为1ml的菌数，乘上稀释倍数即为样

24、品含菌数。112023. 要做到这一点，首先取决于显微镜的好坏，若显微镜上的推动器带有纵横标尺，很容易做到这一点。首先记住标本片放到推动器上的方向，然后记下观察某一物体时推动器上的纵横标尺的数字。如纵3，横4。当标本片拿下来后，若要重复观察原来的物象，只要按原方向将标本片荚在推动器上，将推动器推动到第一次观察该物体的纵，横标尺数字纵3，横4，即可看到第一次观察过的物体。112024. Anabaenaazotica的主要特征是:1.菌体为丝状体，营养细胞为绿色，藻丝不扭曲。2.该菌有异型胞,异型胞间生，无色透明，两端有极点。3.厚壁孢子无色、大、两端无极点。112025. 因通过革兰氏染色，可

25、把几乎所有的细菌都分成G和G菌两大类细菌，在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。因此，任何细菌只要通过革兰氏染色，即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。革兰氏染色反应的成败关键是:1.菌龄:12-24小时的纯培养物。2.革兰氏染色操作时，要严格控制酒精脱色时间，菌液涂布均匀而薄。3.培养基的组成。112026. 首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离真菌应选用马丁-孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离细菌，一般稀至10-8,若分离放线菌,一般稀至10-6；若分离真菌，一般稀至10-4。取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。112027. 1.该培养基的C源物质是蔗糖，N源物质是硝酸钠。2.磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁为该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。3.该培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的全部生长因子，故无需添加生长因素,该培养基所培养的微生物为野生型。