最新微生物-微生物与环境PPT课件.ppt

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1、微生物微生物-微生物与环境微生物与环境第四章、微生物与外界环境第四章、微生物与外界环境 l掌握微生物在自然界中的分布掌握微生物在自然界中的分布,以及理以及理化因素、生物因素对微生物的影响。化因素、生物因素对微生物的影响。l掌握消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操掌握消毒、灭菌、防腐、无菌及无菌操作的概念。作的概念。l了解影响消毒剂作用的因素了解影响消毒剂作用的因素,掌握抗生掌握抗生素筛选方法。素筛选方法。三、水中的微生物三、水中的微生物l水中的微生物主要来源于土壤、尘埃、人畜水中的微生物主要来源于土壤、尘埃、人畜排泄物及垃圾、污水等。排泄物及垃圾、污水等。l水中的微生物种类和数量因水源不同而异水中的

2、微生物种类和数量因水源不同而异,一般地面水比地下水微生物含量高一般地面水比地下水微生物含量高,并且容易并且容易被病原菌污染。借水传播的传染病常见的有伤被病原菌污染。借水传播的传染病常见的有伤寒、痢疾、霍乱、钩端螺旋体病、鼻疽、布氏寒、痢疾、霍乱、钩端螺旋体病、鼻疽、布氏杆菌病、巴氏杆菌病、炭疽、口蹄疫、猪瘟等。杆菌病、巴氏杆菌病、炭疽、口蹄疫、猪瘟等。l病原菌进入水体后病原菌进入水体后,常常因水的自洁作用而难常常因水的自洁作用而难以长期存在以长期存在,但也有些病原菌在水中可存活相当但也有些病原菌在水中可存活相当长时间长时间,成为传染的疫源。成为传染的疫源。l一般采用细菌总数和大肠菌群数一般采用

3、细菌总数和大肠菌群数(MPN)(MPN)作为卫作为卫生指标来判定水的污染程度。目前我国规定生生指标来判定水的污染程度。目前我国规定生活饮用水的标准为活饮用水的标准为1 1毫升水中细菌总数不得超过毫升水中细菌总数不得超过100100个个,大肠菌群数大肠菌群数10001000毫升水中不得超过毫升水中不得超过3 3个个。四、正常动物体微生物四、正常动物体微生物l动物体表、黏膜及与外界相通的腔道动物体表、黏膜及与外界相通的腔道,如口腔、如口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等都附着有各种细鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等都附着有各种细菌菌,大多被排出体外，只有适应于该部位的细大多被排出体外，只有适应于该部位的细菌

4、菌,才能发育增殖。这些在某些部位恒能发现才能发育增殖。这些在某些部位恒能发现的菌群的菌群,称为正常菌群或称为正常菌群或常在菌群常在菌群l正常动物体微生物功能：正常动物体微生物功能：拮抗作用拮抗作用(肠道正常栖居的大肠杆菌产肠道正常栖居的大肠杆菌产生大肠菌素生大肠菌素,抑制其他致病性大肠杆菌抑制其他致病性大肠杆菌生长生长)营养作用营养作用(肠道中的大肠杆菌能合成肠道中的大肠杆菌能合成VBVB及及VK)VK)免疫作用免疫作用(刺激机体产生天然抗体刺激机体产生天然抗体)l正常菌群与人体及与其它微生物之间的生态正常菌群与人体及与其它微生物之间的生态学关系表现于以下几方面学关系表现于以下几方面:(1)(

5、1)共生共生(synbiosis)(synbiosis)在特定的环境内各种在特定的环境内各种菌类可在一起共同生活。菌类可在一起共同生活。伴生伴生:宿居细菌可以从宿主获得生存的条件宿居细菌可以从宿主获得生存的条件,但对宿主既无利又无害。但对宿主既无利又无害。互生互生:是相互有利。是相互有利。寄生寄生:是指细菌不仅从宿主得到有利于生存是指细菌不仅从宿主得到有利于生存的条件的条件,并能损害宿主并能损害宿主,如金黄色葡萄球菌如金黄色葡萄球菌寄居于鼻腔是无害的伴生菌寄居于鼻腔是无害的伴生菌,但进入肺部或但进入肺部或创伤内即成为寄生菌。创伤内即成为寄生菌。(2)(2)拮抗拮抗(antagonism):(a

6、ntagonism):某一种细菌的生活某一种细菌的生活活动抑制另一种细菌的生长繁殖活动抑制另一种细菌的生长繁殖,甚至杀死甚至杀死另一种细菌的现象叫拮抗。另一种细菌的现象叫拮抗。l为了科学研究和生产实践需要为了科学研究和生产实践需要,创造了获得无创造了获得无菌动物菌动物(GF)(GF)和无特定病原动物和无特定病原动物(SPF)(SPF)的方法。的方法。l无菌动物无菌动物(GF)(GF)是指体表、体内任何部位是指体表、体内任何部位,用现用现有的检测技术有的检测技术,查不出任何细菌、病毒和寄生查不出任何细菌、病毒和寄生虫的实验动物。虫的实验动物。l无特定病原动物无特定病原动物(SPF)(SPF)是指

