实验三、血清中总胆固醇的测定教学提纲.ppt

《实验三、血清中总胆固醇的测定教学提纲.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验三、血清中总胆固醇的测定教学提纲.ppt（9页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、血清血清(xuqng)中中总胆固醇的测定总胆固醇的测定实验实验(shyn)三三（胆固醇氧化酶法）（胆固醇氧化酶法）第一页，共9页。一、实验一、实验(shyn)目的目的学习胆固醇氧化酶法测定血清学习胆固醇氧化酶法测定血清(xuqng)总胆固总胆固醇的原理。醇的原理。掌握血清掌握血清(xuqng)总胆固醇的测定方法及操作总胆固醇的测定方法及操作技术。技术。第二页，共9页。（1）（3）H2O2+4-氨基氨基(nj)安替吡啉（安替吡啉（4-AAP）苯酚苯酚游离胆固醇游离胆固醇FAA胆固醇酯酶胆固醇酯酶胆固醇酯酶胆固醇酯酶H2O 红色红色(hngs)醌醌类物质类物质过氧化物过氧化物过氧化物过氧化物(u

2、yn hu w)(u yn hu w)酶酶酶酶（PODPOD）510nm光吸收法测定光吸收法测定光吸收法测定光吸收法测定相对相对血清总胆固醇血清总胆固醇血清总胆固醇血清总胆固醇浓度浓度二、实验原理二、实验原理血清总胆固醇血清总胆固醇游离胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇酯胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆甾烯酮胆甾烯酮+H2O2（2）游离胆固醇游离胆固醇第三页，共9页。三、实验三、实验(shyn)器材器材材料：人血清试剂：总胆固醇测定试剂盒用具(yngj)：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅第四页，共9页。（1）取）取3支试管，按下表加入支试管，按下表加入(jir)试

3、剂试剂:试剂试剂试剂空试剂空白管白管标准标准管管样品管样品管1样品管样品管2 样品管样品管3工作试剂工作试剂(mL)1.01.01.01.01.0标准液标准液(uL)10.0血清样品血清样品(uL)10.010.010.0四、实验四、实验(shyn)步骤步骤充分混匀，充分混匀，37 水浴水浴(shu y)中保温中保温15min；冷却至室温后冷却至室温后，510nm处比色处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品样品管光密度值。管光密度值。第五页，共9页。（2）计算：）计算：依据依据(yj)朗伯朗伯-比尔定律：比尔定律：A=KLC 标准管胆固醇浓度：标准管

4、胆固醇浓度：5.17mmol/L 样品样品管管胆固醇浓度胆固醇浓度(mmol/L)样品样品管光密度管光密度值值 标准管光密度标准管光密度值值5.17C样=A样A标 C标第六页，共9页。参考值胆固醇胆固醇 血清参考值：血清参考值：3.0 5.20mmol/L 危险危险(wixin)阈值：阈值：5.20 6.20mmol/L 高胆固醇血症：高胆固醇血症：6.20mmol/L 第七页，共9页。正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的液应占比色皿的2/3。测定胆固醇所用测定胆固醇所用(su yn)的试剂应防止被葡的试剂应防止被葡萄糖和甘油三酯污染。萄糖和甘油三酯污染。微量移液枪的正确使用微量移液枪的正确使用注意事项注意事项第八页，共9页。思考题思考题1、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本原理？的基本原理？2、分析影响实验结果、分析影响实验结果(ji gu)的因素有哪些的因素有哪些？如何克服？如何克服？第九页，共9页。