临床医学检验红细胞的检查以及临床意义.ppt
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1、红细胞检查红细胞检查 红细胞红细胞(red blood cell,RBC;erythrocyte)l血液中数量最多的有形成分血液中数量最多的有形成分l主要成分:主要成分:血红蛋白血红蛋白l主要功能:主要功能:呼吸载体呼吸载体l直径:直径:6.7 9.5 um,平均,平均7.2 uml形状:形状:双凹圆盘状双凹圆盘状RBC红细胞的生成红细胞的生成Stem cell Epo原始红细胞原始红细胞早幼红细胞早幼红细胞 中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞网织红细胞 成熟红细胞成熟红细胞释放入血释放入血72h48h平均寿命平均寿命120 d红细胞计数红细胞计数(red blood cell
2、 countred blood cell count,RBCRBC)定义:定义:单位体积(每升)血液内的红细胞数量单位体积(每升)血液内的红细胞数量原理:原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池,于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数,并换池,于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数,并换算得每升血液中红细胞数算得每升血液中红细胞数(/L)红细胞稀释液红细胞稀释液稀释液:稀释液:保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗保护计数细胞,破坏非计数细胞,同时抗 凝,要求不含杂质凝,要求不含杂质红细胞稀释液:红细胞稀释液:Hayem液,液,由氯化钠、结晶硫酸钠、由
3、氯化钠、结晶硫酸钠、氯化高汞组成氯化高汞组成作用:作用:氯化钠氯化钠调节渗透压,调节渗透压,结晶硫酸钠结晶硫酸钠防止细胞防止细胞 粘连,粘连,氯化高汞氯化高汞防腐防腐 计数方法计数方法 手工法手工法:取样:取样 稀释稀释 计数计数 计算计算 仪器法仪器法:电阻抗分析或激光分析:电阻抗分析或激光分析 手工法手工法10 uL末梢血末梢血+2 ml稀释液稀释液 混匀稀释混匀稀释 充池充池 计数计数 计算计算成年男性成年男性(4.0-5.5)1012/L成年女性成年女性(3.5-5.0)1012/L初生儿初生儿 (6.0-7.0)1012/L外周血红细胞参考值外周血红细胞参考值思思 考考手工法手工法V
4、S仪器法?仪器法?血红蛋白测定血红蛋白测定(hemoglobin,Hb)l血红蛋白的组成血红蛋白的组成 珠蛋白珠蛋白(globin)()(4条肽链条肽链)亚铁血红素亚铁血红素(heme)()(1个个)血红蛋白血红蛋白l珠蛋白具有种属特异性,含有两条珠蛋白具有种属特异性,含有两条链链和两条和两条非非链链 正常成人的正常成人的Hb包括:包括:HbA 22(90%以上)以上)HbA2 22(2 3%)HbF 22(2%以下;新生儿占以下;新生儿占70%)l 受激素调节受激素调节 红细胞生成素红细胞生成素:直接:直接 雄激素雄激素:直接和间接:直接和间接l 自身调节自身调节 血红素血红素过多过多 氧化
5、为氧化为高铁血红素高铁血红素负反馈负反馈l 血红蛋白的合成血红蛋白的合成l 血红蛋白的代谢血红蛋白的代谢珠蛋白珠蛋白 氨基酸氨基酸血红素血红素 胆色素胆色素(胆绿素、胆红素、(胆绿素、胆红素、胆素原及胆素)胆素原及胆素)血红蛋白血红蛋白血红蛋白血红蛋白还原血红蛋白还原血红蛋白(reduced hemoglobin,Hbred)氧合血红蛋白氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,HbO2)高铁血红蛋白高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi)碳氧血红蛋白碳氧血红蛋白(HbCO)硫化血红蛋白硫化血红蛋白(SHb)l 血红蛋白的种类血红蛋白的种类 血红蛋白的测定血红蛋白的测定l定义定义 指单位体积
6、血液中所含血红蛋白的量指单位体积血液中所含血红蛋白的量l参考值参考值 成年男性:成年男性:120-160g/L 成年女性:成年女性:110-150g/L 初生儿:初生儿:170-200g/LHb测定方法测定方法l分光光度计比色分光光度计比色 氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)()(国际标准参考方法国际标准参考方法)十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS-Hb)()(次选方法次选方法)叠氮高铁血红蛋白测定法叠氮高铁血红蛋白测定法(HiN3)碱羟血红蛋白测定法碱羟血红蛋白测定法(AHD575)l目视比色目视比色 沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪
7、法、光谱分析法沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法l仪器法仪器法氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)l为国际标准参考方法为国际标准参考方法l步骤:步骤:取样取样 加转化液(溶血、转化)加转化液(溶血、转化)比色比色l原理:原理:血液在血红蛋白转化液中溶血后,除血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各血外各血红蛋白均可被红蛋白均可被高铁氰化钾高铁氰化钾氧化成氧化成高铁血红蛋白高铁血红蛋白,再,再与与CN-结合生成稳定的结合生成稳定的棕红色棕红色氰化高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白,通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。l 方
8、法:方法:计算:计算:有三种方法求得有三种方法求得Hb浓度浓度 1.A367.7 2.得得A值后,在标准曲线上直接查找值后,在标准曲线上直接查找 3.AK KHb/A转化液转化液 5ml+血血 20ul(5min),比色比色读吸光度(读吸光度(A)(540nm)标准曲线的绘制标准曲线的绘制l用一组已知浓度的用一组已知浓度的HiCN参考液参考液,在分光光度计上分,在分光光度计上分别测定别测定A值,以值,以A为纵座标,为纵座标,血红蛋白参考值血红蛋白参考值为横座为横座标,绘制标准曲线。标,绘制标准曲线。例如:例如:HiCN参考品参考品 Hb g/L:50 100 150 200 A:0.14 0.
