科研与实践及传写论文.ppt

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1、科研与实践及传写论文 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、科研与实践若干问题一、科研与实践若干问题（一）科研经费申请的途径（一）科研经费申请的途径（二）科研中应注意的几个问题（二）科研中应注意的几个问题（三）关于检验（实验）防护问题（三）关于检验（实验）防护问题（四）发现问题注意寻找原因（四）发现问题注意寻找原因 （有时实验中还需要设计一些小实验）（有时实验中还需要设计一些小实验）（五）（五）如何看科研成果如何看科研成果（一）科研经费申请的途径（一）

2、科研经费申请的途径1 1、卫生局、卫生局、卫生局、卫生局2 2、市科委、市科委、市科委、市科委3 3、省卫生厅、省卫生厅、省卫生厅、省卫生厅4 4、省科委（自然基金、其它）、省科委（自然基金、其它）、省科委（自然基金、其它）、省科委（自然基金、其它）5 5、卫生部、卫生部、卫生部、卫生部6 6、国家自然科学基金、国家自然科学基金、国家自然科学基金、国家自然科学基金7 7、863863计划计划计划计划8 8、973973计划计划计划计划9 9、其它（人事部、人事厅、教委、药品等）、其它（人事部、人事厅、教委、药品等）、其它（人事部、人事厅、教委、药品等）、其它（人事部、人事厅、教委、药品等）单位

3、性质中标率占有率科研（如军事科学科研）4060%20%30%高校1040左右70%左右其它（类似咱们）23%2%左右（二）科研中应注意的几个问题（二）科研中应注意的几个问题n n尊重科研结果（如阳性、阴性，阴性不一尊重科研结果（如阳性、阴性，阴性不一定没有意义，目前这方面问题较大，即使定没有意义，目前这方面问题较大，即使中华杂志也有。）中华杂志也有。）n n目标一旦确定，要目标一旦确定，要“疯狂疯狂”追求下去，追求下去，“疯狂疯狂”追求但决不搞僵化。实例如下追求但决不搞僵化。实例如下：n n要善于抓住偶发现象（例要善于抓住偶发现象（例1、2）DNA双螺旋结构模型的建立双螺旋结构模型的建立 19

4、53年年4月月5日日自然自然杂志同时刊出杂志同时刊出两篇关于两篇关于DNA研究的重要论文：研究的重要论文：实例实例 沃森、克里克沃森、克里克关于关于DNA螺旋结构螺旋结构 的研究的研究 维尔金斯、富兰克琳维尔金斯、富兰克琳关于关于DNA结结晶的晶的 X-射线衍射研究射线衍射研究当时几个人决定对当时几个人决定对DNA结构采结构采用两种路线进行互补研究用两种路线进行互补研究 维尔金斯等用维尔金斯等用X-射线衍射法求取射线衍射法求取DNA 单晶结构，以客观检测为主要手段。单晶结构，以客观检测为主要手段。沃森等另辟其径，采用建立数理模型的沃森等另辟其径，采用建立数理模型的方法对概念系统做抽象把握。方法

5、对概念系统做抽象把握。善于迂回、拼而不僵善于迂回、拼而不僵n n当时提出当时提出14股学说，但错误地排除了股学说，但错误地排除了2股和股和4股学说，开始建立了股学说，开始建立了3股模型；股模型；n n3股失败，一度灰心，沃森经鲍林鼓舞股失败，一度灰心，沃森经鲍林鼓舞后又确定了单股模型，结果又失败；后又确定了单股模型，结果又失败；n n关键时刻富兰克琳提供照片后受到启关键时刻富兰克琳提供照片后受到启发，建立了双螺旋结构，结果成功。发，建立了双螺旋结构，结果成功。研究背景研究背景 1、沃森、沃森 25岁岁 克里克克里克 37岁岁 维尔金斯维尔金斯 37岁岁 富兰克琳富兰克琳 33岁岁 2、项目仅仅

6、用了、项目仅仅用了18个月（个月（1.5年）年）3、1958年富兰克琳去世，年富兰克琳去世，1962年年3位幸存位幸存 者共同获奖。者共同获奖。（三）关于检验（实验）防护问题（三）关于检验（实验）防护问题（四）发现问题注意寻找原因（四）发现问题注意寻找原因 （有时实验中还需要设计一些小实验）（有时实验中还需要设计一些小实验）（五）（五）如何看科研成果如何看科研成果二、科研立项二、科研立项 1、立项的着手点：、立项的着手点：（1）灵感）灵感 （2）论文中的问题）论文中的问题 （3）系列研究中所得出的问题）系列研究中所得出的问题 （4）创新性课题）创新性课题 经过一系列研究，提出新的观点经过一系列

