医院感染监测标本采集的标准操作知识讲解.ppt

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1、医院感染监测标本采集的标准操作1 1环境卫生学监测环境卫生学监测2 23 3常见多重耐药菌的监测常见多重耐药菌的监测压力蒸气灭菌的生物学检测压力蒸气灭菌的生物学检测卫生手清毒监测的细菌菌落总数应10cfu/2外科手消毒监测的细菌菌落总数应5cfu/2 不能检出致病性微生物手手的的消消毒毒效效果果监监测测医院空气消毒与监测医院空气消毒与监测u普通病区空气中的绝大多数细菌与医院感染无关u卫生标准无科学依据（尘埃粒子浓度意义更大）u采样时，临床操作不规范u这些数据通常没有价值空气需要常规监测吗空气需要常规监测吗 目前普通科室取消常规空气监测目前普通科室取消常规空气监测 重点科室有针对性的采样监测重点

2、科室有针对性的采样监测ICS ICS 11.020C 05C 05WSWS中华人民共和国卫生行业标准WS/T 3672012医疗机构消医疗机构消毒技术规范毒技术规范中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 发布发布 2012-04-05发布 2012-08-01实施Regulation of disinfection technique in healthcare settingsICS ICS 11.020C 05C 05WSWS中华人民共和国卫生行业标准WS/T 3682012医院空气净医院空气净化管理规范化管理规范Management specification of air clean

3、ing technique in hospitals中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 发布发布 2012-04-05发布 2012-08-01实施对感染高风险部门每季度进行监测；洁净场所、新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测医院应对感染高风险部门如手术部、产房、导管室、层流病房、器官移植病房、ICU、新生儿室、母婴同室、血透室、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。洁净手术部(室)及其他洁净场所，根据洁净房间总数，合理安排每次监测的房间数量，保证每个洁净房间能每年至少监测一次，其监测方法及结果的判定应符合GB50333的要求 空

4、气净化效果监测监测部门 监测频度 监测方法 空气净化效果监测手术室产房导管室洁净病房器官移植病房ICU新生儿室母婴同室血透烧伤病房常规：每季度监测一次临时：遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测 洁净手术部及其他洁净场所，根据洁净房间总数，合理安排每次监测的房间数量，保证每个洁净房间能每年至少监测一次 洁净手术部(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测 常用的空气消毒方法通风通风1集中空调通风系统集中空调通风系统2空气洁净技术空气洁净技术3紫外线消毒紫外线消毒4空气消毒器空气消毒器5化学消毒法化学消毒法6循环风紫外线空气消毒器 静电吸附式空气消毒器 普通中央

5、空调通风系统 带有净化装置的中央空调通风通风自然通风自然通风机械通风机械通风机械送风与自然排风自然送风与机械排风机械送风与机械排风自然通风自然通风应根据季节、室外风力和气温，适时进行通风。机械通风机械通风是通过安装通风设备，利用风机、排风扇等运转产生的动力，使空气流动。机械送风与自然排风机械送风与自然排风适用于污染源分散及室内空气污染不严重的场所。机械送风口宜远离门窗。自然送风与机械排风自然送风与机械排风适用于室内空气污染较重的场所。室内排风口宜远离门，宜安置于门对侧墙面上。机械送风与机械排风机械送风与机械排风适用于卫生条件要求较高的场所。根据通风的需要设定换气次数或保持室内的正压或负压。应定

6、期对机械通风设备进行清洁，遇污染及时清洁与消毒。空气消毒器空气消毒器作用原理作用原理适用范围适用范围注意事项注意事项过滤、紫外线、静电吸附、等离子体、光触媒适用于有人状态下的室内空气消毒消毒时应关闭门窗；进风口、出风口不应有物品覆盖或遮挡。采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样 未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样 怀疑与医院感染暴发有关时采样空气消毒效果监测空气消毒效果监测采样时间采样时间空气消毒效果监测空气消毒效果监测监测方法洁净手术部（室）及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法进行监测。浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验

7、证的空气采样器。监测时将采样器置于室内中央0.8m-1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间面积10m2者，每增加10m2增设一个采样点。空气消毒效果监测空气消毒效果监测未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。空气消毒效果监测空气消毒效果监测将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m-1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。手臂越过平皿皿盖朝上皿盖朝上旧结果计算方法

8、;空气细菌总数（cfu/m3）=50000N/(AT)=157N 注：A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为各平板内平均菌落数（CFU）洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应4cfu/(30min直径9cm平皿)非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数4cfu/(15min直径9cm平皿)儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数