9、27 0.41 0.54 如果标本如果标本A为为0.32,则标本,则标本Hb=0.32370.37=118.52(g/L)KHb/A=370.37l 优点优点操作简单操作简单呈色快且稳定呈色快且稳定除除SHb外均可检测外均可检测根据吸光度直接定值根据吸光度直接定值方法学评价方法学评价l 缺点缺点KCN有剧毒有剧毒HbCO转化较慢转化较慢高高WBC和高球蛋白血和高球蛋白血症可致溶液浑浊症可致溶液浑浊红细胞计数与血红蛋白测定红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义的临床意义生理变化生理变化l年龄与性别年龄与性别新生儿:新生儿:RBC高,两周后高,两周后下降,下降,6-7岁最低岁最低男性:男性:25-30
10、岁高峰岁高峰女性:女性:13岁岁-15岁达高值,岁达高值,21岁岁-35岁低水平,以后岁低水平,以后渐渐增高渐渐增高 l精神因素精神因素 肾上腺素肾上腺素 RBCl剧烈体力劳动或运动剧烈体力劳动或运动 相对缺氧相对缺氧 Epo RBCl气压降低气压降低 缺氧缺氧 代偿性代偿性RBCl妊娠中后期妊娠中后期 血液稀释血液稀释 RBCl老年人老年人 造血功能减退造血功能减退 RBC病理变化病理变化l 红细胞和血红蛋白增多红细胞和血红蛋白增多相对增多相对增多:血浆中水分丢失,血液浓缩所致,如呕吐、血浆中水分丢失,血液浓缩所致,如呕吐、腹泻腹泻绝对增多绝对增多:原发性原发性 真性红细胞增多真性红细胞增多
11、 继发性继发性 低氧血症低氧血症 Epo (如心血管病、肺(如心血管病、肺 疾病、异常血红蛋白病)疾病、异常血红蛋白病)肾上腺皮质功能亢进肾上腺皮质功能亢进红细胞生成素代偿性增加红细胞生成素代偿性增加生理性:生理性:新生儿新生儿 高原居民高原居民病理性:病理性:严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病红细胞生成素非代偿性增加:红细胞生成素非代偿性增加:某些肿瘤或肾脏疾患某些肿瘤或肾脏疾患l红细胞和血红蛋白量减少红细胞和血红蛋白量减少主要见于贫血:主要见于贫血:由于各种原因引起的全身血循环中红细由于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少,低于该
12、地区、该胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少,低于该地区、该年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。贫血病因贫血病因生成减少生成减少破坏过多破坏过多失血过多失血过多1)骨髓造血功能减退骨髓造血功能减退 药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移2)造血原料不足造血原料不足 缺铁缺铁(缺铁性贫血)、(缺铁性贫血)、缺乏缺乏VitB12或叶酸或叶酸(巨幼细胞性贫血)(巨幼细胞性贫血)3)红细胞破坏增加红细胞破坏增加 溶血性贫血溶血性贫血(输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症)(输血不合、蚕豆病、遗传
13、性球形细胞增多症)4)红细胞丢失过多红细胞丢失过多 各种原因的失血(如消化性溃疡、痔疮、钩虫病)各种原因的失血(如消化性溃疡、痔疮、钩虫病)注意问题注意问题lHb测定对贫血程度的判断优于测定对贫血程度的判断优于RBC计数计数l在某些病理情况下,在某些病理情况下,Hb和和RBC的浓度不一定能正确的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量,如:反映全身红细胞的总容量,如:急性失血急性失血、水潴留水潴留、失水失水等等l 发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时,发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时,RBC计数计数与与Hb浓度不成比例浓度不成比例红细胞形态检查红细胞形态检查红细胞形态观察红细胞形态观察l 大小及
