外周血细胞形态检验讲解学习.ppt
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1、外周血细胞形态检验 外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验外周血白细胞异常形态检验外周
2、血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化;寄生虫血小板大小、形态、数量变化;寄生虫血小板大小、形态、数量变化;寄生虫血小板大小、形态、数量变化;寄生虫外周血细胞检验程序外周血细胞检验程序血涂片的制备血涂片的制备 器材器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。操作操作 在玻片近一端1/3处,加一滴血液,握住另一张边缘光滑的推片,以3045角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地
3、推动推片至载玻片的另一端。注意事注意事项项 血膜呈舌状,血膜呈舌状,头头、体、尾分明、体、尾分明 空气中晃空气中晃动动,尽快干燥;,尽快干燥;37恒温箱中促干恒温箱中促干 涂片的厚薄、涂片的厚薄、长长度与血滴大小(度与血滴大小(1020l)与血片)与血片质质量量 1h内染色或在内染色或在1h内甲醇固定内甲醇固定 正确清正确清洁洁玻片玻片 抗凝血或毛抗凝血或毛细细血管血涂片;血管血涂片;EDTA能阻止能阻止PLT聚集聚集 抗凝血液抗凝血液4h内涂片内涂片血涂片染色血涂片染色 原理原理 瑞氏(瑞氏(Wright)染色法(经典染色法)染色法(经典染色法)瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理
4、吸附作用。瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。瑞氏染液含瑞氏染液含美蓝和伊红美蓝和伊红两种成分:两种成分:美蓝美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞力(胞 浆),染成兰色;浆),染成兰色;伊红伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成紫红色。染成紫红色。试剂试剂 瑞氏染液瑞氏染液 瑞氏染料瑞氏染料 0.1 g 甲醇甲醇(AR)60mlpH6.8磷酸磷酸盐缓盐缓冲液(冲液(pH6.46.8)磷酸二磷酸二氢钾氢钾(KH2PO4)0.3g 磷酸磷酸氢氢二二钠钠(Na2HPO4)0.2g 加少量蒸加少
5、量蒸馏馏水溶解,再加至水溶解,再加至1000ml。操作操作加瑞氏染液数滴,固定血膜约加瑞氏染液数滴,固定血膜约1min。滴加约等量的缓冲液与染液混合,滴加约等量的缓冲液与染液混合,室温下染色室温下染色510min。用流水冲去染液用流水冲去染液,待干燥后镜检。待干燥后镜检。注意事项注意事项pH对细对细胞染色有影响。胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。未干透的血膜不能染色。染色染色时间时间与染液与染液浓浓度、染色度、染色时时温度成反比。温度成反比。不能先倒掉染液,用流水冲去。不能先倒掉染液,用流水冲去。血膜上有染料血膜上有染料颗颗粒沉粒沉积积,可加少,可加少许许甲醇。甲醇。涂抹标本的观察方法涂抹标
6、本的观察方法:肉眼观察肉眼观察 低倍镜下观察低倍镜下观察 油镜下观察油镜下观察血血 涂涂 片片 镜镜 检检先在低倍先在低倍镜镜下下浏览浏览全片,了解染色好坏和全片,了解染色好坏和 细细胞分布情况,胞分布情况,观观察有无异常察有无异常细细胞。胞。选择选择涂片体尾交界涂片体尾交界处处染色良好的区域,在染色良好的区域,在 油油镜镜下下计计数数100个白个白细细胞,按其形胞,按其形态态特征特征 进进行分行分类计类计数。求出各数。求出各类细类细胞所占百分数。胞所占百分数。血血 涂涂 片片 镜镜 检检A:染色偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚,红细胞染色偏红。:染色偏酸,细胞核、颗粒结构不清楚,红细胞染色偏红。
7、B:染色较好,细胞结构、颗粒、胞浆清晰,红细胞染粉红色。:染色较好,细胞结构、颗粒、胞浆清晰,红细胞染粉红色。C:染色偏碱,细胞核、胞浆染色太深,细胞不易辨认,红细胞:染色偏碱,细胞核、胞浆染色太深,细胞不易辨认,红细胞 染成蓝色。染成蓝色。注意事项注意事项分分类时应类时应从血膜体尾交界从血膜体尾交界处边缘处边缘向中央依次上下呈向中央依次上下呈城城垛垛状迂回移状迂回移动动,计计数使不能重复和数使不能重复和遗遗漏。漏。白白细细胞数明胞数明显显减少的血片,减少的血片,应检查应检查多多张张血片。血片。分分类见类见有核有核红细红细胞,不胞,不计计入入100个白个白细细胞内,以分胞内,以分类类100个白