7、一个动物群中是指一个动物群中,不不存在某些特定的病原微生物和寄生虫存在某些特定的病原微生物和寄生虫,也不含也不含有相应的抗体有相应的抗体,动物呈明显健康状态。动物呈明显健康状态。l悉生动物（悉生动物（GNGN）又称已知菌丛动物。又称已知菌丛动物。几个有关术语几个有关术语u消毒消毒:指用理化方法指用理化方法,杀灭物体中的病原微生杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。用以消毒的药物称为消毒剂。求全部杀死。用以消毒的药物称为消毒剂。u灭菌灭菌:指

8、杀灭物体中所有微生物及其芽孢、指杀灭物体中所有微生物及其芽孢、霉菌孢子的方法。霉菌孢子的方法。u防腐防腐:是指应用某些理化因子是指应用某些理化因子,抑制或防止微抑制或防止微生物生长繁殖的方法生物生长繁殖的方法(又称抑菌又称抑菌)。u抑菌作用抑菌作用:指某些物质或因素所具有的抑制微指某些物质或因素所具有的抑制微生物生长与繁殖的作用。生物生长与繁殖的作用。杀菌作用杀菌作用:指某些物指某些物质或因素所具有的在一定条件下杀死微生物的质或因素所具有的在一定条件下杀死微生物的作用。作用。抗菌作用抗菌作用:药物具有的抑菌或杀菌作用。药物具有的抑菌或杀菌作用。u无菌无菌：指没有活的微生物的状态。：指没有活的微

9、生物的状态。无菌操作无菌操作:采取防止或杜绝任何微生物进入动物体或其采取防止或杜绝任何微生物进入动物体或其他物体的方法。他物体的方法。u过滤除菌过滤除菌:通过滤器过滤后通过滤器过滤后,液体或气体中无液体或气体中无任何细菌存在的方法。任何细菌存在的方法。一、温度一、温度l各种细菌都有最高和最低生长温度各种细菌都有最高和最低生长温度,低于最低低于最低温度尚能存活温度尚能存活,但生长繁殖受到抑制但生长繁殖受到抑制;如高于最如高于最高温度高温度,便可杀死细菌便可杀死细菌,这种能杀死细菌的最底这种能杀死细菌的最底温度界限温度界限,称为致死温度。称为致死温度。l大多数致病菌的最适生长温度范围为大多数致病菌

10、的最适生长温度范围为20-20-4040,如果超过如果超过45,45,则可导致其发生形态、代则可导致其发生形态、代谢、毒力的改变谢、毒力的改变,甚至死亡。甚至死亡。l根据微生物的最适生长温度的不同根据微生物的最适生长温度的不同,可将可将微生物划为三个类型：微生物划为三个类型：低温型微生物（嗜冷微生物）低温型微生物（嗜冷微生物）中温型微生物（嗜温微生物）中温型微生物（嗜温微生物）高温型微生物（嗜热微生物）高温型微生物（嗜热微生物）微生物生长温度类型微生物生长温度类型微生物类型微生物类型生长温度范围（生长温度范围（）分布区域分布区域最低最低最适最适最高最高嗜冷嗜冷微生微生物物专性嗜冷型专性嗜冷型-

11、12-125 5151515152020地球两极地球两极兼性嗜冷型兼性嗜冷型-5-50 010102020 25253030海洋、冷泉、冷藏食品海洋、冷泉、冷藏食品嗜温嗜温微生微生物物室温型室温型1010202020203535 40404545腐生环境腐生环境体温型体温型1010202035354040 40404545寄生环境寄生环境嗜热微生物嗜热微生物2525454550506060 70709595温泉、堆肥、土壤温泉、堆肥、土壤l生产和科研实践中生产和科研实践中,常在低温下保存菌种常在低温下保存菌种,常用常用高温灭菌高温灭菌,又称为热力灭菌法又称为热力灭菌法,分分干热灭菌干热灭菌和和

12、湿湿热灭菌热灭菌两类。两类。l湿热比干热效果好。因为菌体蛋白质在湿热中湿热比干热效果好。因为菌体蛋白质在湿热中较易变性凝固较易变性凝固;湿热的穿透力比干热大湿热的穿透力比干热大;湿热蒸湿热蒸汽有潜热存在汽有潜热存在,水由气态变为液态时放出的潜热水由气态变为液态时放出的潜热,可迅速提高被灭菌物体的温度。可迅速提高被灭菌物体的温度。火焰灭菌法火焰灭菌法热空气灭菌法干热灭菌法煮沸灭菌法巴氏消毒法流通蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法湿热灭菌法热力灭菌法间歇灭菌法1.1.干热灭菌法干热灭菌法l包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。火焰灭菌法火焰灭菌法是以火焰直接烧灼杀死物体中微生是以火焰直

13、接烧灼杀死物体中微生物的方法。是一种最彻底的方法物的方法。是一种最彻底的方法,但使用范围有但使用范围有限。分为灼烧和焚烧两种。限。分为灼烧和焚烧两种。热空气灭菌热空气灭菌指利用指利用干热灭菌器以干热空气进行灭菌的方法。用于干热灭菌器以干热空气进行灭菌的方法。用于耐高温物品。耐高温物品。l灭菌条件灭菌条件:160-170:160-170维持维持1-2h,1-2h,才能杀死所有才能杀死所有微生物微生物(芽孢、孢子芽孢、孢子)。2.2.湿热灭菌法湿热灭菌法煮沸灭菌煮沸灭菌:煮沸煮沸10-20min10-20min可杀死所有细可杀死所有细菌繁殖体菌繁殖体,芽孢体需要煮沸芽孢体需要煮沸5 56h6h才被

