临床输血与检验.ppt

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1、临床输血与检验血型血清学第一章免疫血液学基础n n第一节第一节 血型和血型系统血型和血型系统n n一一血型血型n n19001900年，年，LandsteinerLandsteiner发现人类发现人类ABOABO血型，血型，5050年代年代中期起陆续发现中期起陆续发现 白细胞、血小板和血清蛋白抗原及红白细胞、血小板和血清蛋白抗原及红细胞内酶的不同型细胞内酶的不同型n n血型通常定义为血液各成分的遗传多态性（血型通常定义为血液各成分的遗传多态性（geneticgeneticpolymorphism)polymorphism)n n大部分血型属于免疫血液学范畴，但血型的检出并不大部分血型属于免疫血

2、液学范畴，但血型的检出并不都是用免疫学方法。都是用免疫学方法。如如 红细胞酶型、血清蛋白型红细胞酶型、血清蛋白型电泳法电泳法HLA-DHLA-D抗原抗原混合淋巴细胞保养混合淋巴细胞保养法法 二血型系统n n定义定义是指不同血型抗原之间的关系。是指不同血型抗原之间的关系。n n研究方法研究方法采用群体调查采用群体调查，如果某一血型频率，如果某一血型频率在另一血型系统各抗原中呈均匀分布，说明这在另一血型系统各抗原中呈均匀分布，说明这两种血型抗原在遗传上各自独立，也可以说这两种血型抗原在遗传上各自独立，也可以说这两种血型抗原的基因位点在不同对的染色体上，两种血型抗原的基因位点在不同对的染色体上，服从

3、自由组合规律；或在同一对染色体的不同服从自由组合规律；或在同一对染色体的不同位点上，但遗传距离甚远位点上，但遗传距离甚远n n控制控制ABOABO血型基因位于第九染色体血型基因位于第九染色体n n目前已检出的主要血型系统目前已检出的主要血型系统：ABOABO、MNSsMNSs、P P、RhRh、LutheranLutheran、KellKell、LewisLewis DuffyDuffy KiddKidd DiegoDiegoYtXgSciannaDombrockColtoYtXgSciannaDombrockColtonLandsteiner-nLandsteiner-WinerChido/

4、RodgersHhKxGerbichCromerKonpsIndiWinerChido/RodgersHhKxGerbichCromerKonpsIndianan外加一个高频组抗原一个低频组抗原外加一个高频组抗原一个低频组抗原第二节血型抗原n n一血型抗原的分布n n血细胞表面和血浆蛋白分子中-如Rh抗原、粒细胞特异抗原、血小板特异抗原和Gm因子等。n n血细胞和组织器官细胞分泌液共有-AB抗原、H抗原、HLA抗原、Lewis抗原血型抗原的形成时间n n1.1.出生时已经形成的抗原出生时已经形成的抗原 n n 红细胞血型抗原：红细胞血型抗原：ABOABO、MMSMMS、RhRh、KellKel

5、l、DuftyDufty、KiddKidd、LutheranLutheran、DiegoDiego、YtYt、DombrockDombrock、ColtonColton、SciannaScianna、VelVel等系统及等系统及P1P1、BaBa抗原抗原n nHLAHLA抗原抗原 n n粒细胞系统特异抗原和血小板系统的特异抗原粒细胞系统特异抗原和血小板系统的特异抗原 n n2 2出生时有，以后逐渐消失的抗原：出生时有，以后逐渐消失的抗原：i i抗原抗原n n3.3.出生时无，以后逐渐抗原：出生时无，以后逐渐抗原：I I抗原逐渐形成，抗原逐渐形成，i i抗原逐渐消失，人从出生抗原逐渐消失，人从出

6、生1818个月到两岁之间，变化从个月到两岁之间，变化从i i（）（）I I（）（）的过程。的过程。血型抗原的化学本质n n种类：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白质四种种类：糖蛋白、脂蛋白、糖脂和蛋白质四种 n n糖糖蛋蛋白白：唾唾液液中中ABHABH抗抗原原、LewisLewis、MWSsMWSs、HLAHLAn n 脂蛋白：脂蛋白：RhRh抗原抗原n n 糖脂：红细胞上血浆中糖脂：红细胞上血浆中ABHABH抗原、抗原、P P血型抗原血型抗原n n 蛋白质：蛋白质：GmGm、AmAm和和EmEm因子因子 n n多糖类抗原刺激多糖类抗原刺激产生产生IgMIgM抗体抗体n n蛋白质类抗刺激蛋白质类抗刺激

