四章节微生物反应器操作.ppt
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1、四章节微生物反应器操作 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望主要内容主要内容 1 1、微生物反应器操作基础、微生物反应器操作基础 2 2、分批操作、分批操作 3 3、流加操作、流加操作 4 4、连续操作、连续操作4.1 4.1 微生物反应器操作基础微生物反应器操作基础n微生物培养过程根据是否要求供氧,分为微生物培养过程根据是否要求供氧,分为厌氧和好氧培养厌氧和好氧培养 。好氧培养可采用以下几种方法:好氧培养可采用以下几种方法:(1 1)液体表面培养(如使
2、用浅盘);)液体表面培养(如使用浅盘);(2 2)通风固态发酵;)通风固态发酵;(3 3)通氧深层培养。)通氧深层培养。深层培养深层培养培养方式分类:培养方式分类:n分批式操作分批式操作(batch operation)n半分批式操作半分批式操作(semi-batch operation)n反复分批式操作反复分批式操作(repeated batch operation)n反反复复半半分分批批式式操操作作(repeated semi-batch operation)n连续式操作连续式操作(continuous operation)4.2 4.2 分批式操作分批式操作 n是指基质一次性加入反应器内
3、,在适宜是指基质一次性加入反应器内,在适宜条件下将微生物菌种接入,反应完成后条件下将微生物菌种接入,反应完成后将全部反应物料取出的操作方式。将全部反应物料取出的操作方式。培培养养过过程程中中基基质质体体积积变变化化n半分批式操作半分批式操作 又称流加操作,是指先将一定量基质又称流加操作,是指先将一定量基质加入反应器内,在适宜条件下将微生物菌加入反应器内,在适宜条件下将微生物菌种接入反应器中,反应开始,反应过程中种接入反应器中,反应开始,反应过程中将特定的限制性基质按照一定要求加入到将特定的限制性基质按照一定要求加入到反应器内,以控制限制性基质保持一定,反应器内,以控制限制性基质保持一定,当反应
4、终止时取出反应物料的操作方式当反应终止时取出反应物料的操作方式 。n酵酵母母、淀淀粉粉酶酶、某某些些氨氨基基酸酸和和抗抗生生素素等等采采用这种方式进行生产。用这种方式进行生产。反复分批式操作是指分批操作完成后,反复分批式操作是指分批操作完成后,不全部取出反应物料,剩余部分重新加入一不全部取出反应物料,剩余部分重新加入一定量的基质,再按照分批式操作方式,反复定量的基质,再按照分批式操作方式,反复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图4-1c4-1c所示所示 。反复半分批式操作是指流加操作完成后,反复半分批式操作是指流加操作完成后,不全部取出反应物料,剩余部分
5、重新加入一不全部取出反应物料,剩余部分重新加入一定量的基质,再按照流加操作方式进行,反定量的基质,再按照流加操作方式进行,反复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如复进行。其培养过程中基质体积变化曲线如图图4-1d4-1d所示。所示。连连续续式式操操作作是是指指在在分分批批式式操操作作进进行行到到一一定定阶阶段段,一一方方面面将将基基质质连连续续不不断断地地加加入入反反应应器器内内,另另一一方方面面又又把把反反应应物物料料连连续续不不断断的的取取出出,使使反反应应条条件件(如如反反应应液液体体积积等等)不不随随时时间间变变化化的的操操作作方方式式。活活性性污污泥泥法法处处理理废废水水、固固定定化
6、化微微生生物物反反应应等等多多采采用用连连续续式式操操作作。连连续续培培养养过过程程中中基基质体积变化曲线如图质体积变化曲线如图4-1e 4-1e 所示。所示。优点不足应用的场合分分批式操作设备制作费用低;同一设备可进行多种产品生产;高收率(若能对培养过程了解的深入);发生杂菌污染或菌种变异的几率低。反应器的非生产周期较长;由于频繁杀菌,易使检测装置损伤;由于每次培养均要接种,增加了生产成本;需要非稳定过程控制费用;人员操作加大了污染的危险。进行少量产品生产;使用同一种反应器,进行多种产物生产;易发生杂菌污染或菌种变异从培养液中提取产物采取分批式操作。流流加式操作高通融性;可任意控制反应器中的