14、杀才被杀死。在水中加入死。在水中加入1%1%碳酸氢钠或碳酸氢钠或2%2%5%5%石石炭酸炭酸,提高沸点提高沸点,灭菌效果会更好灭菌效果会更好,且可且可防防止金属器械生锈止金属器械生锈。手术器械、注射器、。手术器械、注射器、针头及食具等可用此法。针头及食具等可用此法。巴氏消毒法巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中病原以较低温度杀灭液态食品中病原菌或特定微生物菌或特定微生物,尽量保持其营养成分和风味的尽量保持其营养成分和风味的消毒方法。葡萄酒、啤酒及牛乳等食品消毒。消毒方法。葡萄酒、啤酒及牛乳等食品消毒。l巴氏消毒法具体方法有三种巴氏消毒法具体方法有三种低温维持巴氏消毒法低温维持巴氏消毒法 (LT

15、H)63-65 30min(LTH)63-65 30min；高温瞬时巴氏消毒法高温瞬时巴氏消毒法 (HTST)71-72 15s(HTST)71-72 15s；超高温巴氏消毒法超高温巴氏消毒法 (UHT)132 1-2s(UHT)132 1-2s。l消毒后均须迅速冷却至消毒后均须迅速冷却至1010以下以下,促进细菌死促进细菌死亡亡,称为冷击法。一般加热称为冷击法。一般加热61.1-62.861.1-62.8半小时半小时,或或71.771.7经经15-3015-30秒钟秒钟,便可达到目的便可达到目的 流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法:利用蒸汽在流通蒸汽灭菌器利用蒸汽在流通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法内

16、进行灭菌的方法,温度通常不超过温度通常不超过100100。维。维持持15-30min,15-30min,可杀死繁殖体可杀死繁殖体,但不能杀死芽孢体。但不能杀死芽孢体。实验室常用容器为阿诺流通蒸汽灭菌器。实验室常用容器为阿诺流通蒸汽灭菌器。间歇灭菌法间歇灭菌法:反复多次利用流通蒸汽灭菌法。反复多次利用流通蒸汽灭菌法。流通蒸汽灭菌流通蒸汽灭菌15-30min,15-30min,然后置室温或然后置室温或3737过夜过夜,次日重复加热灭菌一次次日重复加热灭菌一次,如此重复三次如此重复三次,达到完达到完全灭菌目的。用于不耐高温的培养基的灭菌。全灭菌目的。用于不耐高温的培养基的灭菌。高压蒸汽灭菌法高压蒸汽

17、灭菌法:用高压蒸汽灭菌器进行灭菌用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法。是应用最广、最有效的灭菌方法。的方法。是应用最广、最有效的灭菌方法。l条件条件:在压力达在压力达0.10343Mpa,0.10343Mpa,温度温度121.3121.3下下,维持维持15-20min,15-20min,即可杀死一切微生物和芽孢即可杀死一切微生物和芽孢,达到达到完全灭菌的目的。完全灭菌的目的。l常用于培养基、溶液、器皿、器械、敷料、橡常用于培养基、溶液、器皿、器械、敷料、橡皮手套、工作服和小实验动物尸体等的灭菌。皮手套、工作服和小实验动物尸体等的灭菌。l注意注意:须充分排除灭菌器内原有的冷空气。须充分排除灭菌器内原有

18、的冷空气。影响高温灭菌效果的因素1.1.介质的性质介质的性质:高热性能最佳的介质是水。酸性介质较高热性能最佳的介质是水。酸性介质较中性或碱性介质的杀菌效果好。菌体水分越多中性或碱性介质的杀菌效果好。菌体水分越多,杀菌所杀菌所需温度越低。繁殖体之所以不耐热需温度越低。繁殖体之所以不耐热,芽孢体之所以耐热芽孢体之所以耐热,就是它们各自的含水量不同。就是它们各自的含水量不同。2.2.菌龄菌龄:生长期的幼龄菌较老龄菌对热的耐受力弱。在生长期的幼龄菌较老龄菌对热的耐受力弱。在最适温度条件下形成的芽孢最适温度条件下形成的芽孢,较在最低或最高耐受温度较在最低或最高耐受温度下形成的芽孢下形成的芽孢,对温度的抵

19、抗力大。对温度的抵抗力大。3.3.加热温度与时间加热温度与时间:繁殖体在繁殖体在100100数分钟死亡。大多数分钟死亡。大多数致病菌繁殖体在数致病菌繁殖体在60-703060-7030分钟死亡。分钟死亡。二、干燥和渗透压二、干燥和渗透压l干燥可使细菌丧失水分干燥可使细菌丧失水分,引起蛋白质变性和菌引起蛋白质变性和菌体内盐浓度增高体内盐浓度增高,致使新陈代谢发生障碍致使新陈代谢发生障碍,导致导致死亡。死亡。l细菌对干燥的抵抗力较强细菌对干燥的抵抗力较强,但在干燥条件下不但在干燥条件下不能生长繁殖能生长繁殖,处于处于“休眠休眠”状态。状态。(保存菌种、保存菌种、生物制品生物制品)l在高渗溶液中在高