7、产生产生IgGIgG抗体抗体 抗原位点数和剂量效应n n基因为纯合子时，抗原点位数多，与抗体反应强n n基因为杂合子时，抗原点位数少，与抗体反应弱n n剂量效应在MN血型系统和Rh血型系统比较明显，在ABO血型系统等其他不明显。位置效应n n指基因之间的相互影响使抗原呈表达降低。如这种影响发生在同一染色上的基因之间，如这种影响发生在同一染色上的基因之间，称称“顺式效应顺式效应”如如CDECDE基因复合物产生的基因复合物产生的E E抗原比抗原比cdecde基因复合物产生的基因复合物产生的E E抗原量抗原量少n n如这种影响发生在另一条同源色染色体上如这种影响发生在另一条同源色染色体上“反反式效应

8、式效应”；例如基因型；例如基因型CDe/CdeCDe/Cde和和Cde/cDeCde/cDe前者前者产生产生D D抗原大于后者，是形成抗原大于后者，是形成DuDu型的原因型的原因复合抗原n n受基因复合抗体控制，产生复合抗体、复合抗原只与复合抗体反应，如基因复合抗体Cde的产物有C、D、e三种抗原活性第三节免疫耐受和自身免疫n n与血型有关免疫耐受现象与血型有关免疫耐受现象 n n一一般情况一一般情况:A A型人不产生抗型人不产生抗A An nBB型人不产生抗型人不产生抗B Bn nABAB型人不产生抗型人不产生抗A A、抗抗B Bn n特殊情况：特殊情况：A A型人也不产生抗型人也不产生抗B

9、 Bn nBB型人也不产生抗型人也不产生抗A An nRh0Rh0（D D）阴性妇女多次孕育阴性妇女多次孕育Rh0Rh0（D D）阳性胎儿也未产生抗阳性胎儿也未产生抗D D，这种免疫耐这种免疫耐 受现象可能是胚胎早期能触了因素的相应抗原受现象可能是胚胎早期能触了因素的相应抗原 物质所致物质所致 常见自身免疫现象n n自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血AIHAAIHA：由红细胞自身由红细胞自身抗体引起，此抗体有特异性和非特异性、温抗抗体引起，此抗体有特异性和非特异性、温抗体和冷抗体之分体和冷抗体之分 n n自身免疫性血小板减少性紫癜、特异性血小板自身免疫性血小板减少性紫癜、特异性血小板减少

10、性紫癜减少性紫癜ITPITPn n自身免疫性中性粒细胞减少症自身免疫性中性粒细胞减少症 n n肺炎支原体感染改变红细胞表面的肺炎支原体感染改变红细胞表面的I I抗原，产生抗原，产生抗红细胞冷凝集素抗红细胞冷凝集素 n n巨细胞病毒、巨细胞病毒、EBEB病毒和甲基多等药物可引起直病毒和甲基多等药物可引起直抗阳性和溶血性贫血抗阳性和溶血性贫血 第四节血型抗体n n天然抗体天然抗体:是指没有可察觉抗原刺激产生的是指没有可察觉抗原刺激产生的“抗体抗体”，（菌类、花粉尘埃等）多主要有存在，（菌类、花粉尘埃等）多主要有存在于于ABOABO、MNMN、P P和和LewisLewis血型系统中，以血型系统中，

11、以IgMIgM和和IgGIgG共同存在，共同存在，A A型和型和B B型多数以型多数以IgMIgM为主，为主，O O型人在成年后以型人在成年后以IgGIgG占优势，特别是女性占优势，特别是女性 n n规则抗体；指规则抗体；指ABOABO血型系统有规律产生抗血型系统有规律产生抗A A和和抗抗B B，符合符合LandgteinerLandgteiner规则规则是反定型的依据是反定型的依据 n n免疫抗体：指有可查抗原刺激而产生，常见有免疫抗体：指有可查抗原刺激而产生，常见有输血、妊娠和注射输血、妊娠和注射3 3种方式。种方式。血型鉴定n nABOABO鉴定规则要求鉴定规则要求 n n必须做正定和反