7、研究，提出新的观点 首次创新首次创新2、项目的类型项目的类型 （1）临床病例性研究（个例、大样本）临床病例性研究（个例、大样本）（2）实验性研究）实验性研究 低难度项目，例如用低难度项目，例如用ELISAELISA法检法检 测一个指标，目前意义不大。测一个指标，目前意义不大。中、高难度项目中、高难度项目 （3 3）方式：回顾性研究；前瞻性研究。）方式：回顾性研究；前瞻性研究。3、如何评价一个科研项目的水平、如何评价一个科研项目的水平n n实验难度实验难度n n实验意义实验意义 n n实验前景实验前景 意义更大意义更大ESR-TNF：（1）血清血清TNF水平与水平与ESR的相关性的相关性（2）不

8、同计量）不同计量TNF对对ESR的体外调控研究的体外调控研究 （3）rTNFR及抗及抗TNF对对TNF的阻断的阻断4、有时实验并不需要太高级的仪器设备、有时实验并不需要太高级的仪器设备0pg TNF 50pg TNF 100pg TNF 500pgTNF 1000pg TNF 皮内注射皮内注射组胺组胺+西咪替丁西咪替丁+苯海拉明苯海拉明组胺组胺+西咪替丁西咪替丁组胺组胺+苯海拉明苯海拉明组胺组胺盐水对照盐水对照免疫组化免疫组化染色阴性染色阴性 胞核染色阳性胞核染色阳性 胞浆染色阳性胞浆染色阳性 弱阳性（弱阳性（+）阳性（阳性（+）强阳性强阳性（+）5、关于系列性项目、关于系列性项目（1）一般系

9、列）一般系列如限于高血压如限于高血压（意义不大）（意义不大）（2）经典系列）经典系列如对表皮细胞角蛋白研究、如对表皮细胞角蛋白研究、T细胞活化机理研究。细胞活化机理研究。（意义非常大）（意义非常大）（3）横向系列）横向系列如对角蛋白基因研究，有如对角蛋白基因研究，有 可能涉及几十个遗传性疾病。可能涉及几十个遗传性疾病。（4）纵向系列）纵向系列例如我们正在进行的实验。例如我们正在进行的实验。6、查阅资料、查阅资料目前检索资料的特点目前检索资料的特点 7、实验设计及构思过程、实验设计及构思过程（讲座重点）（讲座重点）实例（实例（近年来我们对银屑病的一些近年来我们对银屑病的一些研究观点、过程及展望）

10、研究观点、过程及展望）综合结果综合结果 提出问题（一提出问题（一个课题切入点可能有多个，我们着个课题切入点可能有多个，我们着手点是因果关系，跨度大。）手点是因果关系，跨度大。）（1 1）1990-19981990-1998年：年：年：年：对对对对银银银银屑屑屑屑病病病病进进进进行行行行一一一一些些些些探探探探讨讨讨讨性性性性研研研研究究究究，主主主主要要要要为为为为细细细细胞胞胞胞因子测定，意义不大。因子测定，意义不大。因子测定，意义不大。因子测定，意义不大。（2 2）1998-20001998-2000年：年：年：年：将将将将今今今今后后后后课课课课题题题题明明明明确确确确定定定定为为为为“

11、T“T细细细细胞胞胞胞在在在在银银银银屑屑屑屑病病病病发发发发病病病病中中中中的的的的作作作作用用用用研研研研究究究究”，重重重重点点点点研研研研究究究究T T细细细细胞胞胞胞活活活活化化化化部部部部位位位位与与与与TNF-TNF-及及及及IL-8IL-8等等等等的的的的关关关关系系系系。从从从从该该该该期期期期开开开开始始始始，我我我我们们们们的的的的课课课课题题题题虽虽虽虽也也也也有有有有微微微微观观观观研研研研究究究究，但但但但重重重重点点点点在在在在因因因因果果果果关关关关系系系系的的的的研研研研究究究究（跨跨跨跨度度度度大大大大），通过上述研究初步证实两方面的问题：，通过上述研究初步

