临床细菌学检验的质量控制电子教案.ppt
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1、临床临床(ln chun)(ln chun)细菌学检验的质量控细菌学检验的质量控制制第一页,共55页。概念概念(ginin)l质量控制(质量控制(Quality control)l 是临床微生物学实验室为了保证是临床微生物学实验室为了保证(bozhng)检验结果实事求是地反检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系映客观存在而建立的操作程序体系第二页,共55页。目的目的(md)l临床微生物学的质量控制是保证细菌临床微生物学的质量控制是保证细菌(xjn)的直接涂片、培养、鉴定、药敏试的直接涂片、培养、鉴定、药敏试验及血清学试验等的准确性,避免因操作验及血清学试验等的准确性,避免因操作变化
2、导致检验结果错误,造成误诊变化导致检验结果错误,造成误诊第三页,共55页。内容内容(nirng)l室内质量控制室内质量控制l 实验室内部实验室内部 质量保证质量保证的核心和基础的核心和基础l室间质量控制评价室间质量控制评价l 外部外部(wib)组织或机构组织或机构 质量评价质量评价第四页,共55页。室内质量室内质量(zhling)控制控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测(jin c)培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保
3、存标准菌株的来源和保存第五页,共55页。一、对细菌检验人员一、对细菌检验人员(rnyun)的要求的要求高度的主观判断力高度的主观判断力 个人的技能、经验个人的技能、经验 细菌学的专业细菌学的专业(zhuny)水平水平培训班培训班实验室进修实验室进修(jnxi)学术交流学术交流专业期刊专业期刊第六页,共55页。室内室内(sh ni)质量控制质量控制对细菌检验对细菌检验(jinyn)人员的要求人员的要求 操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验临床标本检验(jinyn)过程的质量控制过程的质
4、量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存第七页,共55页。二、操作手册二、操作手册l各级人员的职责和权限各级人员的职责和权限l实验室安全措施实验室安全措施l标本采集和处理指南标本采集和处理指南l细菌检验项目细菌检验项目l培养基和试剂的配制方法培养基和试剂的配制方法l室内室内(sh ni)和室间质量控制和室间质量控制l参考数据参考数据 第八页,共55页。二、操作手册二、操作手册参考书:参考书:诊断细菌学诊断细菌学实用临床微生物诊断学实用临床微生物诊断学临床微生物学诊断与图解临床微生物学诊断与图解(tji)全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程临床微生物学和微生物学检验临床微生物学和微生物
5、学检验Manual of Clinical Microbiology第九页,共55页。室内室内(sh ni)质量控制质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制试剂、染色试剂、染色(rns)液及抗血清的质控液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存第十页,共55页。三、仪器设备的功能三、仪器设备的功能(gngnng)监测监测l高压灭菌器:定期监测(每月一次)高压灭菌器:定期监测(每月一次)l 生生物物(shngw)指指示示剂剂:嗜嗜热热脂肪芽
6、孢杆菌脂肪芽孢杆菌l 化学指示剂:变色的指示带化学指示剂:变色的指示带l培养箱、冰箱、水浴箱:培养箱、冰箱、水浴箱:l 每每日日早早、晚晚两两次次温温度度观观测测,绘绘制制温温度度曲曲线图线图第十一页,共55页。三、仪器设备的功能三、仪器设备的功能(gngnng)监测监测l厌氧培养厌氧培养(piyng)装置:装置:l 化学标记:化学标记:美蓝美蓝l 生物学指标:铜绿假单胞菌生物学指标:铜绿假单胞菌lCO2培养培养(piyng)箱箱:l 每天检查箱内的每天检查箱内的CO2含量含量第十二页,共55页。三、仪器设备的功能三、仪器设备的功能(gngnng)监测监测l生物安全柜:生物安全柜:l 定期更换
7、滤网,紫外线每定期更换滤网,紫外线每3月检查月检查1次次l细菌细菌(xjn)培养仪培养仪:l 每批培养瓶进行少量生长试验每批培养瓶进行少量生长试验l 有效期内使用有效期内使用l微生物鉴定仪微生物鉴定仪l 及时更新软件及时更新软件l 每批号鉴定卡用标准菌株测定每批号鉴定卡用标准菌株测定第十三页,共55页。三、仪器设备的功能三、仪器设备的功能(gngnng)监测监测 表表1仪器设备的质量控制仪器设备的质量控制(kngzh)标准标准设备控制标准允许范围高压灭菌器121121培养箱351水浴箱370.5冰箱42低温冰箱-205CO2培养箱5%10%10%第十四页,共55页。室内室内(sh ni)质量控