12、定必须做正定和反定 n n所用抗所用抗A A、抗抗B B试剂报我国暂行规定，效价分别试剂报我国暂行规定，效价分别不低于不低于6464和和128128n nO O型血清中的抗型血清中的抗A A、B B在测定在测定A A、B B亚型十分有亚型十分有用用 n n区分区分A1A1和和A2A2时，用抗时，用抗A1A1血清血清 n n反定型中，一般需要反定型中，一般需要A1A1、B B和和O O型红细胞型红细胞 n nO O型红细胞用于检查不规则抗体型红细胞用于检查不规则抗体 表3ABO抗原亚型的血型血清学特征表现型表现型已知抗血清已知抗血清已知试剂红细胞已知试剂红细胞吸收放散吸收放散分泌物血型分泌物血型

13、 物质物质 抗抗AA抗抗A1A1抗抗BB抗抗ABAB抗抗H HA1A2BOA1A2BOA1A1+A AA,HA,H AintAintW+W+W+AW+AA,HA,H A2A2（1%1%）+A+AA,HA,H A3mfmfA3mfmf（20%20%）+A+AA,HA,H Ax-W+Ax-W+，+A+AH H AmAm/W+/W+/W/W+A+A A,HA,H BBBBB,HB,H B5B5BB,HBB,H BxBxvw+w+vw+w+BBH HBmvw+Bmvw+BBB,HB,HOO+H+HH HOhOh+ABO定型和定型试验中常见问题n n问题一般出现在正、反定型不一致，分析技术问题一般出现在

14、正、反定型不一致，分析技术问题、标本红细胞或血清本身问题问题、标本红细胞或血清本身问题 n n技术和管理错误技术和管理错误标本或试剂搞错标本或试剂搞错 器材不洁器材不洁 试剂污染或失效试剂污染或失效 离心过度离心过度阳性反应产生溶血现象未能阳性反应产生溶血现象未能识别识别漏加试剂漏加试剂 结果记录或判断错误结果记录或判断错误细胞与血清间比例不适当细胞与血清间比例不适当 ABO定型和定型试验中常见问题n n血清异常血清异常 n n红细胞致敏红细胞致敏 n n异常基因型异常基因型 n n近期输血近期输血 n n嵌合体血型嵌合体血型 n n疾病因素导致抗原减弱疾病因素导致抗原减弱 n n红细胞多凝集

15、现象红细胞多凝集现象n n获得性类获得性类B B抗原抗原 n n异常血浆蛋白异常血浆蛋白 n n药物等因素药物等因素 n n年龄因素年龄因素 Rh血型系统及鉴定n n RhRh血型系统血型系统是红细胞血型系统中最复杂的一个血是红细胞血型系统中最复杂的一个血型系统，已发现型系统，已发现4040多个，多个，主要有临床意义的有主要有临床意义的有5 5种，种，D D（Rh0Rh0）、）、C C（rhrh）、）、E E（rhrh）、）、C C（hrhr）和和e e（hrhr）n n三种命名法三种命名法 n nRhRhHrHr命名法：由命名法：由WienerWiener提出提出n nCDECDE命名法：由

16、命名法：由FisherFisher和和RaceRace提出，国内最常提出，国内最常用用n n数字命名法：由数字命名法：由RosenfirldRosenfirld即将抗原拨数字号码即将抗原拨数字号码 D抗原和Du型n n指D抗原的变异型，有些Rh阳性细胞能被一些抗D血清凝集，但不能被其他一些抗D血清凝集，实际上有D抗原n nDu意义：Du抗原是一种弱抗原，可分不同等级，高等级可在盐水介质立即反应n n献血者为Du型，应归Rh阳性受血者为Du型，应归Rh阴性Rh血型鉴定：n n根据抗根据抗D D试剂的种类不同试剂的种类不同1.1.玻片或快速试验用的抗玻片或快速试验用的抗D D血清血清成份：成份：含