12、证实两方面的问题：，通过上述研究初步证实两方面的问题：，通过上述研究初步证实两方面的问题：T T细胞活化的部位；细胞活化的部位；细胞活化的部位；细胞活化的部位；与与与与TNF-TNF-及及及及IL-8IL-8等的关系等的关系等的关系等的关系.（3 3 3 3）2001-20032001-20032001-20032001-2003年：年：年：年：因因因因先先先先期期期期T T T T细细细细胞胞胞胞作作作作用用用用已已已已显显显显得得得得非非非非常常常常重重重重要要要要，结结结结合合合合国国国国外外外外T T T T细细细细胞胞胞胞在在在在SCID SCID SCID SCID 鼠鼠鼠鼠的的的

13、的研研研研究究究究，即即即即银银银银屑屑屑屑病病病病T T T T细细细细胞胞胞胞小小小小鼠鼠鼠鼠皮皮皮皮下下下下注注注注射射射射诱诱诱诱发发发发银银银银屑屑屑屑病病病病，2001-20032001-20032001-20032001-2003年年年年，在在在在上上上上述述述述研研研研究究究究基基基基础础础础上，我们又提出如下设想：上，我们又提出如下设想：上，我们又提出如下设想：上，我们又提出如下设想：如如如如果果果果将将将将银银银银屑屑屑屑病病病病患患患患者者者者T T T T细细细细胞胞胞胞与与与与正正正正常常常常人人人人皮皮皮皮肤肤肤肤共共共共培培培培养养养养，结果会如何？结果会如何？结

14、果会如何？结果会如何？我们通过共培养后，进行了三方面的观察：我们通过共培养后，进行了三方面的观察：我们通过共培养后，进行了三方面的观察：我们通过共培养后，进行了三方面的观察：A A A A、表皮增殖调控基因、表皮增殖调控基因、表皮增殖调控基因、表皮增殖调控基因 B B B B、表皮通过时间、表皮通过时间、表皮通过时间、表皮通过时间 C C C C、T T T T细胞活化的特异性细胞活化的特异性细胞活化的特异性细胞活化的特异性通过上述研究，相应明确了：通过上述研究，相应明确了：A A、银屑病患者、银屑病患者T T细胞可导致正常人皮细胞可导致正常人皮 肤调控基因表达异常肤调控基因表达异常 B B、

15、银屑病患者、银屑病患者T T细胞可导致正常人表细胞可导致正常人表 皮通过时间延长皮通过时间延长 C C、银屑病患者、银屑病患者T T细胞活性与超抗原刺细胞活性与超抗原刺 激后的正常人激后的正常人T T细胞活性不同细胞活性不同 由由由由于于于于上上上上述述述述研研研研究究究究是是是是将将将将T T T T细细细细胞胞胞胞与与与与表表表表皮皮皮皮细细细细胞胞胞胞共共共共培培培培养养养养，定定定定量量量量较较较较差差差差，同同同同时时时时T T T T细细细细胞胞胞胞又又又又分分分分几几几几个个个个亚亚亚亚型型型型，所所所所以以以以之之之之后后后后又又又又进进进进一一一一步步步步设设设设想想想想，如

16、如如如果果果果将将将将T T T T细细细细胞胞胞胞分分分分类类类类后后后后进进进进行行行行研研研研究究究究，从从从从而而而而观察究竟是哪种观察究竟是哪种观察究竟是哪种观察究竟是哪种T T T T细胞的作用，即：细胞的作用，即：细胞的作用，即：细胞的作用，即：A A A A、CD3+TCD3+TCD3+TCD3+T细胞与细胞与细胞与细胞与KCKCKCKC共培养共培养共培养共培养 B B B B、CD4+TCD4+TCD4+TCD4+T细胞与细胞与细胞与细胞与KCKCKCKC共培养共培养共培养共培养 C C C C、CD8+TCD8+TCD8+TCD8+T细胞与细胞与细胞与细胞与KCKCKCKC

17、共培养共培养共培养共培养 （观察（观察（观察（观察Ki67Ki67Ki67Ki67等变化）等变化）等变化）等变化）通过系列研究，初步明确所有通过系列研究，初步明确所有通过系列研究，初步明确所有通过系列研究，初步明确所有T T T T细胞均可导致细胞均可导致细胞均可导致细胞均可导致增殖调控基因异常，但作用程度不同，增殖调控基因异常，但作用程度不同，增殖调控基因异常，但作用程度不同，增殖调控基因异常，但作用程度不同，CD4+TCD4+TCD4+TCD4+T细胞细胞细胞细胞作用最强，其次为作用最强，其次为作用最强，其次为作用最强，其次为CD8+TCD8+TCD8+TCD8+T细胞。细胞。细胞。细胞。

