新高考 一轮复习 人教版 细胞工程 教案.docx
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1、第二讲细胞工程素能目标备考明确理解能力从细胞结构与功能观角度理解细胞工程的 原理生命观念信息获取能力构建细胞工程操作技术的基本流程模型科学思维学究 科探探究动植物细胞工程的应用学究 科探社会 责任关注细胞工程最新科技进展,关注克隆 动物及其对人类社会的可能影响综合运 用能力素 养 与 能 力理考点提素能O考点一植物细胞工程必备知识(一)植物细胞工程的基本技术.细胞工程的理论基础细胞的全能性细胞全能性的概念:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种 细胞的潜能,即细胞具有全能性。(2)在生物体内全能性不能表达的原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会有选 提性地表达出各种
2、蛋白质,从而构成生物体的不同组织和器官。1 .植物组织培养技术(1)概念理解培养对象:离体的植物器官、组织或细胞。培养条件:无菌、人工配制的培养基、相关激素等。培养结果:形成完整的植株。原理:植物细胞具有全能性。操作流程操作实例菊花的组织培养操作实例菊花的组织培养解析培养蛇干细胞时C02的作用是维持培养液pH的稳定,A错误;不同细胞中基因的 表达情况不同,因此蛇毒腺微型组织基因的表达与蛇干细胞不完全相同,B正确;分泌毒液 的细胞是蛇干细胞分化形成的,C错误;由于不同细胞的结构和功能不同,因此培养蛇毒腺 微型组织与哺乳动物细胞培养的条件不完全相同,D错误。答案B【科学思维归纳概括 融会贯通】归纳
3、比拟植物组织培养与动物细胞培养比拟工程植物组织培养动物细胞培养理论基础植物细胞全能性细胞增殖培 养 基类型固体或半固体培养基液体培养基成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基 酸、琼脂葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、 促生长因子、动物血清等取材植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的 器官或组织关键环节细胞的脱分化和再分化细胞增殖和癌变结果新的组织或植株个体,可以表达全能 性新的细胞系或细胞株,不形成个体, 不表达全能性应用植株快速繁殖脱毒植株的培育制备人工种子 生产约物、杀虫剂等 转基因植物的培育蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育检测有毒物质生理、病理、药埋学研究相同点两技术手段培
4、养过程中细胞都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆, 都不涉及减数分裂均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件易错提醒有关植物组织培养与动物细胞培养的三点提醒(1)植物组织培养过程中存在脱分化和再分化,而动物细胞培养过程中没有脱分化和再分化 过程。植物组织培养可获得新个体,表达了细胞的全能性,而动物细胞培养只能得到细胞,没 有表达细胞的全能性。两种技术手段培养过程中都进行有丝分裂,不涉及减数分裂。【对点落实】1. (2020德州一模)如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图,以下表达错误的选项是()甲乙 丙TA.甲一乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养
5、C.丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象D. 丁过程是传代培养的细胞,不能保持二倍体核型解析:选D 甲(剪碎的肾脏组织块)一乙(制成细胞悬液)过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理,分散成单个细胞,A正确;丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养,B正 确;丙(原代培养过程)和丁(传代培养过程)均会出现细胞贴壁和接触抑制现象,C正确;丁 过程是传代培养过程,该过程少局部细胞遗传物质可能发生了变化,大局部能保持二倍体核 型,D错误。2. (2020北京延庆模拟)6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6PD)有F和S两种类型,分别由一对等位基 因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白醵
6、处理,进行原代培养,然后 用不同的单个细胞分别进行单克隆培养。分别从原代培养和各单克隆培养取样,对G-6PD 蛋白进行电泳检测,结果如以下图所示。以下表达错误的选项是()原代培养细胞单克隆培养细胞I 123456789S型蛋白 F型蛋白A.原代培养的细胞中都含有XF基因和XS基因B.原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞C.单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同D.实验结果可能是女性细胞中一条X染色体随机失活导致的解析:选C 将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理,进行原代培养,由于细胞 分裂过程中遗传物质不变,所以原代培养的细胞中都含有XF基因和
7、XS基因,A正确;对原 代培养的细胞进行电泳检测,结果出现F型蛋白和S型蛋白,而单克隆培养的细胞只能出 现一种条带,说明原代培养的细胞为不同类型,即原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同 时检测了多个细胞,B正确;动物细胞培养过程中细胞分裂方式为有丝分裂,遗传物质不变, 故细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同,C错误;原代培养的细胞后代用胰蛋 白酶处理形成的单个细胞进行克隆培养,在克隆培养的后代中,有的细胞群只合成F型蛋 白,有的细胞群只合成S型蛋白,说明XFXS的雌性体细胞的两个X染色体会有一个随机失 活,且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化,D正确。【社会责任关注社
8、会服务生活】干细胞是一类具有自我复制能力并能分化成其他类型功能细胞的多潜能细胞,因而具有巨 大的基础研究价值和临床应用前景。干细胞研究也是目前全球范围内生物医学领域的热点和 焦点。干细胞应用中可能存在潜在危险和产生伦理问题。【对点落实】3.(2020.东营二模)日本京都大学的教授将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达, 使这个细胞成为具有类似干细胞功能的多能干细胞(iPS细胞)。如图为该技术在人体细胞中 实验示意图,据图分析以下说法正确的选项是()关键基因表达细胞供体肌肉细胞 iPS细胞匚二JA.iPS细胞与肌肉细胞有相同的遗传物质,关键基因在肌肉细胞中能复制、转录和翻译B.过程是基因选择