20、渗溶液中,细胞脱水细胞脱水,造成细菌的质壁分离造成细菌的质壁分离(盐腌或糖渍保存食品盐腌或糖渍保存食品)。相反。相反,细菌在低渗溶液细菌在低渗溶液中中,吸收水分吸收水分,则菌体膨大或破裂则菌体膨大或破裂。三、辐射三、辐射l辐射是指能源通过空气或外层空间辐射是指能源通过空气或外层空间,以波动方以波动方式从一个地方传播到另一个地方式从一个地方传播到另一个地方,分为电离辐射分为电离辐射和非电离辐射。和非电离辐射。l电离辐射包括电离辐射包括射线、射线、射线、射线、射线、射线、X X射线等。非电离辐射包括可见光、日光、紫外射线等。非电离辐射包括可见光、日光、紫外线等。线等。l波长越长波长越长,杀菌力越弱

21、杀菌力越弱。紫外线、。紫外线、X X射线、射线、射线均具有较强的杀菌作用。射线均具有较强的杀菌作用。红外线紫外线X射线射线微 波无线电波可见光谱紫外光谱杀 菌晒黑日 光波 长 增 加能 量 增 加用于灭菌的电磁波有微波用于灭菌的电磁波有微波用于灭菌的电磁波有微波用于灭菌的电磁波有微波,紫外线、紫外线、紫外线、紫外线、X-X-X-X-射线和射线和射线和射线和-射线等射线等射线等射线等电磁波波长与杀菌作用1.1.1.1.可见光可见光可见光可见光:指在红外线和紫外线之间指在红外线和紫外线之间指在红外线和紫外线之间指在红外线和紫外线之间,肉眼可见肉眼可见肉眼可见肉眼可见的光线的光线的光线的光线,波长波

22、长波长波长400-800nm400-800nm400-800nm400-800nm。可见光线只有微弱的。可见光线只有微弱的。可见光线只有微弱的。可见光线只有微弱的杀菌作用。在培养基中加入某种染料杀菌作用。在培养基中加入某种染料杀菌作用。在培养基中加入某种染料杀菌作用。在培养基中加入某种染料(美蓝、美蓝、美蓝、美蓝、伊红、沙黄等伊红、沙黄等伊红、沙黄等伊红、沙黄等)能增强可见光的杀菌作用能增强可见光的杀菌作用能增强可见光的杀菌作用能增强可见光的杀菌作用,称这称这称这称这种现象为种现象为种现象为种现象为光感作用光感作用光感作用光感作用。2.2.2.2.阳阳阳阳光光光光:直直直直射射射射日日日日光光

23、光光有有有有强强强强烈烈烈烈杀杀杀杀菌菌菌菌作作作作用用用用,紫紫紫紫外外外外线线线线是是是是日日日日光光光光杀杀杀杀菌菌菌菌作作作作用用用用的的的的主主主主要要要要因因因因素素素素。许许许许多多多多微微微微生生生生物物物物在在在在直直直直射射射射日日日日光光光光下下下下,半半半半小小小小时时时时到到到到数数数数小小小小时时时时即即即即可可可可死死死死亡亡亡亡。芽芽芽芽孢孢孢孢的的的的抵抵抵抵抗抗抗抗力强力强力强力强,经经经经20h20h20h20h才死亡。才死亡。才死亡。才死亡。3.3.3.3.紫外线紫外线紫外线紫外线:紫外线中波长紫外线中波长紫外线中波长紫外线中波长200-300nm200

24、-300nm200-300nm200-300nm部分具有杀部分具有杀部分具有杀部分具有杀菌作用菌作用菌作用菌作用,其中以其中以其中以其中以265-266nm265-266nm265-266nm265-266nm段的杀菌力最强。常段的杀菌力最强。常段的杀菌力最强。常段的杀菌力最强。常用的紫外线杀菌灯波长为用的紫外线杀菌灯波长为用的紫外线杀菌灯波长为用的紫外线杀菌灯波长为253.7nm253.7nm253.7nm253.7nm。原原原原理理理理:作作作作用用用用于于于于DNA,DNA,DNA,DNA,使使使使DNADNADNADNA分分分分子子子子结结结结构构构构破破破破坏坏坏坏,形形形形成成成成

25、胸胸胸胸腺腺腺腺嘧嘧嘧嘧啶啶啶啶二二二二聚聚聚聚体体体体。此此此此外外外外,可可可可使使使使空空空空气气气气中中中中分分分分子子子子氧氧氧氧变变变变为为为为臭臭臭臭氧氧氧氧,臭氧放出氧化能力强的原子氧臭氧放出氧化能力强的原子氧臭氧放出氧化能力强的原子氧臭氧放出氧化能力强的原子氧,呈现杀菌作用。呈现杀菌作用。呈现杀菌作用。呈现杀菌作用。缺点缺点缺点缺点:穿透力不强穿透力不强穿透力不强穿透力不强,只用物体表面消毒。只用物体表面消毒。只用物体表面消毒。只用物体表面消毒。用途用途用途用途:微生物实验室、无菌室、手术室、传染病微生物实验室、无菌室、手术室、传染病微生物实验室、无菌室、手术室、传染病微生物