7、基质浓度;可确保微生物所需的环境;如果能够了解菌体在分批过程中的性质,可获得产物高收率。有反应器的非生产周期;需要较高的劳动力(需要控制和高价的检测装置);人员的操作加大了污染的危险;由于频繁杀菌,易使检测装置损伤。不能进行连续式操作;分批操作生产效率低;希望延长反应时间;出现基质抑制;使用营养要求变异株一定培养基成分的浓度是菌体收率或代谢产物生产速度的影响因素;需要高菌体浓度。连连续式操作易机械化、自动化;节约劳动力;反应器体积小(由于无非生产准备时间);可确保产品品质稳定;由于机械化操作,减少了操作人员的操作带来的污染;几乎没有因杀菌,使检测装置损伤的可能。通融性低(同一装置不能生产多种产
8、品);需要原料的品质均一;设备投资高(控制、自动化等操作具有一定难度);长时间培养,增加了杂菌污染或菌种变异的几率;反应器内保持醪液的恒定,有一定困难(由于产生气泡、丝状菌堵塞管路等)。需生产速率高的场合(对于同一品质,大量生产的产品);基质是气体、液体和可溶性固体;不易发生杂菌污染或菌种变异。分分批批式式操操作作特特点点4.2.1 4.2.1 生长曲线生长曲线 分分批批培培养养中中微微生生物物的的生生长长曲曲线线如如图图4-24-2。随随培培养养的的进进行行,基基质质浓浓度度下下降降,菌菌体体量量增增加加,产产物物量量相相应应增增加加。分分批批式式培培养养过过程程中中,微微生生物物的的生长可
9、分为:生长可分为:1 1、迟缓期、迟缓期(lag phase);2 2、对数生长期、对数生长期(lagarithmic growth phase););3 3、减速期、减速期(fransient phase);4 4、静止期、静止期(stationary phase);5 5、衰退期、衰退期(decline phase)5 5个阶段。个阶段。分批式培养中微生物的生长曲线分批式培养中微生物的生长曲线4.2.2 4.2.2 状态方程式状态方程式 分分批批式式培培养养过过程程的的状状态态方方程程式式(环环境境过过程程的的状态方程式)可表示为:状态方程式)可表示为:基质:基质:dS/dt=-yXdS/
10、dt=-yX菌体:菌体:dX/dt=dX/dt=XX产物:产物:dP/dt=XdP/dt=X氧:氧:COCO2 2:当当t=0t=0时时上式中,上式中,F F为惰性气体流速,为惰性气体流速,V V为反应液总容积,为反应液总容积,Pall Pall为气体总压力,为气体总压力,(Po2)out (Po2)out为排气中氧的分压,为排气中氧的分压,(Po2)in (Po2)in为进气体中氧的分压,为进气体中氧的分压,(Pco2)in (Pco2)in为进气体中为进气体中C02C02的分压,的分压,(Pco2)out (Pco2)out为排气中为排气中CO2CO2的分压。的分压。一一般般微微生生物物的
11、的最最适适温温度度、最最适适pHpH的的范范围围较较窄窄。例例 如如,CalamCalam等等 人人 研研 究究 了了 温温 度度 对对 产产 黄黄 青青 霉霉(Penicillum Penicillum chrysogenumchrysogenum)生生长长速速率率和和青青霉霉素素生生成成速速率率的的影影响响,发发现现最最适适生生长长温温度度为为3030,进进行行呼呼吸吸的的最最适适温温度度为为21.721.728.628.6,产产物物青青霉霉素素的的最最适适生生成成温温度度为为24.724.7。生生产产中中一一般般采采用用定定值值控控制制。在在这这样样的的条条件件下下,可可以以认认为为分分