9、4cfu/(5min直径9cm平皿)空气消毒效果监测结果判定空气消毒效果监测结果判定注意事项注意事项1、采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样2、放置平板时，放置顺序是从里往外放，收起的时候是从外往里收，这样避免人员走动引起空气中漂浮粒子震荡引起结果偏高。洁净室空气消毒效果监测洁净室空气消毒效果监测空气净化的目的空气净化的目的通过空气净化创造一个温度、湿度适宜，空气清新，无菌、洁净的微环境，将室内整个环境设施、器械进行科学地组构，使秩序性、方便性、安全性、清洁性和无菌程度都达到一个理想的高度，为手术的成功提供保障。监测状态监测状态对于消毒效果监测，都做静态检测。一般动态检

10、测只是作为参考，常用于一些课题研究等，因为每个人的动作幅度大小不一，人员数量不一。如果ICU是洁净环境的，通常动态标准为静态条件下乘以5倍。如果是普通ICU，则是4cfu/15min.直径9cm平皿乘以5倍。静态：室内设施及功能齐全，空调净化系统正常运行，但无人员的状态空态：空调净化系统正常运行，没有安装设备，也没有人员动态：一切系统正常运行、医护人员进行正常手术操作的状态，是我们日常工作的状态布点顺序：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每个房

11、间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，沉降时间略有差别。最少沉降菌培养皿数最少沉降菌培养皿数被测区域洁净度级别 最少培养皿数（90平皿，暴露30min)100级-521(13+8)1000级-611(5+6)10000级-77(3+4)100000级-85 300000级8.55医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范-GB 2002-GB 2002医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范-GB503332013 报批稿 空白对照空白对照洁净室空气采样时必须有2次空白对照。第1次:对用于检测的培养皿培养皿做对比试验，每批一个对照皿第2次:是在检测时，每室或每区1

12、个对照皿。对操作过操作过程程做对照实验。对照皿放置方法为将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置30分钟，收起，培养，除30分钟沉降过程为带盖沉降与测试皿不同外，其余过程均一样。两次对照都必须为阴性阴性，整个操作应符合无菌操作的要求采样中常见的误区采样中常见的误区采样时开启空气处理机时间不足30分钟手术间未清洁、开着手术间的门采样采样时培养皿放置位置不符合要求采样时有人员流动未洗手、未穿无菌衣进行采样平皿受到污染 平皿应新鲜透亮，当天领取使用。物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测在消毒处理在消毒处理后或怀疑与后或怀疑与医院感染暴医院感染暴发有关时进发有关时进行采样行采样物体

13、表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测采样频率？采样频率？医疗机构消毒技术规范医院空气净化管理规范院感科：张晓芸物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测采样方法采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积被采表面100cm2，取全部表面被采面积100cm2，取100cm2物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测采样方法采样方法剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体

14、表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。硫代硫酸钠（0.1%1.0%）物体表面消毒效果监测结果判定物体表面消毒效果监测结果判定 洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数5cfu/cm2 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数10cfu/cm2医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测

15、采样时间采样时间 在接触患者、进行诊疗活动前采样。医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测采样方法采样方法 被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂硫代硫酸钠（0.1%1.0%）的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指端到指根再到指端为往返1次，共往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测卫生手清毒监测的细菌菌落总数应10cfu/2外科手消毒监测的细菌菌落总数应5cfu/2 不能检出致病性微生物手手的的消消毒毒效效果果监监测测使用中的消毒剂及灭菌剂

16、监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测采样方法：用无菌注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀 使用中的消毒剂及灭菌剂监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测监测频率：消毒剂每季度监测一次灭菌剂每月监测一次结果判断：使用中灭菌用消毒液：无菌生长使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10cfu/ml其他使用中消毒液染菌量100cfu/ml注意事项：采样后4h内检测 1.采样时间:采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。2.采样量及方法:在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml稀释液中混均，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需

17、在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在 肉汤中加入3%吐温80，以中和被检样液的残效作用。使用中的消毒剂及灭菌剂监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测3.细菌菌落总数检查:采样管于混旋仪上混匀2分钟，取1ml采样液放入无菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，每份样品同时做2个平行样，一平板置于28培养7天，观察霉菌生长情况；另一个平板置于361培养72小时计数菌落数。4.结果计算：消毒液染菌量（cfu/ml）=平板上的菌落平均数10 稀释倍数（常为1）。

