最新岛津液相色谱维护保养PPT课件.ppt
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1、岛津液相色谱维护保养岛津液相色谱维护保养HPLC Business DeptShimadzu Corporation液相色谱基础知识SHIMADZUHPLC Business DeptShimadzu CorporationHPLC Business DeptShimadzu CorporationHPLC Business DeptShimadzu CorporationHPLC Business DeptShimadzu CorporationHPLC Business DeptShimadzu CorporationHPLC Business DeptShimadzu Corporati
2、on溶溶 剂剂 等等 级级溶剂的等级溶剂的等级溶剂的等级溶剂的等级HPLCHPLCHPLCHPLC级级级级优级纯优级纯优级纯优级纯分析纯分析纯分析纯分析纯都经过蒸馏和都经过蒸馏和0.45u的过滤的过滤(除纤维毛除纤维毛,未溶解的机械颗粒未溶解的机械颗粒优级纯的纯度比分析纯大优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂但里面含有防腐剂和抗氧化剂HPLC级经过级经过0.2u的过滤的过滤,且除去有紫外吸收的杂质且除去有紫外吸收的杂质微量分析、梯度洗脱微量分析、梯度洗脱微量分析、梯度洗脱微量分析、梯度洗脱HPLC Business DeptShimadzu Corporation甲醇甲醇 乙睛乙
3、睛 正己烷正己烷分析纯级和HPLC级溶剂的吸光度比较图溶溶 剂剂 等等 级级HPLC Business DeptShimadzu CorporationGeneral Maintenance and Troubleshooting缓冲液的使用缓冲液的使用 使用前必须过滤使用前必须过滤 使用后一定要进行清洗使用后一定要进行清洗,以免造成腐蚀、磨损、阻塞,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用纯水冲洗用纯水冲洗30-60min(1ml/min),),再用甲醇冲洗再用甲醇冲洗30min易受到细菌和霉菌的影响易受到细菌和霉菌的影响 溶溶 剂剂 等等 级级不能直接用有机溶剂冲洗不能直接用有机溶剂冲洗HPLC Bu
4、siness DeptShimadzu Corporation过滤:过滤:过滤:过滤:0.45um0.45um0.45um0.45um或更小孔径滤膜或更小孔径滤膜或更小孔径滤膜或更小孔径滤膜 目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液。其是使用无机盐配制的缓冲液。其是使用无机盐配制的缓冲液。其是使用无机盐配制的缓冲液。脱气:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡脱气:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡脱气:除去流动相中溶解或因混
5、合而产生的气泡脱气:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响:气泡对测定的影响:气泡对测定的影响:气泡对测定的影响:1 1 1 1)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积 2 2 2 2)柱中气泡使流动相绕流,峰变形)柱中气泡使流动相绕流,峰变形)柱中气泡使流动相绕流,峰变形)柱中气泡使流动相绕流,峰变形 3 3 3 3)检测器中的气泡产生基线波动)检测器中的气泡产生基线波动)检测器中的气泡产生基线波动)检测器中的气泡产生基线波动 无在线脱气应注意:无在
6、线脱气应注意:无在线脱气应注意:无在线脱气应注意:1 1 1 1)每天脱气)每天脱气)每天脱气)每天脱气 2 2 2 2)如使用氦脱气,对混合溶剂脱气时间不能过长)如使用氦脱气,对混合溶剂脱气时间不能过长)如使用氦脱气,对混合溶剂脱气时间不能过长)如使用氦脱气,对混合溶剂脱气时间不能过长溶溶 剂剂 前前 处处 理理HPLC Business DeptShimadzu Corporation岛津VP系列输液泵目的 单元 流速范围特性和应用 分析 LC-10ADVP0.001-9.999无脉动,适于半微量LC 和 LC-MS LC-10ATVP0.001-9.999非凡的耐用性,适于常量分析*所有
7、单元都既可做高压梯度又可做低压梯度所有单元都既可做高压梯度又可做低压梯度液相色谱基础知识HPLC Business DeptShimadzu CorporationLC-10ATvp泵:泵:串联式往复泵串联式往复泵LC-10ADvp泵:泵:并联式微体积往复泵并联式微体积往复泵LC-10ADVP/LC-10ATVP工作原理工作原理HPLC Business DeptShimadzu Corporation单向阀结构单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球单向阀原理单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头LC-10ADVP/LC-10ATVP工作原理工作原理HPLC Business Dept
8、Shimadzu Corporation液相色谱基础知识梯度洗脱形式:梯度洗脱形式:v线性梯度:在梯度洗脱时,流动相强度的变化和时间成线性比例v指数梯度:在梯度洗脱时,流动相强度随时间的变化呈指数关系v折线梯度:梯度洗脱装置:梯度洗脱装置:v高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入v低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。HPLC Business DeptShimadzu Corporation梯度洗脱形式的选择HPLC Business DeptShimadzu Corporation1.使用流动相溶解样品 -减少溶剂峰,尤其是组分峰靠近溶剂
9、峰时由为重要 -保证样品在流动相中的溶解度,避免样品在系统中尤其在柱中产生沉淀 2.进样前最好使用0.45um 的膜进行过滤 如果样品很脏,要使用0.2um的膜进行过滤样 品 处 理HPLC Business DeptShimadzu Corporation进样器自动进样器手动进样器 原理:(六通阀)注入方式:1 1)全量注入)全量注入 2 2)部分注入)部分注入液相色谱基础知识HPLC Business DeptShimadzu Corporation进样量和检测器响应的关系示意图进样量和检测器响应的关系示意图液相色谱基础知识进样进样体体积积 检检测测器器响响应应值值定量定量环环体体积积的一
10、半的一半3倍定量倍定量环环体体积积全量注入全量注入部分注入部分注入HPLC Business DeptShimadzu Corporation手动进样器的原理图手动进样器的原理图 装填状态装填状态液相色谱基础知识进样状态进样状态HPLC Business DeptShimadzu Corporation交叉污染的原因微量注射器微量注射器 红色表示残留样品红色表示残留样品HPLC Business DeptShimadzu Corporation手动进样法一般的方法一般的方法一般的方法一般的方法 1.1.1.1.在进样状态下清洗针口在进样状态下清洗针口在进样状态下清洗针口在进样状态下清洗针口 2
11、.2.2.2.在装填状态下插入微量注射器在装填状态下插入微量注射器在装填状态下插入微量注射器在装填状态下插入微量注射器 3.3.3.3.注入样品注入样品注入样品注入样品 4.4.4.4.切到进样状态切到进样状态切到进样状态切到进样状态HPLC Business DeptShimadzu Corporation手手动进样动进样法法便捷的方法(不需清洗)便捷的方法(不需清洗)便捷的方法(不需清洗)便捷的方法(不需清洗)1.1.1.1.进样状态下插入微量注射器进样状态下插入微量注射器进样状态下插入微量注射器进样状态下插入微量注射器 2.2.2.2.切到装填状态切到装填状态切到装填状态切到装填状态 3
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