9、性表达的结果,图示过程表达了 iPS细胞具有全能性C.用该技术得到的新生器官替换供体病变器官,可防止异体移植产生的免疫排斥反响D. 4个关键基因表达过程将改变肌肉细胞的细胞质环境,使iPS细胞功能趋向专门化 解析:选C 肌肉细胞中无关键基因,因此与iPS细胞的遗传物质不同,A错误;图示过程 中没有新个体的产生,因此没有表达出细胞的全能性,B错误;用该技术得到的新生器官替 换供体病变器官,可防止异体移植产生的免疫排斥反响,C正确;由图可知,4个关键基因 的表达使肌肉细胞发生了 “脱分化”,使iPS细胞功能趋向多能化,D错误。4.角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞,角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重
10、要。回答 以下问题:将角膜缘组织剪碎,加入 处理,可获得大量游离分散的细胞。通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内,原因是 o离体培养角膜缘干细胞时,一般需要在合成培养基中加入 等天然成分,培养时所需的气体主要有 O研究发现,细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化。放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的 功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在(填“复制”“转 录”或“翻译”)水平。解析:(1)将动物组织剪碎后,加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,可获得大量游离分散的细 胞。(2)一般来说,10代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型,故通常角膜缘干细胞的 培养控制在10代以内。(3)离体培养动物细
11、胞时,一般需要在合成培养基中加入血清(或血浆) 等天然成分,培养时所需的气体主要有02和C02。(4)放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶 的功能进而抑制细胞因子的调控,RNA聚合酶是催化DNA转录形成RNA的酶,故被抑制 的过程发生在转录水平。答案:(1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶保持细胞正常的二倍体核型血清(或血浆)02和C02(4)转录考点三动物细胞融合技术与单克隆抗体(一)动物细胞融合技术1 .概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2 .结果:形成杂交细胞,且具有原来两个或多个细胞的遗传信息。3 .诱导方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。4 .意义:突破了有性杂交的局限,
12、使远缘杂交成为可能。5 .应用(1)是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)杂交瘤技术为制造单克隆抗体开辟了新途径。(二)单克隆抗体及其应用.单克隆抗体的制备(1)制备原理B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。骨髓瘤细胞特点:能在体外大量增殖。杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。(2)制备过程注射特定 的抗原免疫 小鼠培养骨髓 瘤细胞/骨髓瘤细胞 诱导融合多种B淋巴细胞多种杂 交细胞lOI用焉定矗择培养基筛选,未融合或同种 V融合的细胞死亡。杂交瘤细胞克隆上述杂交细胞3券J专一抗体检验阳性I将不同种杂交细胞分开,并克隆专一 抗体,
13、检验阳性细胞单克隆抗体.单克隆抗体的应用作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原便鉴定中发挥重要作用。用于运载药物和治疗疾病。【基础小题】.判断正误(1)植物原生质体融合与动物细胞融合原理是相同的。(J)灭活的病毒能促进动物细胞融合,但不能促进植物细胞融合。(J)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞。(X)(4)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。(X)(5)杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体。(J).教材拾遗假设只考虑细胞间的两两融合,诱导后形成的融合细胞有几种?提示:有三种。即同种细胞融合(两种)和不同细胞融合(一种)。制备单克隆抗
14、体时,不直接用经过免疫的B淋巴细胞来获得单克隆抗体的原因是什么? 提示:用于获得杂交瘤细胞的B淋巴细胞为浆细胞,是高度分化的动物细胞,培养时很难 恢复分裂能力,不能进行无限增殖,难以获得单克隆抗体。选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?提示:第一步筛选的目的是获得杂交瘤细胞。第二步筛选的目的是获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。的杂交瘤细胞。核心素养【典例导引】(202。全国卷I )为研制抗病毒A的单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实 验流程。回答以下问题:上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤: (3)为了得到
15、能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选。图中筛选1所采 用的培养基属于,使用该培养基进行细胞培养的结果是 o图中筛选2含屡次筛选,筛选所依据的基本原理是 o假设要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,可采用的方法有(答出2 点即可)。解析(1)实验前给小鼠甲注射病毒A,其目的是刺激机体发生免疫反响,从而产生能够分 泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。(2)制备单细胞悬液的主要实验步骤:从健康动物体内取出 组织块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞,然 后用培养液将分散的细胞稀释制成单细胞悬液。(3)图中筛选1采用特定的选择培养基,在 该培养基
