基因工程及其应用课件培训资料.ppt

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1、基因工程及其应用课件1、基因工程的、基因工程的指指“限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 ”主要存在于微生物主要存在于微生物一种限切酶一种限切酶只能识别只能识别一种一种特定特定的核苷的核苷酸酸序列序列,并在并在特定切点特定切点切割切割DNADNA分子分子已发现的有已发现的有200200多种多种种类种类:来源来源:特点特点:“”作用于：作用于：磷酸二酯键磷酸二酯键限制性内限制性内切酶切酶识别位点识别位点限制性内限制性内切酶切酶识别位点识别位点EcoRXbaXhoNdeGAATTCTCTAGACTCGAGCATATGApaBglClaSmaGGGCCCAGATCTATCGATCCCGGG几种常用限制性

2、内切酶及其酶切位点限制性内切酶（限制性内切酶（EcoREcoR）作用过程）作用过程点击播放点击播放被同一种限制酶切断的几个被同一种限制酶切断的几个DNADNA是否具有是否具有相同的黏性末端？相同的黏性末端？思考思考:形成的黏性末端不同形成的黏性末端不同不同的限制酶呢？不同的限制酶呢？具有具有什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切中心轴线两侧切开时开时，被限制酶切开的被限制酶切开的DNA两条单链的切两条单链的切口，带有几个口，带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸，他们之间正，他们之间正好好互补配对互补配对，这样的切口叫，这样的切口叫黏性末端黏性末端。2

3、、基因工程的、基因工程的指指“DNADNA连接酶连接酶”“”作用：作用：将互补配对的两个粘性末端将互补配对的两个粘性末端连接起来，使之成为一个完连接起来，使之成为一个完整的整的DNADNA分子分子DNA连接酶的作用过程连接酶的作用过程点击播放点击播放 DNADNA连接酶的作用位点连接酶的作用位点是：相邻的两个是：相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成：脱氧核苷酸的切口。即生成：磷酸二酯键磷酸二酯键。T磷磷酸酸二二酯酯键键1234512345A3、基因工程的运载体、基因工程的运载体（2 2）常用的运载体：）常用的运载体：质粒、噬菌体和动、植物病毒等质粒、噬菌体和动、植物病毒等（1 1）运载体：将外源

4、基因）运载体：将外源基因 送入受体细胞的运输工具送入受体细胞的运输工具 标记基标记基因，便因，便于进行于进行检测。检测。其中其中质粒质粒存在于存在于许多细菌和酵母菌等许多细菌和酵母菌等生物中生物中,是细胞染色体是细胞染色体外能够自主复制的外能够自主复制的很很小的环状小的环状DNADNA分子分子.作为载体的必要条件作为载体的必要条件v1.1.能自我复制能自我复制v能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；v2.2.有一个至多个限制酶切位点有一个至多个限制酶切位点v能与目的基因结合能与目的基因结合v3.3.有遗传标记基因有遗传标记基因v便于观察便

5、于观察v4.4.对受体细胞无害、易分离对受体细胞无害、易分离v安全、比较容易得到安全、比较容易得到基因工程培育黄金大米的的简要过程基因工程培育黄金大米的的简要过程*模拟一下黄金大米的培育过程！模拟一下黄金大米的培育过程！玉米细胞玉米细胞提取提取提取提取相应基因相应基因 普通大米细胞普通大米细胞大米细胞大米细胞(含相应基因含相应基因)与运载体与运载体与运载体与运载体DNADNADNADNA拼接，导入拼接，导入拼接，导入拼接，导入大米植株大米植株(长黄金大米长黄金大米)表达表达表达表达从细胞中分从细胞中分离出离出DNA从大肠杆菌从大肠杆菌中提取质粒中提取质粒限制限制酶酶提取目的基因提取目的基因限制

