最新微生物检验14PPT课件.ppt

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1、微生物检验微生物检验14 棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌，菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大，故名，归属放线菌科。棒状杆菌属概述所致疾病：白喉所致疾病：白喉-急性呼吸道传染病n n传染源：患者及带菌者传染源：患者及带菌者n n传播途径：飞沫或污染传播途径：飞沫或污染n n临床表现临床表现n n细菌细菌-上呼吸道粘膜，上呼吸道粘膜，生长繁殖，产生毒素生长繁殖，产生毒素 细菌与毒素共同作用细菌与毒素共同作用引起引起局部炎症局部炎症：n n炎性渗出，坏死，纤维蛋白炎性渗出，坏死，纤维蛋白 假膜假膜窒息窒息n n毒素毒素血液血液全身中毒症状全身中毒症状n n外周外周N-NN-N炎：膈肌麻痹炎：

2、膈肌麻痹-呼吸困难呼吸困难 声带麻痹声带麻痹-声音嘶哑声音嘶哑 软颌麻痹软颌麻痹-吞咽困难吞咽困难n n心肌心肌-心肌炎心肌炎 白喉假膜白喉假膜n n抗毒素免疫n n感染后机体可获得牢固的免疫力n n机体还可通过其它方式获得免疫力：机体还可通过其它方式获得免疫力：n n六月以下婴儿六月以下婴儿-母亲母亲n n成人成人-隐性感染、人工主动免疫隐性感染、人工主动免疫n n易感者：易感者：n n1515岁儿童岁儿童n n成人成人-也有可能也有可能免疫性：锡克试验（锡克试验（Schick test）（白喉外毒素皮内试验）（白喉外毒素皮内试验）n n调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力n n根

3、据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素n n缺点观察时间长、操作繁琐，不易进行广泛测试n n致敏红细胞凝集试验n n测定血清中抗毒素水平n n0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞37、1hn n敏感度可达10-4单位，简便快速防治原则：-人工主动免疫白喉类毒素DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素-人工被动免疫白喉抗毒素+白喉类毒素-治疗：抗毒素+抗生素早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞结合以前被抗毒素中和二、生物学特性n n形态与染色:G+细长微弯的杆菌 一端或两端膨大呈棒状 常排列呈V、L、X等文字形 异染颗粒形态上的鉴别特征 无荚膜、无

4、芽胞、无鞭毛白喉棒状杆菌异染颗粒白喉棒状杆菌异染颗粒1000培养特性：培养特性：n n需氧或兼性厌氧，最适温度需氧或兼性厌氧，最适温度35353737n n营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生营养要求高，在含血液、血清、鸡蛋的培养基上生 长良好长良好 吕氏（吕氏（Loeffler)Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面：血清斜面或鸡蛋斜面：生长最快，生长最快，6h6h即生长，即生长，101012h12h长出灰白色、长出灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落，菌体形菌落，菌体形 态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形态典型、异染颗粒明显，连续传代可保持形 态和产毒性

5、能不变态和产毒性能不变 BAP中菌落中菌落BAP：菌落灰白色、光滑型、直径12mm、有狭窄 溶血环（轻型）多次传代后菌体变为球 型亚碲酸钾BAP：选择鉴别培养基黑色菌落鉴别依据不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色 菌落根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为：重型、中间型、轻型白喉棒状杆菌在亚碲酸钾BAP中菌落液体培养基：生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同生化反应：生化反应：n n分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、果糖产酸不产气，不分解乳糖、甘露糖，一般不分解蔗糖，吲哚（-）、硝酸盐还原（+）、触酶（+）、氧化酶（-）、明胶液化（-）尿素（-）n n重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解蔗糖抵抗力

6、：抵抗力：n n对干燥、寒冷和日光抵抗力较其他无芽胞细菌强，在干燥的假膜中可生存3个月n n对湿热和消毒剂敏感，5%石炭酸、1：1000升汞1min，1001min、6010min均可灭菌n n对青霉素、红霉素等敏感，对磺胺不敏感三、微生物学检验n n分离出白喉杆菌，并证明其毒力n n 标本采集：分泌物 取双份如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水或15%甘油生理盐水保存毒力试验患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等直接涂片染色镜检（单染或G 染色+异染颗粒染色）吕氏血清斜面351218h亚碲酸钾BAP、352448hBAP3516-18h涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色）观察菌落特点吕氏血清斜面生化反

7、应涂片染色镜检检验程检验程序序n n直接涂片染色镜检：-23张涂片G染色、异染颗粒染色 镜检初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”早期诊断-用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，3710h，涂片染色镜检提高阳性率分离培养：分离培养：n n吕氏血清斜面：37、812h 涂片染色镜检-检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断n n亚碲酸钾BAP：37、2448h，黑色菌落n nBAP：轻型有轻型有 溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别鉴定：鉴定：n n形态染色、菌落特点、生化反应n n糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖（+）、麦芽糖（+）蔗糖（-）

8、毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据）n n体外法：琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定）SPA协同凝集试验对流电泳琼脂平板毒力试验-Elek平板对流免疫电泳体内法：用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验第二节第二节类白喉棒状杆菌类白喉棒状杆菌（二）结膜干燥棒状杆菌（二）结膜干燥棒状杆菌（C.xerosis）（三）化脓棒状杆菌（三）化脓棒状杆菌（C.pyogenes）（四）溃疡棒状杆菌（四）溃疡棒状杆菌(C.ulcerans)（五）假结核棒状杆菌（五）假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis）（六）溶血棒状杆菌（六）溶血棒状杆菌（C.haemolyticum）（七）杰克群棒状杆菌（七）杰克群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK）（一）假白喉棒状杆菌（一）假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum）共同特点：-大多不产生外毒素-菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒-大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、外阴、泌尿道和皮肤等处-条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等-鉴别生化反应 结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！32