14、均匀程度大小及均匀程度l 红细胞形状红细胞形状l 血红蛋白含量血红蛋白含量l 细胞内结构细胞内结构红细胞大小改变红细胞大小改变 直径直径 例如例如l小红细胞小红细胞 10um 巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血l巨红细胞巨红细胞 15um 巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血 l大小不均大小不均 增生性贫血增生性贫血ACBA:normalB:megalocyteC:anisocytosis红细胞形状改变红细胞形状改变l球形红细胞球形红细胞 遗传性或获得性遗传性或获得性l椭圆形红细胞椭圆形红细胞 遗传性遗传性l靶形红细胞靶形红细胞 珠蛋白生成障碍性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病病l口形红细胞口形红细胞 遗传性遗
15、传性l镰形红细胞镰形红细胞 异常血红蛋白异常血红蛋白S(HbS)l棘形红细胞棘形红细胞 遗传性或获得性遗传性或获得性-脂蛋白缺乏症脂蛋白缺乏症l新月形红细胞新月形红细胞 阵发性睡眠性血红蛋白尿症阵发性睡眠性血红蛋白尿症l泪滴形红细胞泪滴形红细胞 贫血、骨髓纤维化症贫血、骨髓纤维化症l缗钱状形成缗钱状形成 纤维蛋白原和球蛋白增高纤维蛋白原和球蛋白增高l裂红细胞裂红细胞 DIC、微血管病性溶血性贫血、微血管病性溶血性贫血l红细胞形态不整红细胞形态不整 巨幼细胞性贫血巨幼细胞性贫血spherocyteElliptocyte人人为为假假椭椭圆圆红红细细胞胞Target cellstomatocyteS
16、ickle cell镰镰形形红红细细胞胞acanthocytemeniscocyteTear drop cellRouleaux formationschistocytepoikilocytosis血红蛋白含量改变血红蛋白含量改变l正常色素性正常色素性 急性失血、再障、白血病急性失血、再障、白血病l低色素性低色素性 缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血l高色素性高色素性 巨幼细胞性贫血巨幼细胞性贫血l嗜多色性嗜多色性 溶血性或急性失血性贫血溶血性或急性失血性贫血l细胞着色不一细胞着色不一 铁粒幼红细胞性贫血铁粒幼红细胞性贫血normochromicnormochro
17、michypochromichypochromichyperchromichyperchromicpolychromaticpolychromatic人人为为面面包包圈圈红红细细胞胞铁粒幼红细胞性贫血铁粒幼红细胞性贫血细胞内的异常结构细胞内的异常结构 嗜碱性点彩红细胞:嗜碱性点彩红细胞:RNA,铅中毒铅中毒 染色质小体染色质小体(豪焦小体豪焦小体):核残余物,巨幼细胞贫血、核残余物,巨幼细胞贫血、脾切除后脾切除后 卡波环:卡波环:脂蛋白变性,巨幼细胞贫血、铅中毒脂蛋白变性,巨幼细胞贫血、铅中毒 寄生虫:寄生虫:疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫 有核红细胞:有核红细胞:溶
18、血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移 性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后Basophilic stippling cellHowell Jollys bodyCabot ring疟原虫疟原虫(malarial parasite)有核红细胞有核红细胞红红细细胞胞的的各各种种改改变变红细胞比容测定红细胞比容测定(Hematocrit,HCT)l定义:定义:抗凝血在一定条件下离心沉淀,求出单位体积抗凝血在一定条件下离心沉淀,求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比(血液中红细胞占的体积百分比(L/L)。)。与红细胞数量以及红细
19、胞大小有关与红细胞数量以及红细胞大小有关l 温氏法温氏法(常量,中速离心)(常量,中速离心)l 微量法微量法首选常规方法首选常规方法l 放射性核素法放射性核素法参考方法参考方法l 折射计法折射计法、黏度法黏度法、比重法比重法、电阻抗法电阻抗法(仪器)(仪器)测定方法测定方法参参 考考 值值 温氏法温氏法:男性:男性0.4 0.54 女性女性0.37 0.47 微量法:微量法:男性男性0.42 0.52 女性女性0.37 0.48 仪器法:仪器法:男性男性0.40 0.52 女性女性0.37 0.48离离 心心 法法lEDTA抗凝抗凝l离心离心 Plasm PLT WBC RBC-red RBC
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