16、上,未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞(杂 交瘤细胞)才能生存。图中筛选2含屡次筛选,利用抗原与抗体特异性结合的原理,就可获 得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(4)要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量 增殖,可将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖。答案(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞(2)取小鼠甲脾脏剪碎, 用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞,加入培养液制成单细胞悬液(3)选择培养基 只有 杂交瘤细胞能够生存 抗原与抗体的反响具有特异性(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内 增殖;将杂交瘤细胞在体外培养【科学思维归纳概
17、括 融会贯通】1.比拟植物体细胞杂交和动物细胞融合工程工程植物体细胞杂交动物细胞融合2.单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理除去细胞壁使细胞分散开相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶诱导 方法物理法:电融合法、离心法;化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+高pH融合法物理法:电融合法;化学法:聚乙二醇融合法; 生物法:灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合相同点动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导动
18、物细胞融合的 方法与植物原生质体融合的方法相似工程第一次筛选第二次筛选筛选 原因诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的 刺激,所以经选择性培养获得的杂交 瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选 方法用特定的选择培养基筛选:未融合的 细胞和同种细胞融合后形成的细胞 (“BB ”细胞、“瘤一瘤”细胞)都 会死亡,只有融合的杂交瘤细胞 (“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养,在每个孔只有一 个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培 养和抗体检测,经屡次筛选得到能产 生特异性抗体的细胞群筛选 目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞【对点落实】1.(多项选择)
19、(2019江苏高考)如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄喋吟磷 酸核糖转移酶(HGPRT),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。以下表达 正确的选项是()免疫B细胞骨髓瘤细胞培养中死亡培养液中死亡A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础解析:选ACD 诱导动物细胞融合的因素有灭活的仙台病毒、聚乙二醇、电激等,A项正 确。两两融合的细胞包括:免疫B细胞与免疫B细胞的融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的 融合、免疫B细胞与骨髓瘤细胞的融合。其中骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融
20、合细胞因缺乏 次黄喋吟磷酸核糖转移酶,不能在HAT培养液中生长,B项错误。杂交瘤细胞还需要进行 克隆化培养和抗体检测,经过屡次筛选才能用于生产,C项正确。细胞融合的基础是细胞膜 的流动性,D项正确。2. (2020.德州一模)抗PD-L1单克隆抗体能与癌细胞膜外表的PD-L1特异性结合,因而具有 治疗某些癌症的作用。如图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图,以下表达错误的选项是()PEGB淋巴细胞一鼠瘤细胞I稀释|1| 多孔玻璃板在培养基中筛选11焉12111 1细胞集落呈嘤加入PD-L1抗原1 1 停- 1 M 1 1 1 1力 I IZK1 1 1A.在别离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD
21、-L1进行免疫B.多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞C.图中细胞集落ad既能大量繁殖,又能产生抗体D.图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体解析:选B 在别离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1进行免疫,产生已免疫的B淋 巴细胞,A正确;多孔玻璃板中的细胞有未融合的B淋巴细胞和鼠瘤细胞,同种细胞融合 的细胞,B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞,B错误;图中细胞集落ad表示杂交瘤细胞, 既能大量繁殖,又能产生抗体,C正确;图中细胞集落a能产生抗PD-L1抗体,可扩大化 培养生产抗PD-L1单克隆抗体,D正确。3. (2020淄博一模)IgM是机体被病毒侵入后最先分
22、泌的抗体,IgG是机体感染病毒免疫应答 产生的主要抗体。临床上可通过血清学检测判断机体是否感染病毒,如采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清中的IgG和IgM抗体,检测试剂盒中的酶标二抗即抗人IgG抗体和 抗人IgM抗体。其原理是将病毒抗原包被在96孔酶标板上,加入患者血清,再分别加入辣 根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体,假设患者感染过该病毒,就可检 出针对该病毒的特异性抗体,相关表达错误的选项是( )A.与核酸检测相比,该方法操作简单方便,可显著提高检测效率B.利用单克隆抗体的特性,该方法可检测患者体内病毒是否被清除C.制备单克隆抗体时,以人IgG和人Ig
23、M为抗原分别免疫小鼠D.制备单克隆抗体时,第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞解析:选B 核酸检测是基因探针和单链DNA进行碱基互补配对,需要进行DNA切割和 解旋,比拟复杂,而抗体检测操作简单方便,可显著提高检测效率,A正确;利用单克隆抗 体的特性,该方法可检测患者体内是否含有病毒,B错误;制备单克隆抗体时,以人IgG和 人IgM为抗原分别免疫小鼠,使得小鼠产生特定的B淋巴细胞,能产生抗人IgG抗体和抗 人IgM抗体,C正确;制备单克隆抗体时,第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞,第二次 筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞,D正确。【社会责任关注社会 服务生活】单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等特点。
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