8、制质量控制对细菌检验人员的要求对细菌检验人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测 培养基的质量控制培养基的质量控制(kngzh)试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验过程的质量控制临床标本检验过程的质量控制(kngzh)标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存第十五页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(1)配制记录:配制记录:培养基的制作过程培养基的制作过程(guchng)必须统一必须统一无无论论是是培培养养基基或或添添加加剂剂的的剂剂量量、pH值值、高高温温灭菌的时间或温度,都需遵照规定灭菌的时间或温度,都需遵
9、照规定培培养养基基名名称称、本本批批配配制制量量、配配方方、配配制制日日期期和和配制人员姓名都必须详细记录配制人员姓名都必须详细记录 第十六页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(2)培养基外观的检查:培养基外观的检查:新新配配或或新新购购入入的的培培养养基基必必须须先先以以肉肉眼眼检检查查其其颜颜色色(yns)与与透透明明度度,培培养养基基应应澄澄清清,无浑浊无浑浊培培养养基基的的色色泽泽不不正正常常应应测测其其pH值值,不不得得超超过所预期值的过所预期值的0.2平平板板培培养养基基最最易易脱脱水水,应应放放在在严严密密的的有有盖盖容容器器内内或或塑塑料料袋袋
10、内内。这这样样平平板板内内培培养养基基可可保保存存两两周周左左右右,试试管管内内培培养养基基可可保保存存1-2个月个月第十七页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(3)无菌试验:无菌试验:每批配好的培养基须进行无菌试验每批配好的培养基须进行无菌试验随随机机选选取取5%10%的的量量,如如果果配配制制大大量量的的培培养养基基,则则任任意意选选取取10个个平平板板或或管管装装培培养养基基,35温温度度下下隔隔夜夜(gy)培培养养,证明无菌生长为合格证明无菌生长为合格第十八页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(4)培养基的量:培养基的
11、量:平板培养基的厚度平板培养基的厚度(hud)一般为一般为3mm (90mm平皿平皿+1520ml培养基)培养基)药敏试验用为药敏试验用为4mm (90mm平皿平皿+25ml培养基)培养基)斜面不超过试管的斜面不超过试管的2/3第十九页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(5)培养基的有效性试验:培养基的有效性试验:每每一一批批新新制制或或新新购购的的培培养养基基,使使用用前前均均须须取取已已知知性性质质的的标标准准菌菌株株试试验验是是否否能能支持,区分或选择某类细菌的生长支持,区分或选择某类细菌的生长培培养养基基的的试试验验结结果果需需要要加加以以记记录录,项
12、项目目包包括括试试验验日日期期、试试验验结结果果以以及及实实验验者者的的签签名名等等。且且此此记记录录本本需需便便于于检检验验室室人人员员(rnyun)的的查查看看,以以便便能能随随时时解解决任何发生的难题决任何发生的难题 第二十页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制表表2常用常用(chnyn)培养基的质培养基的质量控制量控制培养基质控菌种生长情况结果血琼脂巧克力琼脂营养琼脂麦康凯琼脂中国蓝琼脂SS琼脂沙保罗琼脂化脓链球菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌福氏志贺菌金黄色葡萄球菌产气肠杆菌鼠伤寒沙门菌大肠埃希菌白色假
13、丝酵母菌+-+-+-+明显乙型溶血环甲型溶血环24h生长生长分解乳糖,菌落红色不分解乳糖,菌落无色透明不生长分解乳糖,菌落蓝色不分解乳糖,菌落无色不生长粉红色菌落无色菌落,中心黑色第二十一页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制表表2常用培养基的质量常用培养基的质量(zhling)控制控制生长生长生长,生长,溶血溶血生长生长部分抑制部分抑制生长,黄色菌落生长,黄色菌落生长,蓝绿色菌落生长,蓝绿色菌落大量生长大量生长抑制生长抑制生长+-脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌产气荚膜梭菌菌产气荚膜梭菌菌空肠弯曲菌空肠弯曲菌大肠埃希菌大肠埃希菌霍乱弧菌霍乱弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌霍乱弧菌