26、实验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒。效果与照射时间、房、种蛋室等的空气消毒。效果与照射时间、房、种蛋室等的空气消毒。效果与照射时间、房、种蛋室等的空气消毒。效果与照射时间、距离和强度有关。距离和强度有关。距离和强度有关。距离和强度有关。4.4.4.4.电离辐射电离辐射电离辐射电离辐射:放射性同位素射线放射性同位素射线放射性同位素射线放射性同位素射线(、)和和和和X X X X射线等可使被照射物质发生电离。用于消毒、射线等可使被照射物质发生电离。用于消毒、射线等可使被照射物质发生电离。用于消毒、射线等可使被照射物质发生电离。用于消毒、食品保藏和育种等方面。食品保藏和育种等方面。

27、食品保藏和育种等方面。食品保藏和育种等方面。X X X X射射射射线线线线(波波波波长长长长0.06-13.6nm):0.06-13.6nm):0.06-13.6nm):0.06-13.6nm):一一一一种种种种高高高高能能能能电电电电磁磁磁磁波波波波,距距距距离离离离10-2010-2010-2010-20厘厘厘厘米米米米照照照照射射射射20-3020-3020-3020-30分分分分钟钟钟钟,可可可可杀杀杀杀死死死死琼琼琼琼脂脂脂脂培培培培养养养养基基基基上上上上的的的的大大大大肠肠肠肠杆杆杆杆菌菌菌菌、炭炭炭炭疽疽疽疽杆杆杆杆菌菌菌菌、葡葡葡葡萄萄萄萄球球球球菌菌菌菌等等等等。对对对对液

28、液液液体培养基中的细菌杀伤力不强。体培养基中的细菌杀伤力不强。体培养基中的细菌杀伤力不强。体培养基中的细菌杀伤力不强。射射射射线线线线(波波波波长长长长0.00l-0.4nm):0.00l-0.4nm):0.00l-0.4nm):0.00l-0.4nm):有有有有极极极极强强强强的的的的穿穿穿穿透透透透消消消消毒毒毒毒能能能能力力力力,灭灭灭灭菌菌菌菌培培培培养养养养基基基基不不不不破破破破坏坏坏坏营营营营养养养养成成成成分分分分。用用用用于于于于不不不不耐耐耐耐热热热热塑料注射器、输液导管等的消毒。塑料注射器、输液导管等的消毒。塑料注射器、输液导管等的消毒。塑料注射器、输液导管等的消毒。四、

29、超四、超 声声 波波l频率在频率在2 2万万-20-20万万hzhz的声波称为超声波。超声的声波称为超声波。超声波可导致细胞破裂波可导致细胞破裂,内含物外逸内含物外逸,具有一定的杀具有一定的杀菌作用。细菌及大型噬菌体和病毒菌作用。细菌及大型噬菌体和病毒,十几分钟十几分钟即可杀灭。小型病毒有抵抗力。即可杀灭。小型病毒有抵抗力。l其效果与频率、处理时间、微生物种类、大其效果与频率、处理时间、微生物种类、大小形状、数量等均有关系。小形状、数量等均有关系。l主要用于裂解细胞主要用于裂解细胞,提取细胞组分等。提取细胞组分等。五、微五、微 波波l从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称从几百兆赫至几十万兆赫

30、频率的无线电波称为微波。微波灭菌为微波。微波灭菌,主要是利用微波的加热作用主要是利用微波的加热作用完成完成(交变电场交变电场,分子旋转振动、分子相互作用分子旋转振动、分子相互作用产生摩擦力产生摩擦力,分子克服摩擦力产生热量分子克服摩擦力产生热量,使物品使物品升温升温,起加热灭菌作用起加热灭菌作用)。l用途用途:这种灭菌法这种灭菌法,需时短、加热均匀需时短、加热均匀,应用范应用范围很广。可用于非金属医药用品等的灭菌围很广。可用于非金属医药用品等的灭菌,还可还可用于加快免疫化学反应如用于加快免疫化学反应如ELISAELISA。六、滤过六、滤过l通过机械阻留作用将液体或空气中细菌等微通过机械阻留作用

31、将液体或空气中细菌等微生物除去的方法。用于空气和不耐高温的材料生物除去的方法。用于空气和不耐高温的材料的除菌。但滤过除菌不能除去病毒、霉形体以的除菌。但滤过除菌不能除去病毒、霉形体以及细菌及细菌L L型小颗粒。型小颗粒。l实验室中常用的滤器实验室中常用的滤器:滤膜滤器、蔡氏滤器、滤膜滤器、蔡氏滤器、玻璃滤器、磁土滤器等。玻璃滤器、磁土滤器等。l过滤介质过滤介质:醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚丙烯膜丙烯膜;以及石棉板、烧结陶瓷、烧结玻璃等。以及石棉板、烧结陶瓷、烧结玻璃等。滤器孔径滤器孔径:常用常用0.22 m 0.22 m、0.45 m 0.45 m。玻璃砂芯滤器