18、使用中的消毒剂及灭菌剂监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测5.结果分析:平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。6.判断标准6.1使用中灭菌用消毒液：无菌生长6.2使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10cfu/ml6.3其他使用中消毒液染菌量100cfu/ml使用中的消毒剂及灭菌剂监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测1 1环境卫生学监测环境卫生学监测2 23 3常见多重耐药菌的监测常见多重耐药菌的监测压力蒸气灭菌的生物学检测压力蒸气灭菌的生物学检测压力蒸气灭菌的生物学检

19、测压力蒸气灭菌：其中生物指标为检查灭菌效果的直接监测指标。通常采用嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC 7953)作为观察灭菌效果的指示菌。生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌，定期监测（每月一次）化学指示剂：变色的指示带（每锅监测）压力表定期检测（每半年一次）安全阀检测、校验（每年一次）压力蒸气灭菌的生物学检测培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经561培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果；结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳

20、性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物批示物不需要做阴性对照；注意事项：监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用。过氧化氢低温等离子灭菌、环氧乙过氧化氢低温等离子灭菌、环氧乙烷气体灭菌效果的监测烷气体灭菌效果的监测标准指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢监测方法：将常规生物测试包放在灭菌器最难灭菌的部位（整个装载灭菌包的中心部位）。灭菌周期完成后应立即取出指示菌片接种于含有复方中和剂的0.5%的葡萄糖肉汤培养基管中，361培养7d（自含式生物指示物应遵循产品说明），观察培养基颜色变化，同时设阳性对照；结果判定：阳性对照组培养阳性，

21、试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或污染所致；注意事项：监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用。赤峰学院附属医院红山院区2014年环境卫生学监测计划1 1环境卫生学监测环境卫生学监测2 23 3常见多重耐药菌的监测常见多重耐药菌的监测压力蒸气灭菌的生物学检测压力蒸气灭菌的生物学检测几种多重耐药菌监测几种多重耐药菌监测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐青霉素的肺炎链球菌的检测（PRSP）耐万古霉素肠球菌（VRE）产超广谱-内酰胺酶细菌（ESBLs）多重耐药/泛耐药的鲍曼不动杆菌

22、（MDR/PDR-AB）多重耐药/泛耐药的铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA）耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌（CRE包括 NDM-1）耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌（CR-AB）耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VRSA）多重耐药结核分枝杆菌（MDRMT）几种多重耐药菌监测几种多重耐药菌监测2010-2013年主要细菌分离情况趋势图 2010-2013年临床多重耐药菌分离趋势图2013年赤峰学院附属医院细菌耐药监测年鉴谢谢大家！谢谢大家！希望我们互相沟通，希望我们互相沟通，一起做好感控工作！一起做好感控工作！课件-公共邮箱密码：cf1234物体表面的清洁与消毒 物体表面（地面）的清洁与消毒地面的清

23、洁与消毒 地面无明显污染时，采用湿式清洁。当地面受到患者血液、体液等明显污染时，先用吸湿材料去除可见的污染物，再清洁和消毒 室内用品如桌子、椅子、凳子、床头柜等的表面无明显污染时，采用湿式清洁。当受到明显污染时，先用吸湿材料去除可见的污染物，然后再清洁和消毒 感染高风险部门地面和物体表面的清洁与消毒 感染高风险的部门如手术部、产房、导管室、洁净病房、器官移植病房、ICU、新生儿室、血透、烧伤病房、感染疾病科、口腔科、检验科、急诊等病房与部门的地面与物体表面，应保持清洁、干燥，每天进行消毒，遇明显污染随时去污、清洁与消毒 物体表面消毒剂浓度选择地面采用400mg/L700mg/L有效氯的含氯消毒

24、液擦拭，作用30min 消毒方法同地面或采用1 000mg/L2 000mg/L季铵盐类消毒液擦拭。地面和物体表面的清洁与消毒地面无明显污染当受到患者血液、体液等明显污染 湿式清洁 先用吸湿材料去除可见的污染物，再清洁和消毒 被排泄物、呕吐物等污染的地面，用漂白粉或生石灰覆盖，作用60min后清理。（卫生部手足口病预防控制指手足口病预防控制指南南20092009版）版）感染高风险部门地面和物体表面的清洁与消毒 手术室产房导管室洁净病房器官移植病房ICU新生儿室血透烧伤病房感染疾病科口腔科检验科急诊等 应保持清洁、干燥，每天进行消毒 遇明显污染随时去污、清洁与消毒 地面消毒采用400mg/L700mg/L有效氯的含氯消毒液擦拭，作用30min 物体表面消毒方法同地面或采用 1000mg/L2 000mg/L季铵盐类消毒液擦拭。结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！73