17、含IgGIgG抗抗D D抗体血清高蛋白分子稀释抗体血清高蛋白分子稀释液配制液配制 2.2.盐水试验血清用的抗盐水试验血清用的抗D D血清血清这类试剂不含增效剂这类试剂不含增效剂 3.3.酶或间接球蛋白试验用的抗酶或间接球蛋白试验用的抗D D血清血清 成份：只含成份：只含IgGIgG抗体血清抗体血清 Du型鉴定n n）盐水反应的抗D试剂不宜检查Du型，常出现阴性结果n n试剂系统中必须有对照管n n直接阳性红细胞，则无法作Du鉴定试验，必须对红细胞进行处理，在45C下加热放散Rh血型系统的抗体及临床意义n n通过输血和妊娠产生，初次免疫通过输血和妊娠产生，初次免疫2 26 6个月出现，个月出现，

18、再次免疫再次免疫3 3周内达最高峰，约有周内达最高峰，约有1/31/3RhRh阴性人，阴性人，受受RhRh阳性免疫后不产生抗阳性免疫后不产生抗D D，称非反应者称非反应者 n n抗抗D D多数为多数为IgGIgG型，少数为型，少数为IgMIgM型型/非补体结合非补体结合性性/常见常见RhRh抗体混合物，即除抗抗体混合物，即除抗D D外，同时存外，同时存在抗在抗E E、e e、C C、c c抗体抗体 n n若受血者血浆中含若受血者血浆中含RhRh抗体，输入抗体，输入RhRh阳性红细胞阳性红细胞严重溶血性输血反应，严重溶血性输血反应，n n新生儿溶血病新生儿溶血病 Rh定型和假阳性/假阴性的原因n

19、 n假阳性的原因假阳性的原因 n n1.1.红细胞被免疫球蛋白致敏或血清中含凝集因红细胞被免疫球蛋白致敏或血清中含凝集因子子n n2.2.受检细胞与抗血清孵育时间过长受检细胞与抗血清孵育时间过长n n3.3.标本抗凝不当标本抗凝不当n n4.4.定型血清中含有事先未被检测的其它特异性定型血清中含有事先未被检测的其它特异性抗体抗体n n5.5.多凝集细胞造成定型假阳性多凝集细胞造成定型假阳性n n检定用器材或抗血清被污染检定用器材或抗血清被污染 n n假阴性原因假阴性原因 n n1.1.受检红细胞悬液浓度太高，与抗血清比例失受检红细胞悬液浓度太高，与抗血清比例失调调n n2.2.漏加或错加试剂漏

20、加或错加试剂n n3.3.定型血清使用方法错误，没有按说明书进行定型血清使用方法错误，没有按说明书进行n n4.4.离心后重量、晃动过度离心后重量、晃动过度n n抗血清保存不当抗血清保存不当 第三章输血前检查n n目的和要求目的血液在受血者体内有效存活，无不良反应要求输入的红细胞在受血者体内不凝集和溶血，输入血浆成份不导致患者自身红细胞显著破坏。主要程序包括n n（1）患者的病史和标本等检查、核对及处理n n（2）ABO和Rh不定型n n（3）抗体筛选和鉴定n n（4）交叉配血试验（5）标签和发血受血者的病史和标本等检查、核对、处理n n1.1.病史资料和信息：病史资料和信息：包括受血者的姓名

21、、年龄、性别、种族、临床包括受血者的姓名、年龄、性别、种族、临床诊断、输血史、药物史、妊娠史、特别是以往诊断、输血史、药物史、妊娠史、特别是以往输血反应的记录等，这些资料有助于解决可能输血反应的记录等，这些资料有助于解决可能出现的血清学问题。出现的血清学问题。1.1.标本要求：是安全输血的关键措施之一标本要求：是安全输血的关键措施之一（11）所有标本必须要鉴定和标记，确实无误）所有标本必须要鉴定和标记，确实无误地来自患者和献血者并和血液申请单内容核对，地来自患者和献血者并和血液申请单内容核对，确证确证（22）标本标签必须正确，符合患者血液的体）标本标签必须正确，符合患者血液的体内状态，能代表患