18、经经经经过过过过2001-20032001-20032001-20032001-2003年年年年的的的的一一一一系系系系列列列列研研研研究究究究，我我我我们们们们认认认认为为为为表表表表皮皮皮皮增增增增殖殖殖殖过过过过快快快快，可可可可能能能能是是是是由由由由于于于于T T T T细细细细胞胞胞胞到到到到达达达达皮皮皮皮肤肤肤肤后后后后通通通通过过过过复复复复杂杂杂杂的的的的细细细细胞胞胞胞因因因因子子子子网网网网络络络络的的的的作作作作用用用用，首首首首先先先先引引引引起起起起表表表表皮皮皮皮增增增增殖殖殖殖调调调调控控控控基基基基因因因因表表表表达达达达异异异异常常常常，之之之之后后后后可

19、可可可能能能能才才才才发发发发生生生生表表表表皮皮皮皮通通通通过过过过时时时时间间间间缩缩缩缩短短短短。即即即即：T T T T细细细细胞胞胞胞可可可可能能能能是是是是KCKCKCKC增增增增殖殖殖殖过快的主要介质。过快的主要介质。过快的主要介质。过快的主要介质。通通通通过过过过这这这这一一一一阶阶阶阶段段段段的的的的研研研研究究究究，接接接接下下下下来来来来的的的的研研研研究究究究将将将将有有有有两个途径：两个途径：两个途径：两个途径：1 1 1 1、进一步弄清、进一步弄清、进一步弄清、进一步弄清T T T T细胞与表皮之间的关系。细胞与表皮之间的关系。细胞与表皮之间的关系。细胞与表皮之间的

20、关系。2 2 2 2、另一个途径：揭示银屑病患者、另一个途径：揭示银屑病患者、另一个途径：揭示银屑病患者、另一个途径：揭示银屑病患者T T T T细胞活细胞活细胞活细胞活性异常的根源。性异常的根源。性异常的根源。性异常的根源。（4 4 4 4）2003200320032003年以后年以后年以后年以后 在在在在我我我我们们们们的的的的研研研研究究究究基基基基础础础础上上上上，结结结结合合合合国国国国外外外外研研研研究究究究成成成成果果果果，拟拟拟拟对对对对银银银银屑屑屑屑病病病病概概概概念念念念进进进进行行行行更更更更新新新新，2003200320032003年年年年底底底底我我我我们们们们首首

21、首首次次次次系系系系统统统统地地地地提提提提出出出出了了了了银银银银屑屑屑屑病病病病发发发发病病病病的的的的全全全全新新新新观观观观点点点点：骨骨骨骨髓髓髓髓银银银银屑屑屑屑病的发病中枢。病的发病中枢。病的发病中枢。病的发病中枢。中华皮肤科杂志（专论）中华皮肤科杂志（专论）中华皮肤科杂志（专论）中华皮肤科杂志（专论）中国皮肤病性病学杂志（中国皮肤病性病学杂志（中国皮肤病性病学杂志（中国皮肤病性病学杂志（2004200420042004年第年第年第年第8 8 8 8期）期）期）期）Journal of Investigative Dermatology.Journal of Investigat

22、ive Dermatology.Journal of Investigative Dermatology.Journal of Investigative Dermatology.为为为为了了了了证证证证实实实实这这这这一一一一观观观观点点点点，从从从从2003200320032003年年年年开开开开始始始始，我我我我们们们们又又又又进行了新的研究，构建两个创新性研究平台，即：进行了新的研究，构建两个创新性研究平台，即：进行了新的研究，构建两个创新性研究平台，即：进行了新的研究，构建两个创新性研究平台，即：A A A A、骨髓移植构建银屑病动物模型、骨髓移植构建银屑病动物模型、骨髓移植构建银屑病动物模型、骨髓移植构建银屑病动物模型 B B B B、银屑病患者骨髓、银屑病患者骨髓、银屑病患者骨髓、银屑病患者骨髓CD34+CD34+CD34+CD34+细胞体外定向分化细胞体外定向分化细胞体外定向分化细胞体外定向分化 的的的的T T T T细胞功能研究细胞功能研究细胞功能研究细胞功能研究实例：具体路线图实例：具体路线图三、如何撰写论文三、如何撰写论文1、命题及注意事项、命题及注意事项2、目的、目的3、材料与方法、材料与方法4、结果、结果5、讨论、讨论6、参考文献、参考文献