32、及针头式滤器化学因素对微生物的影响化学因素对微生物的影响l许多化学物质在低浓度时能够促进细菌许多化学物质在低浓度时能够促进细菌的生长繁殖的生长繁殖,高浓度时则能抑制其生长、高浓度时则能抑制其生长、发育发育,甚至将其杀死甚至将其杀死,呈现毒害作用。呈现毒害作用。l影响细菌的化学因素包括化学消毒剂和影响细菌的化学因素包括化学消毒剂和化学治疗剂。化学治疗剂。一、消毒剂一、消毒剂（一）消毒剂的概念（一）消毒剂的概念l消毒剂消毒剂:用于杀灭体表、器械、排泄物、环境用于杀灭体表、器械、排泄物、环境中病原微生物的化学药物。中病原微生物的化学药物。防腐剂防腐剂:用于抑制用于抑制微生物生长繁殖的化学药物微生物生

33、长繁殖的化学药物l消毒剂在低浓度时只能抑菌消毒剂在低浓度时只能抑菌,而防腐剂在高浓而防腐剂在高浓度时也能杀菌度时也能杀菌,它们之间并没有严格的界限它们之间并没有严格的界限,统统称为消毒剂。称为消毒剂。l理想的消毒剂理想的消毒剂:高效、安全、价廉、易于保存、高效、安全、价廉、易于保存、来源方便等。来源方便等。（二）消毒剂的作用机理（二）消毒剂的作用机理1.1.使菌体蛋白质变性或凝固使菌体蛋白质变性或凝固:如重金属盐类药物如重金属盐类药物易与带阴电荷的细菌蛋白质结合易与带阴电荷的细菌蛋白质结合,使之变性和发使之变性和发生凝固生凝固;醇类、醛类使菌体蛋白质变性。醇类、醛类使菌体蛋白质变性。2.2.抑

34、制或干扰酶的活性抑制或干扰酶的活性,影响细菌的代谢作用影响细菌的代谢作用:氧化剂及重金属盐类可与菌体酶蛋白的氧化剂及重金属盐类可与菌体酶蛋白的-SH-SH基作基作用用,氧化成为二硫键氧化成为二硫键,使酶失去活性。使酶失去活性。3.3.改变细胞壁或破坏细胞膜使通透性改变细胞壁或破坏细胞膜使通透性:酚类化合酚类化合物和表面活性剂能降低菌体表面张力物和表面活性剂能降低菌体表面张力,改变细胞改变细胞膜的通透性。膜的通透性。（三）常用消毒剂的种类（三）常用消毒剂的种类1.1.酸类酸类:硼酸、乳酸、醋酸等硼酸、乳酸、醋酸等2.2.碱类碱类:氢氧化钠、生石灰等氢氧化钠、生石灰等3.3.醛类醛类:甲醛、戊二醛

35、等甲醛、戊二醛等4.4.醇类醇类:乙醇等乙醇等5.5.酚类酚类:来苏尔、石炭酸等来苏尔、石炭酸等6.6.氧化剂类氧化剂类:过氧乙酸、双氧水、高锰酸钾等过氧乙酸、双氧水、高锰酸钾等7.7.卤素类卤素类:漂白粉、氯胺、碘等漂白粉、氯胺、碘等8.8.重金属盐类重金属盐类:甲紫、雷佛诺尔、红汞等甲紫、雷佛诺尔、红汞等9.9.表面活性剂类表面活性剂类:新洁尔灭、杜米芬等新洁尔灭、杜米芬等10.10.挥发性烷化剂类挥发性烷化剂类:环氧乙烷环氧乙烷（四）影响消毒剂作用的因素（四）影响消毒剂作用的因素1.1.消毒剂的种类消毒剂的种类:不同消毒剂作用范围不同不同消毒剂作用范围不同,两两种合用时种合用时,有的能相

36、互颉抗。有的能相互颉抗。2.2.消毒剂的浓度和作用时间：消毒剂的浓度和作用时间：3.3.微生物的种类与数量微生物的种类与数量:4.4.温度和湿度温度和湿度:大多数消毒剂温度升高可增强杀大多数消毒剂温度升高可增强杀菌效果。菌效果。5.5.酸碱度酸碱度:在酸性溶液中在酸性溶液中,细菌带阳电荷细菌带阳电荷,阴性离阴性离子杀菌力强。碱性溶液中子杀菌力强。碱性溶液中,细菌带阴电荷细菌带阴电荷,阳性阳性离子杀菌效果最佳。离子杀菌效果最佳。6.6.环境中有机物质的干扰环境中有机物质的干扰:环境中有机物环境中有机物,可降可降低消毒剂效果。低消毒剂效果。二、化学治疗剂二、化学治疗剂l指直接用于干扰致病性微生物或

37、其他寄生虫指直接用于干扰致病性微生物或其他寄生虫的生长、繁殖的生长、繁殖,并能治疗传染性疾病的化学药并能治疗传染性疾病的化学药物。磺胺类药物是最常用的化学治疗剂。物。磺胺类药物是最常用的化学治疗剂。l化学治疗剂对宿主和病原具有选择性化学治疗剂对宿主和病原具有选择性,它们能它们能阻碍微生物代谢某些环节阻碍微生物代谢某些环节,使其生命活动受到使其生命活动受到抑制或使其死亡抑制或使其死亡,而对宿主细胞毒副作用甚小而对宿主细胞毒副作用甚小一、噬菌体一、噬菌体l噬菌体是一类侵害细菌噬菌体是一类侵害细菌(包括放线菌、真菌和包括放线菌、真菌和原核生物原核生物)的病毒的病毒,又称细菌病毒。又称细菌病毒。l四种