22、者当前的免疫学情况，防止内状态，能代表患者当前的免疫学情况，防止血样稀释血样稀释（33）溶血标本一般不能使用）溶血标本一般不能使用（44）血清或血浆均可用作检查，使用血清干扰）血清或血浆均可用作检查，使用血清干扰因素少因素少（55）患者标本一般不要超过）患者标本一般不要超过2424h h（66）反复输血患者更应注意抽取新标本作配血反复输血患者更应注意抽取新标本作配血试验试验（77）患者使用肝素治疗，应加硫酸鱼清蛋白对）患者使用肝素治疗，应加硫酸鱼清蛋白对抗抗使标本凝结，使用右旋糖酐，使标本凝结，使用右旋糖酐，pvppvp等等治疗，应将红细胞洗涤再作交叉治疗，应将红细胞洗涤再作交叉输血后所有标本

23、物应安善保存输血后所有标本物应安善保存2 288C C，至少至少一周。一周。ABO和Rh定型n n前面已介绍过抗体筛选和鉴定n n目的：是检测受血者是否含有抗目的：是检测受血者是否含有抗A A、抗抗B B以外的以外的抗体抗体,n n原则原则：是让受检血清与特殊试剂红细胞是让受检血清与特殊试剂红细胞筛选红细胞起反应，已发现在筛选红细胞起反应，已发现在3737C C中有反应活中有反应活性的抗体性的抗体 n n方法：方法：盐水法盐水法/白蛋白介质法白蛋白介质法/低离温度介低离温度介质法（质法（LISSLISS）/凝聚胺法凝聚胺法/酶技术酶技术 抗球蛋白法抗球蛋白法/但最终都要用抗人球蛋白法确认但最终

24、都要用抗人球蛋白法确认 n n对发现对发现ABOABO以外不规则抗体应做进一步鉴定所以外不规则抗体应做进一步鉴定所使用的是谱细胞使用的是谱细胞筛选细胞是指由筛选细胞是指由2 23 3人份的人份的O O型组成，型组成，要求包括常见抗原：要求包括常见抗原：D D、C C、E E、c c、e e、MM、N N、S S、s s、P P、LeaLea、LebLeb、K K、k k、FgaFga、FgbFgb、JkaJka、JkbJkbn n交叉配血试验n n（一）要求和内容（一）要求和内容n n交叉配血实际上是检查不配性，使患者献血者交叉配血实际上是检查不配性，使患者献血者血液间没有可测到的不相配合的抗

25、原、抗体成血液间没有可测到的不相配合的抗原、抗体成份，交叉配血应份，交叉配血应3737C C孵育，除盐水介质外，至孵育，除盐水介质外，至少还有加一种能检不完全抗体（少还有加一种能检不完全抗体（IgGIgG型）试验。型）试验。n n主侧管主侧管n n次侧管次侧管n n自身对照管自身对照管 交叉配血中可能出现的一些问题n n1.缗钱状形成：常见多发性骨髓瘤，原球蛋白症、霍奇金病n n2.试验结果不相容：显示有未检明同种抗体存在n n3.离心力不当：造成假阴性和假阳性n n4.水浴箱温度不正确n n结果溶血，可把血清灭活后再作试验标签和发血n n配血单上，均需写上受血者姓名、床号、配血单上，均需写上

26、受血者姓名、床号、ABOABO及及RhRh血型、医院，献血者姓名、编号、血型、医院，献血者姓名、编号、n n反复核对输血申请单和血液的标签，正确无误反复核对输血申请单和血液的标签，正确无误交叉配血试验结果的解释，发出血液内容的名交叉配血试验结果的解释，发出血液内容的名称，日期和时间，以及工作人员的姓名，称，日期和时间，以及工作人员的姓名，n n 输血前检查试验是一项具有高度科学性和责任输血前检查试验是一项具有高度科学性和责任性的工作，熟练和灵活应用血清学试验原理和性的工作，熟练和灵活应用血清学试验原理和技术，对所得试验结果能给予全面、细致观察技术，对所得试验结果能给予全面、细致观察和分析和分析

27、n n最重要的是要有一颗救死扶伤，全心全意为伤最重要的是要有一颗救死扶伤，全心全意为伤病员服务的心病员服务的心 血型血清学常见的几项试验介绍n n一准备工作一准备工作n n（一）标本采集（一）标本采集n n1.1.抗凝血：抗凝血：ACDACD：血液血液1:41:4n n5%5%Na2-EDTANa2-EDTA：血液血液0.1:10.1:1n n血清标本：血清标本：3737C C凝固凝固离心，或离心，或44C C过度分过度分离血清以吸收自身冷抗体，若保存血清标本，离血清以吸收自身冷抗体，若保存血清标本，可加可加10%10%NaN3NaN3至最后浓度为至最后浓度为0.1%0.1%n n（二）红细胞