14、霍乱弧菌大肠埃希菌大肠埃希菌厌氧血平板厌氧血平板弯曲菌琼脂弯曲菌琼脂TCBS琼脂琼脂碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水结果结果生长情况生长情况质控菌种质控菌种培养基培养基第二十二页,共55页。四、培养基的质量四、培养基的质量(zhling)控控制制(6)培养基的有效期:培养基的有效期:培培养养基基有有效效期期的的长长短短应应参参考考诊诊断断细细菌菌学学书书籍籍若若购购买买现现用用的的培培养养基基,均均应应注注意意有有效效期期的的标标示示是是否否正正确确,如如血血平平板板的的有有效效期期为为3星星期期(xngq),厌厌氧氧菌菌分分离离培培养养基基为为1-2星星期期(xngq)等等 第二十三页,共55页。室
15、内室内(sh ni)质量控制质量控制对细菌检验对细菌检验(jinyn)人员的要求人员的要求操作手册操作手册仪器设备的功能监测仪器设备的功能监测培养基的质量控制培养基的质量控制 试剂、染色液及抗血清的质控试剂、染色液及抗血清的质控临床标本检验临床标本检验(jinyn)过程的质量控制过程的质量控制标准菌株的来源和保存标准菌株的来源和保存第二十四页,共55页。五、试剂五、试剂(shj)、染色液及抗血清、染色液及抗血清的质控的质控染色液的质量控制染色液的质量控制 染色液要标明配制或购入日期,必须选用适染色液要标明配制或购入日期,必须选用适当的标准菌株作阳性及阴性对照,来鉴定当的标准菌株作阳性及阴性对照
16、,来鉴定(jindng)染色液的性能染色液的性能革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制革兰染色用金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌制备浓菌悬液,经高压灭菌后冰箱保存,作备浓菌悬液,经高压灭菌后冰箱保存,作为革兰染色的质量控制,每次质控与标本为革兰染色的质量控制,每次质控与标本同步进行同步进行第二十五页,共55页。五、试剂五、试剂(shj)、染色液及抗血清的、染色液及抗血清的质控质控各种染色液的监控菌株各种染色液的监控菌株染色液染色液 阳性对照菌阳性对照菌 阴性阴性对照菌对照菌 监控频度监控频度革兰染色液革兰染色液 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(p to qi jn)大肠埃希菌大肠埃希菌 每天每天抗酸染
17、色液抗酸染色液 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 每次每次 异染颗粒染色液异染颗粒染色液 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 每次每次荚膜染色液荚膜染色液 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌 每批每批鞭毛染色液鞭毛染色液 普通变形杆菌普通变形杆菌 福氏福氏志贺菌志贺菌 每次每次第二十六页,共55页。五、试剂五、试剂(shj)、染色液及抗血清、染色液及抗血清的质控的质控试剂的质量控制试剂的质量控制各类试剂,在配制或购入后均应进行各类试剂,在配制或购入后均应进行“有有效效”试验,用已知阳性及阴性试验,用已知阳性及阴性(ynxng)菌株进行试验菌株进行试验试剂须根据标示的配制要领或制造者的指试剂须根据标示的配制要领或制造者的指
18、示作适当的储存示作适当的储存对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时对较稳定的试剂如靛基质试剂应在配制时及每周予以检测核对,凡不稳定的试剂及每周予以检测核对,凡不稳定的试剂每天使用时均应检测,合格后才能使用每天使用时均应检测,合格后才能使用 第二十七页,共55页。五、试剂五、试剂(shj)、染色液及抗血清、染色液及抗血清的质控的质控表表3常用试剂的阳性、阴性常用试剂的阳性、阴性(ynxng)对照菌株对照菌株常用试剂 阳性对照菌株阴性对照菌株凝固酶试剂金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验用试剂化脓链球菌V-P试验用试剂阴沟肠杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌阴沟肠杆菌氧化酶试剂铜绿假单胞菌大肠埃希菌靛基质靛基质
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