12、批批培培养养过过程程中中的的动动态态特特性性取取决决于于基基质质与与微微生生物物浓浓度度(接接种种量量)及及微微生生物物反反应应的的诸诸比比速速率率的的初初始始值值,因因此此,支支配配分分批批式式培培养养统统的的主主要要因因素素是是基基质质与与微微生生物物的的浓浓度度的初始值。的初始值。分批式微生物反应过程分析中,需观察分批式微生物反应过程分析中,需观察X X,S S和和P P等随时间的变化情况。由于不可能研究所有反应液等随时间的变化情况。由于不可能研究所有反应液成分随时间的变化,因此应选择与产物成分随时间的变化,因此应选择与产物P P关系最为密关系最为密切的底物切的底物S S作为观察的对象。
13、必要时,可观察两种基作为观察的对象。必要时,可观察两种基质浓度的变化。好氧反应中,溶解氧浓度(质浓度的变化。好氧反应中,溶解氧浓度(DODO)随)随时间的变化也是很重要的参数。时间的变化也是很重要的参数。4.2.3 4.2.3 反复分批操作反复分批操作 反反复复分分批批操操作作系系统统(图图4-34-3)中中培培养养液液体体积积为为V V,培培养养液液取取出出率率为为,滤滤液液取取出出率率为为,由由于于V V一一定定,所所以以培培养养液液加加入入量量为为。为为确确保保菌菌体体初初始始浓浓度度一一定定,有有必必要要将将流流出出液液中中部部分分含含菌菌体体的的培培养养液液取取出出,此此时时菌菌体体
14、量量的的衡衡算算式式为:为:反复分批操作示意图反复分批操作示意图由上式可知由上式可知 产物浓度的衡算为产物浓度的衡算为由上式,滤液取出率为由上式,滤液取出率为产物的生产能力产物的生产能力 由由上上式式可可知知,为为提提高高产产物物生生产产能能力力,可可采采取取提提高或减少高或减少t tRBRB。4.3 4.3 流加操作流加操作 流加操作的优点是能够任意控制反应液中流加操作的优点是能够任意控制反应液中基质浓度。基质浓度。流加操作的要点是控制基质浓度,因此,流加操作的要点是控制基质浓度,因此,其核心问题是流加什么和怎么流加。在工程上其核心问题是流加什么和怎么流加。在工程上特别要注意后者。从流加方式
15、看,流加操作可特别要注意后者。从流加方式看,流加操作可分为无反馈控制流加操作与反馈控制流加操作。分为无反馈控制流加操作与反馈控制流加操作。前者包括定流量流加、指数流加和反馈控制流前者包括定流量流加、指数流加和反馈控制流加操作等。后者分间接控制、直接控制、定值加操作等。后者分间接控制、直接控制、定值控制和程序控制等流加操作。控制和程序控制等流加操作。流加培养操作流加培养操作 流流加加操操作作时时,特特定定基基质质加加入入到到反反应应器器后后,反反应应液液体体积积就就会会发发生生变变化化,这这时时、和和的的可可定义如下:定义如下:式式中中,V V为为反反应应液液体体积积,F F是是体体积积流流量量
16、,S Sinin是是流流加液中的基质浓度,加液中的基质浓度,FSFSinin为基质的质量流量。为基质的质量流量。4.3.1 4.3.1 无反馈控制的流加操作无反馈控制的流加操作 采采用用这这种种操操作作方方式式时时,基基质质的的流流加加按按预预先先设设置置好好的的条条件件进进行行。因因此此,表表达达系系统统的的数数学学模模型型是是否否正正确确成成为为反反应应成成败败的的关关键键。最最简简单单的的微微生生物物的的生长速率为生长速率为作为流加基质的平衡式,有作为流加基质的平衡式,有反应液体积变化的方程式为反应液体积变化的方程式为 式式中中,K Kvapvap为为单单位位时时间间里里由由于于通通气气
17、,随随排排出出气气体体而而失失去去的的水水分分。如如果果流流加加的的基基质质能能够够迅迅速速并并完完全全为为菌菌体体所所消消耗耗,并并且且维维持持代代谢谢为为零零时时,可可得得到到最最大大的的菌菌体体浓浓度度X Xmaxmax。由由于于基基质质流流加加量量与与基基质质消消耗耗量相等,可认为,这样由量相等,可认为,这样由流加基质的平衡式流加基质的平衡式有有 对于所供给基质的浓度,菌体浓度近似一定,即对于所供给基质的浓度,菌体浓度近似一定,即dX/dt=0dX/dt=0时。由上式,可认为(时。由上式,可认为(D D稀释率)。稀释率)。一、一、定流量流加操作定流量流加操作 定定流流量量流流加加操操作
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