28、悬液的配制（二）红细胞悬液的配制 n n2 2常用红细胞悬液浓度常用红细胞悬液浓度n n2%2%红细胞悬液：用于抗体效价滴定红细胞悬液：用于抗体效价滴定n n5%5%红细胞悬液：用于血型鉴定或间接抗试红细胞悬液：用于血型鉴定或间接抗试验验n n10%10%红细胞悬液：用于测定抗体的亲合力红细胞悬液：用于测定抗体的亲合力 二盐水介质凝集试验n n应用范围：主要用于应用范围：主要用于IgMIgM抗体的检出、鉴定、配血、抗体的检出、鉴定、配血、ABOABO、MNMN、P P血型抗体可在盐水介质中凝集血型抗体可在盐水介质中凝集 n n 原理：略原理：略 n n试验记录：试验记录：4+4+：一个大凝集块

29、，背景透明，无游离红细胞：一个大凝集块，背景透明，无游离红细胞3+3+：数个大凝集块，背景透明，无游离红细胞：数个大凝集块，背景透明，无游离红细胞2+2+：许多小凝集块，肉眼可见，大小均匀，背景基本透明，有游离：许多小凝集块，肉眼可见，大小均匀，背景基本透明，有游离细胞细胞1+1+：很小凝块，肉眼还可见，背景不透明，游离细胞多，要用显微：很小凝块，肉眼还可见，背景不透明，游离细胞多，要用显微镜镜w+(w+(、)：微小凝集块，肉眼很难看清，背景浑浊、显微镜观察微小凝集块，肉眼很难看清，背景浑浊、显微镜观察OO（）：（）：无凝集，无溶血，全是游离细胞，要用显微镜观察无凝集，无溶血，全是游离细胞，要

30、用显微镜观察PHPH：部分溶血部分溶血HH：完全溶血完全溶血缗钱状凝集的处理：加盐水稀释后观察缗钱状凝集的处理：加盐水稀释后观察 胶体介质凝集试验：n n原理：胶体介质能使介质常数上升，降低红细胞zeta电势，缩补红细胞间距离使IgG抗体致敏红细胞呈凝集常见胶体介质：小牛血清白蛋白人白蛋白AB血清受检者本人血清等四酶处理细胞的凝集试验n n原理：某些蛋白水解酶能破坏红细胞表面丰富原理：某些蛋白水解酶能破坏红细胞表面丰富的唾液酸（带负电荷）降低的唾液酸（带负电荷）降低zatazata电位，使细胞电位，使细胞间距离缩短，间距离缩短，IgGIgG抗体与相关抗原红细胞产生抗体与相关抗原红细胞产生凝集凝

31、集n n特点：能显著增强特点：能显著增强RhRh和和killkill系统的抗原抗体反系统的抗原抗体反应，但对应，但对MM、N N、S S、s s、FgaFga和和FgbFgb抗原有破坏抗原有破坏性性n n常用的酶有：菠萝酶、木瓜酶、无花酶等常用的酶有：菠萝酶、木瓜酶、无花酶等n n用用PH5.5PBSPH5.5PBS配制配制0.5%0.5%浓度浓度 抗球蛋白试验（CoombsTest）n n原理：红细胞被原理：红细胞被IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM或补体或补体C3C3、C4C4致敏后当加入抗人致敏后当加入抗人球蛋白（即抗球蛋白（即抗IgGIgG、抗补体抗体）时，出现红细胞凝集抗补体抗

32、体）时，出现红细胞凝集 n n抗球蛋白试剂：抗球蛋白试剂：n n多特异性类除含有抗多特异性类除含有抗IgGIgG和和C3dC3d外，还含有抗外，还含有抗C3bC3b、C4bC4b、抗抗IgMIgM、抗抗IgAIgA，主要用于配血试验和直接试验（主要用于配血试验和直接试验（DATDAT），），尤其用于自身免尤其用于自身免疫性溶血性贫血测定。疫性溶血性贫血测定。n n单特异性类：主要有抗单特异性类：主要有抗IgGIgG和抗和抗C3dC3d两种，主要应用于抗体阳性者两种，主要应用于抗体阳性者分类鉴定分类鉴定 n n特点：特点：n n（1 1）本试验是血清血型学试验中经典试验，用于各种血型抗原抗）本试