38、外形四种外形:蝌蚪形、微球形、细杆形和柠檬形蝌蚪形、微球形、细杆形和柠檬形l噬菌体具有抗原性噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生特异性抗能刺激机体产生特异性抗体并能抑制相应噬菌体感染细菌。抵抗力较强体并能抑制相应噬菌体感染细菌。抵抗力较强,但对一般消毒剂敏感。但对一般消毒剂敏感。l与动物病毒增殖相似与动物病毒增殖相似,分为吸附、侵入、生物分为吸附、侵入、生物合成、成熟和释放四个阶段。合成、成熟和释放四个阶段。l噬菌体可使混浊的细菌液体培养物变为清朗噬菌体可使混浊的细菌液体培养物变为清朗,在固体培养基上可使细菌裂解而呈现无细菌生在固体培养基上可使细菌裂解而呈现无细菌生长的区域长的区域,称为称为噬菌现

39、象噬菌现象。由于噬菌体裂解宿。由于噬菌体裂解宿主细胞致使菌苔上形成的一个个透亮不长菌的主细胞致使菌苔上形成的一个个透亮不长菌的圆斑圆斑,称为称为噬菌斑噬菌斑,亦称亦称空斑空斑。噬菌斑可用于细。噬菌斑可用于细菌或噬菌体的鉴定和纯种分离。菌或噬菌体的鉴定和纯种分离。噬斑噬斑荧光荧光假单假单胞菌胞菌l根据其与细菌的关系分为烈性噬菌体和温和噬根据其与细菌的关系分为烈性噬菌体和温和噬菌体两类。凡能使寄主细胞裂解引起溶菌反应菌体两类。凡能使寄主细胞裂解引起溶菌反应的噬菌体的噬菌体,称为称为烈性噬菌体烈性噬菌体或毒性噬菌体。侵入或毒性噬菌体。侵入寄主细胞后寄主细胞后,将其将其DNADNA整合于宿主细胞的整合

40、于宿主细胞的DNADNA中中,并随细菌的分裂而传给后代并随细菌的分裂而传给后代,不形成病毒粒子不形成病毒粒子,不裂解细菌的现象叫不裂解细菌的现象叫溶原化溶原化。引起溶原化的噬。引起溶原化的噬菌体叫菌体叫温和噬菌体温和噬菌体或溶原性噬菌体。或溶原性噬菌体。l含有温和噬菌体的细菌称为含有温和噬菌体的细菌称为溶源性细菌溶源性细菌。溶原。溶原性细菌可自发地终止其溶原性性细菌可自发地终止其溶原性,引起溶菌反应而引起溶菌反应而释出噬菌体。释出噬菌体。噬菌体的应用噬菌体的应用l细菌的鉴定和分型细菌的鉴定和分型:噬菌体的噬菌作用具有专噬菌体的噬菌作用具有专业性业性,利用这一性质作细菌的鉴定。利用这一性质作细菌

41、的鉴定。l检测未知病原菌检测未知病原菌:应用噬菌体效价增长试验可应用噬菌体效价增长试验可检测标本中的相应细菌。若其效价明显升高检测标本中的相应细菌。若其效价明显升高,则表明标本中有某种细菌存在。则表明标本中有某种细菌存在。l分子生物学研究领域的重要试验工具和最理想分子生物学研究领域的重要试验工具和最理想材料材料:如大肠杆菌噬菌体的研究如大肠杆菌噬菌体的研究,搞清了遗传领搞清了遗传领域的许多基本问题。域的许多基本问题。l用于治疗和预防传染性疾病用于治疗和预防传染性疾病:噬菌体具有强大噬菌体具有强大的溶菌作用。的溶菌作用。l测定辐射剂量测定辐射剂量:某些噬菌体如大肠杆菌噬菌体某些噬菌体如大肠杆菌噬

42、菌体T2,T2,对辐射剂量的反应不但极为敏感而且精确。对辐射剂量的反应不但极为敏感而且精确。二、抗生素二、抗生素l抗生素抗生素:某些微生物在生命活动过程中产生的某些微生物在生命活动过程中产生的一类抑制或杀死另一些微生物的特殊物质。一类抑制或杀死另一些微生物的特殊物质。l如链霉素如链霉素(放线菌放线菌)、青霉素、青霉素(霉菌霉菌)和多粘菌素和多粘菌素(细菌细菌)。己发现。己发现25002500多种多种,而最常用的只有几十而最常用的只有几十种。抗生素的抗菌作用主要是干扰细菌的代谢种。抗生素的抗菌作用主要是干扰细菌的代谢过程过程,抑制或杀灭微生物。抑制或杀灭微生物。l抗生素的作用范围称为抗生素的作用

43、范围称为抗菌谱抗菌谱,根据作用范围根据作用范围,分广谱和窄谱抗生素。分广谱和窄谱抗生素。细菌药敏试验结果同一细菌对不同同一细菌对不同抗生素的敏感性抗生素的敏感性不同细菌对相同不同细菌对相同抗生素的敏感性抗生素的敏感性三、细菌素三、细菌素l细菌素细菌素:是由细菌代谢过程中产生的一种具有是由细菌代谢过程中产生的一种具有杀菌作用的蛋白质杀菌作用的蛋白质,具有一定的特异性具有一定的特异性,只能作只能作用于与它同种不同株的细菌以及与它亲缘关系用于与它同种不同株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌相近的细菌。如大肠菌素。如大肠菌素,可作用于大肠杆菌及可作用于大肠杆菌及近缘的志贺菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌和巴氏近