6、酶限制酶目的基因与运目的基因与运载体结合载体结合DNA连连接酶接酶目的基因导入目的基因导入受体细胞受体细胞目的基因的表目的基因的表达与检测达与检测基因工程操作的基本步骤基因工程操作的基本步骤要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（）限制酶连接酶解旋酶还原酶实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别分子的顺序，切点在和之间，这是利用了酶的（）高效性专一性 多样性催化活性易受外界影响随随练习练习v3、下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（）v目的基因的检测与表达v目的基因与运载体结合v将目的基因导入受体细胞v目的基

7、因的提取vA、B、vC、D、C基因工程的基因工程的别别名名操作原理操作原理操作操作对对象象操作水平操作水平操作工具操作工具基本基本过过程程结结果果基因拼接技术或基因拼接技术或DNA重组技术重组技术基因重组基因重组DNA或基因或基因DNA分子水平分子水平限制酶、限制酶、DNA连接酶、运载体连接酶、运载体（1）提取目的基因）提取目的基因（2）目的基因与运载体结合）目的基因与运载体结合（3）将目的基因导入受体细胞）将目的基因导入受体细胞（4）目的基因的表达和检测）目的基因的表达和检测人类需要的基因产物人类需要的基因产物你知道什么是真正的硕果累累吗?转转基基因因产产品品知知多多少少抗虫棉抗虫棉抗抗CM

8、VCMV甜椒甜椒基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因生长快、肉质好的转基因鱼鱼(中国中国)乳汁中含有人生长激素的乳汁中含有人生长激素的转基因牛转基因牛(阿根廷阿根廷)转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基因转鱼抗寒基因的番茄的番茄基因工程与药物研制基因工程与药物研制我国生产的部分基因我国生产的部分基因工程疫苗和药物工程疫苗和药物许多药品的生产许多药品的生产是从生物组织中提取是从生物组织中提取的。受材料来源限制的。受材料来源限制产量有限，其价格往产量有限，其价格往往十分昂贵。往十分昂贵。微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生

9、产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。产量问题，还能大大降低生产成本。转基因抗乙肝西红柿转基因抗乙肝西红柿(中国中国)，虽然不能治愈，虽然不能治愈乙肝，但一年只吃几个抗乙肝西红柿，就完全能乙肝，但一年只吃几个抗乙肝西红柿，就完全能代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食品，就是将乙肝疫苗植入西红柿内，经过多代繁品，就是将乙肝疫苗植入西红柿内，经过多代繁殖，使转入的基因稳定化。殖，使转入的

10、基因稳定化。用转基因的植物生产药物用转基因的植物生产药物胰岛素从猪、牛等动物的胰胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，腺中提取，100Kg100Kg胰腺只能提取胰腺只能提取4-5g4-5g的胰岛素，其产量之低和价的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。格之高可想而知。将合成的胰岛素将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，基因导入大肠杆菌，每每2000L2000L培养液就能培养液就能产生产生100g100g胰岛素！使胰岛素！使其价格降低了其价格降低了30%-30%-50%!50%!基因工程做成的基因工程做成的“超级细菌超级细菌”能吞食和能吞食和分解多种污染环境的物质。分解多种污染环境的物质。通常一种假单孢通

11、常一种假单孢杆菌只能分解石油中杆菌只能分解石油中的一种烃类用基因的一种烃类用基因工程培育成功的工程培育成功的“超超级细菌级细菌”却能分解石却能分解石油中的多种烃类化合油中的多种烃类化合物。物。科学家还培育出能吞食转化汞、镉等重金属，分科学家还培育出能吞食转化汞、镉等重金属，分解解DDTDDT等毒害物质的细菌。等毒害物质的细菌。环境污染治理环境污染治理 利用基因工程培育的利用基因工程培育的“指示生物指示生物”能十分灵敏能十分灵敏地反映环境污染的情况，却不易因环境污染而大量死地反映环境污染的情况，却不易因环境污染而大量死亡，甚至还可以吸收和转化污染物亡，甚至还可以吸收和转化污染物。水母结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！38