生物：1.1《dna重组技术的基本工具》课件(新人教版选修3)(2).ppt

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1、生物：1.1dna重组技术的基本工具课件(新人教版选修3)(2)Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外严格的设计，并通过体外DNA重组和转重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在型和生物产品。由于基因工程是在DNA分

2、子水平上进行设计和施工的，因此又叫分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做做DNA重组技术或基因拼接技术。重组技术或基因拼接技术。第一节第一节 DNA重组技术的基本工重组技术的基本工具具基因工程培育抗虫棉的简要过程：基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花普通棉花(无抗虫特性无抗虫特性)苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌提取提取提取提取抗虫基因抗虫基因棉花细胞棉花细胞(含抗虫基因含抗虫基因)棉花植株棉花植株(有抗虫特性有抗虫特性)重组重组DNA导入导入形成形成DNA重组技术的基本工具准确切割准确切割DNA的工具（的工具（“分子手术刀分子手术刀”）DNA片段的连接工具（片段的连接工具（“分子缝合针分子缝合

3、针”）基因转移工具（基因转移工具（“分子运输车分子运输车”）基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：行基因操作最少需要以下三种工具：一、一、“分子手术刀分子手术刀”限制性核酸内限制性核酸内切酶切酶 1、作用、作用限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶能识别双链能识别双链DNA分分子的某种特定的核苷酸序列子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中，并在使每一条链中特特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。断开。磷酸二

4、酯键磷酸二酯键即脱氧核糖、磷即脱氧核糖、磷酸之间的连接酸之间的连接AAT TGGGGCCAAT TCCT TT TCCGGAAAA 大多数限制酶的识别序列由大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组个核苷酸组成，例如，成，例如，EcoR、Sma，也有少数有，也有少数有4、5或或8个核苷酸组成。个核苷酸组成。G A A T T C C T T A A G 中轴线中轴线C T T A A G A A T T C G 大肠杆菌的一种限制酶（大肠杆菌的一种限制酶（EcoR)能识能识别别GAATTC序列，序列，SmaI识别识别CCCGGG序列序列:C C C G G G G G G C C C C C C G

5、 G G G G G C C C 黏性末端黏性末端平末端平末端 原核生物很容易受到自然界中外源原核生物很容易受到自然界中外源DNADNA的入侵，的入侵，但是长期的进化过程中，这些原核生物却没有因为但是长期的进化过程中，这些原核生物却没有因为外源外源DNADNA的入侵而灭绝。的入侵而灭绝。根据我们刚刚掌握的知识，你能推测这其中的根据我们刚刚掌握的知识，你能推测这其中的原因吗？原因吗？原核生物细胞中的限制酶会将外源原核生物细胞中的限制酶会将外源DNADNA切割掉，使之切割掉，使之失效，以保证自身的安全，但是不会切割自身的失效，以保证自身的安全，但是不会切割自身的DNADNA，这是原核生物在长期进化

6、过程中形成的一套防御机制。这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。2、DNA连接酶连接酶“分子缝合针分子缝合针”作用作用把两条把两条DNA末端之间的缝隙末端之间的缝隙“缝缝合合”起来。起来。G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 GP AP 限制酶切割后有两种不同的结果，一限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用么恢复它们的连接时，所用DNA连接连接酶是否一样呢？酶是否一样呢？E.coliDNAE.coliDNA连接酶：连接黏性末端连接酶

7、：连接黏性末端T T4 4DNADNA连接酶：连接黏性末端和平末端连接酶：连接黏性末端和平末端DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶连接连接DNA链链双链双链单链单链连接部位连接部位两两DNA片段之间的片段之间的磷酸二酯键磷酸二酯键将游离的脱氧核将游离的脱氧核苷酸通过磷酸二苷酸通过磷酸二酯键连接起来。酯键连接起来。寻根问底寻根问底：DNA连接酶和连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？聚合酶是一回事吗？为什么？基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，还的基因在乙生物体内进行表达，还得将这个基因送到乙生物的细胞内得将这个基因送到乙