44、缘的志贺菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌和巴氏杆菌等。杆菌等。l植物杀菌素植物杀菌素:某些植物中存在的杀菌物质某些植物中存在的杀菌物质,如黄如黄连、大蒜、金银花、板蓝根等。连、大蒜、金银花、板蓝根等。一、形态结构变异一、形态结构变异（一）形态变异（一）形态变异l自然形成或诱导产生的细菌自然形成或诱导产生的细菌L L型型,及老龄培养及老龄培养物中出现的衰老型物中出现的衰老型,都是细菌形态变异的表现。都是细菌形态变异的表现。L L型细菌型细菌:细胞壁缺陷的细菌。细胞壁缺陷的细菌。原生质体原生质体:失去细胞壁的细菌失去细胞壁的细菌(G(G+)。原球体原球体:细胞壁仅部分缺损者细胞壁仅部分缺损者(G(G-)。

45、l病原菌在特定的动物组织器官中病原菌在特定的动物组织器官中,有时也会发有时也会发生形态的改变。如猪的咽喉部的炭疽杆菌生形态的改变。如猪的咽喉部的炭疽杆菌,慢性慢性猪丹毒心脏病变的猪丹毒杆菌。猪丹毒心脏病变的猪丹毒杆菌。（二）荚膜变异（二）荚膜变异有荚膜的细菌有荚膜的细菌,在特点的条件下可丧失其形成在特点的条件下可丧失其形成荚膜的能力。荚膜与毒力有关荚膜的能力。荚膜与毒力有关,荚膜丧失荚膜丧失,必然必然导致毒力的改变。导致毒力的改变。（三）芽孢变异（三）芽孢变异能形成芽孢的细菌在一定条件下可丧失形成芽能形成芽孢的细菌在一定条件下可丧失形成芽孢的能力。如高温孢的能力。如高温(43)(43)培养炭疽

46、杆菌。培养炭疽杆菌。（四）鞭毛变异（四）鞭毛变异有鞭毛的细菌也容易发生失去鞭毛的遗传性变有鞭毛的细菌也容易发生失去鞭毛的遗传性变异或非遗传性变异。这种失去鞭毛的变异称为异或非遗传性变异。这种失去鞭毛的变异称为HOHO变异。变异。二、培养特性变异二、培养特性变异（一）光滑型（一）光滑型-粗糙型粗糙型(S-R)(S-R)变异变异细菌的菌落大致可分为光滑型细菌的菌落大致可分为光滑型(S)(S)和粗糙型和粗糙型(R)(R)两种类型。正常的光滑型菌株在一定条件下可两种类型。正常的光滑型菌株在一定条件下可变为粗糙型变为粗糙型,称为称为SRSR变异。变异。也有极少数细菌也有极少数细菌,其新分离的菌落正常为其

47、新分离的菌落正常为R R型型,在一定条件下则变为在一定条件下则变为S S型型,成为成为RSRS变异。粗糙变异。粗糙型比较稳定正常情况下较少变异。型比较稳定正常情况下较少变异。（二）（二）D D菌落变异菌落变异当细菌接触某些化学物质如硫酸铜、氧化锂时当细菌接触某些化学物质如硫酸铜、氧化锂时,可形成细小菌落可形成细小菌落,称为称为D D菌落菌落(侏儒菌落侏儒菌落)。三、毒力变异三、毒力变异（一）毒力增强（一）毒力增强连续通过易感动物连续通过易感动物,可使病原菌毒力增强。有的可使病原菌毒力增强。有的细菌与其他微生物共生细菌与其他微生物共生,或被温和噬菌体感染或被温和噬菌体感染,也可增强毒力。如魏氏梭

48、菌与八跌球菌共生时也可增强毒力。如魏氏梭菌与八跌球菌共生时毒力增强。毒力增强。（二）毒力减弱（二）毒力减弱1.1.通过非易感动物通过非易感动物2.2.通过细胞培养通过细胞培养3.3.通过杂交通过杂交4.4.通过高温通过高温5.5.通过化学药物通过化学药物四、生化特性变异四、生化特性变异l变异现象很多变异现象很多,较为常见而研究较深的有较为常见而研究较深的有:营营养缺陷型变异、诱导酶变异、终末产物阻遏。养缺陷型变异、诱导酶变异、终末产物阻遏。五、耐药性变异五、耐药性变异l原来对某种药物敏感的细菌原来对某种药物敏感的细菌,可发生变异而形可发生变异而形成能耐受该药物的成能耐受该药物的耐药性耐药性,有时甚至形成必须有有时甚至形成必须有该药物方能生长的该药物方能生长的依药性依药性。l耐药性的产生耐药性的产生,已被公认的有两种：已被公认的有两种：1.1.与耐药性遗传信息的传递有关与耐药性遗传信息的传递有关:在质粒或染色体在质粒或染色体上存在有控制耐药性遗传信息的基因上存在有控制耐药性遗传信息的基因;2.2.通过细菌的自发突变产生耐药性。通过细菌的自发突变产生耐药性。结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！59