33、验是血清血型学试验中经典试验，用于各种血型抗原抗体鉴定中体鉴定中n n（2 2）本试验同时要做各种对照试验）本试验同时要做各种对照试验“结果结果”方才可靠。对照试验方才可靠。对照试验包括阳性、阴性及自身对照包括阳性、阴性及自身对照n n本试验影响结果的因素较多本试验影响结果的因素较多 免疫性溶血性输血反应的调查n n一一 询问症状和病史询问症状和病史 n n11急性溶血性反应症状：常为急性溶血性反应症状：常为ABOABO血型不合所血型不合所至，误输几毫升血即发生强烈反应，注射部位至，误输几毫升血即发生强烈反应，注射部位疼痛、寒战、发热、胸闷、腰背痛、面部潮红、疼痛、寒战、发热、胸闷、腰背痛、面

34、部潮红、恶心、血压下降、胸口、休克、血红蛋白尿恶心、血压下降、胸口、休克、血红蛋白尿RHRH血型不合在输完血数小时后发生，但血型不合在输完血数小时后发生，但症状轻症状轻 n n22迟发性溶血反应症状：分两种原因迟发性溶血反应症状：分两种原因（1 1）红）红细胞初次刺激，细胞初次刺激，7-87-8天产生抗体，再与输入存活天产生抗体，再与输入存活的红细胞作用。（的红细胞作用。（2 2）曾有过初次刺激，本次曾有过初次刺激，本次是回忆反应，是回忆反应，3-73-7天产生大量抗体，多数反应进天产生大量抗体，多数反应进程慢，个别与急性反应征状类似，有死亡危险程慢，个别与急性反应征状类似，有死亡危险 n n

35、3 3病史：病史：二 核对患者身份和献血者血液初步实验n n1比较输血前后患者血浆颜色n n2抗球蛋白实验四进一步检查n n1 1复核血型复核血型n n2 2重做交叉配血重做交叉配血n n3 3抗体鉴定和相应抗原的检查抗体鉴定和相应抗原的检查n n4 4辅助检查辅助检查 n n尿中有无血红蛋白尿中有无血红蛋白n n反应反应2424小时后检查含铁血黄素小时后检查含铁血黄素n n血清胆红素检查血清胆红素检查出现反应出现反应1 1小时后升高，小时后升高，7878小时达到高峰。小时达到高峰。n n血清胆红素血清胆红素 尿胆红素和尿含铁血黄素的升高尿胆红素和尿含铁血黄素的升高及结合珠蛋白降低都是溶血反应

36、的及结合珠蛋白降低都是溶血反应的n n辅助证据。辅助证据。n n5 5追踪试验追踪试验n n反应初期直抗试验、间抗试验可能阴性反应初期直抗试验、间抗试验可能阴性 但以后每天或隔几天检查，可发现抗体阳性。但以后每天或隔几天检查，可发现抗体阳性。与非免疫性溶血反应的区别n n1 1血液在体外溶血血液在体外溶血血袋保存、运输或加温不血袋保存、运输或加温不当，血袋内加入药物、输血器管道用过低渗液、当，血袋内加入药物、输血器管道用过低渗液、浓缩红细胞因血浆太少浓缩红细胞因血浆太少引发一过性血红蛋白引发一过性血红蛋白尿尿n n2 2细菌污染细菌污染也可以引发溶血、发烧、血压也可以引发溶血、发烧、血压下降、下降、DICDIC等征状。等征状。区别：白血胞总数立即升高，面部红而干燥，血区别：白血胞总数立即升高，面部红而干燥，血袋血能找到细菌、患者血培养也能发现同样的袋血能找到细菌、患者血培养也能发现同样的细菌。细菌。n n3 3患者患有溶血性疾病患者患有溶血性疾病患者除血红蛋白血症和血红蛋白尿外，无其患者除血红蛋白血症和血红蛋白尿外，无其他溶血性反应症状，通过询问病史明确。他溶血性反应症状，通过询问病史明确。