8、生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。就是载体。质粒质粒拟核拟核大肠杆菌细胞大肠杆菌细胞作为载体的必要条件能自我复制能自我复制有切割位点有切割位点有标记基因有标记基因对受体细胞无害对受体细胞无害随堂练习：1、关于限制酶的说法中，正确的是（、关于限制酶的说法中，正确的是（）A、限制酶是一种酶，只识别、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列碱基序列B、EcoRI切割的是切割的是GA之间的氢键之间的氢键C限制酶一般不切割自身的限制酶一般不切割自身的DNA分子，分子，只切割外源只切割外源DNAD限制酶只存在于原核生物中限制酶只存在于原核生物中答案：答案：

9、C2.（多选）（多选）有关基因工程的叙述中，错有关基因工程的叙述中，错误的是误的是 A、基因工程技术能定向地改造生物、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种的遗传性状，培育生物新品种 B、重组、重组DNA的形成在细胞内完成的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体、质粒都可作为运载体答案：答案：BD3.下列四条下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是分子，彼此间具有粘性末端的一组是 A B C D答案：答案：D股票配资,配资平台,配资公司,配资炒股 http:/ wpe70 xrz 滴滴的解释着。旁边被百

10、蝶遗忘的慕容凌娢可谓是坐立不安，不知该怎么做，只好呆呆地看着他们沉浸在自己的“二人世界”之中。“韩公子，昨天礼部张大人来过，百蝶听他说明年的会试定会由他主持”百蝶突然转移了话题。“啪”的一声，那位公子猛然将手中杯子放在桌上，茶水溅到了桌子。把正在发愣的慕容凌娢吓了一跳。喝茶就喝茶，怎么突然就生气了，我想喝还不行呢说好了回来就吃东西，可我都等了这么多章了，还只是坐在这里当背景再不吃东西我就真的要挂了！“笑话！会试的主考官向来是由圣上定夺，他一个礼部侍郎竟敢如此揣测圣意，真是太放肆了。”他皱了皱眉，然后脸上出现了不屑的笑，“倒是百蝶，你怎么开始在意这种事了呢？”“百蝶不是有意要惹公子生气的。”百蝶

11、低着头小声说，颇有一副无辜的样子，“只是只是那天张大人喝多了酒，说得话有些猖狂”“无妨，我又不会怪你。”他爱抚的将百蝶搂在怀里，安慰她道，“这种人的言论你不要太在意就是了。”猖狂也是要有本钱的，谁让人家权高位重，你们在这说这些有什么用？再说下去，一条人命就要被你们给间接杀害了。慕容凌娢不满的撇了撇嘴。不行，他们两个在那里不停地唧唧歪歪，鬼知道什么时候会说完。我必须想办法让那个撩妹的家伙赶快离开，不然我迟早是饿死的料。“据我所知，会试历来是由礼部主持。”慕容凌娢生硬的插嘴道，“所以不管你怎么说，都是改变不了这个事实的。”“这位是”那人在此时才注意到了慕容凌娢。原来你刚才根本就没有正眼看我啊？现在

12、才发现我的存在，也太不尊重人了吧慕容凌娢平复了一下自己的情绪，仔细想想，这也不能怪他啊，毕竟自己在这里如坐针毡的等了半天，都没有敢发表一下自己的意建，他没注意也是可以理解的。“这是我的远房表妹，初次来京城。没见过世面，也不懂礼数，还请公子恕罪。”百蝶一边介绍一边用眼神示意慕容凌娢别在多说，“白绫，还不快给韩公子赔罪！”为什么要我给他赔罪？我说的明明就是实话啊。慕容凌娢看了他一眼，并没有要道歉的意思。那人没有等到慕容凌娢的道歉，倒是产生了一丝惊奇。“原来如此，我说怎么没见过，原来不是醉影楼的人啊。”他饶有兴趣的看了一眼慕容凌娢，继续说到，“这醉影楼里，还从未有人敢反驳我。”“没有人反驳不代表你是正确的，而且大多数客观存在的事情即是不用反驳，也是事实。”“你的大道理还真有意思。”他起身便准备离去，“别被你所相信的真理给骗了。”“韩公子莺凝，去送送韩公子。”百蝶对站在走廊上的一个女子说道。可算是走了，慕容凌娢心里高兴的不能行，可偏偏还要装出什么都不知道的样子。可