8、个白细细胞胞过过程中程中见见到多少有核到多少有核红细红细胞胞报报告,并告,并注明所属注明所属阶阶段。段。除慢淋外,破碎除慢淋外,破碎细细胞或不能胞或不能识别细识别细胞不超胞不超过过白白细细胞胞总总数的数的2%。若破碎。若破碎细细胞仍能明确胞仍能明确鉴别鉴别,如破碎的,如破碎的嗜酸性粒嗜酸性粒细细胞,胞,应应包括在分包括在分类计类计数中。在数中。在结结果果报报告中告中应对应对破碎破碎细细胞或不能胞或不能识别细识别细胞作适当描述。胞作适当描述。分分类类中中应应注意注意观观察成熟察成熟红细红细胞、血小板的形胞、血小板的形态态、染、染色及分布情况,注意有无寄生虫和其他异常所色及分布情况,注意有无寄生虫
9、和其他异常所见见。白白细细胞形胞形态变态变化化较较大,遇有疑大,遇有疑问应请问应请示上示上级级主管或主管或主任主任进进行核行核实实,以减少,以减少错误错误。异常红细胞形态检查异常红细胞形态检查大小异常大小异常 正常红细胞大小较为一致,直径正常红细胞大小较为一致,直径69um在各种贫血时,红细胞可出现大、小不在各种贫血时,红细胞可出现大、小不一。直径一。直径10um为大红细胞,为大红细胞,15um为为巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾病等,巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾病等,直径直径6um为小红细胞,多见于缺铁性贫为小红细胞,多见于缺铁性贫血等血等。直径相差直径相差1 1倍以上为大小不均倍以上为大小
10、不均 右图:大红细胞(上)右图:大红细胞(上)小红细胞(下)小红细胞(下)(中央苍白区扩大)中央苍白区扩大)形形形形 态态态态 异异异异 常常常常 RBC直径通常直径通常2.6 um,呈小圆形,细胞中呈小圆形,细胞中心区蛋白含量较正常多。见心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症于遗传性球形红细胞增多症(25%以上)以上)、自身免疫性、自身免疫性溶贫和异常溶贫和异常Hb病(病(HBS、HBC病等)。病等)。球形红细胞球形红细胞 红细胞呈椭圆形,横短,长大,有时红细胞呈椭圆形,横短,长大,有时呈畸形。正常人可见到,呈畸形。正常人可见到,15%。见于以下疾病见于以下疾病:1 1、遗传性椭圆
11、性、遗传性椭圆性RBC增多症,高增多症,高 于于 2550%才有诊断价值。才有诊断价值。2、大细胞性贫血时可达大细胞性贫血时可达25%。3、其他各类贫血有不同程度的其他各类贫血有不同程度的 增多增多。椭圆形红细胞椭圆形红细胞 比正常红细胞扁薄,中心有少许血比正常红细胞扁薄,中心有少许血红蛋白,部分可与周围的血红蛋红蛋白,部分可与周围的血红蛋白连接,边缘部染色较中央深,白连接,边缘部染色较中央深,故呈靶状。主要见于以下疾病故呈靶状。主要见于以下疾病:1、珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 2、严重缺铁性贫血严重缺铁性贫血 3、一些血红蛋白病一些血红蛋白病(血红蛋白(血红蛋白C、D、E、S病
12、)病)4、肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。靶形红细胞靶形红细胞 细胞狭长似镰刀,也细胞狭长似镰刀,也可呈麦粒状或冬青叶可呈麦粒状或冬青叶样,主要见于遗传性样,主要见于遗传性镰形红细胞增多症镰形红细胞增多症 镰形红细胞镰形红细胞 红细红细胞淡染区呈裂口状胞淡染区呈裂口状狭孔,正常狭孔,正常4%。增多。增多见见于以下疾病于以下疾病:1、口形、口形红细红细胞增多症胞增多症 2、急性乙醇中毒、急性乙醇中毒口形红细胞口形红细胞 棘形红细胞是一种带刺状的红细胞,刺呈针刺状或尖刺状,见于以下疾病:1、棘细胞增多症:遗传性血浆脂蛋白缺乏症时,棘形红细胞可高达70%80%2、严重肝病
13、或制片不当 棘形红细胞棘形红细胞 锯齿细胞也称短棘形细胞。细胞突出较棘细胞短,但分布均匀。主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙铜酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。锯齿细胞锯齿细胞 裂红细胞指红细胞碎片,包括盔形红细胞等,多见于DIC和心源性溶血性贫血等。其他也多见于化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。裂红细胞裂红细胞裂红细胞裂红细胞 红细胞中心淡染区扩大,多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病 着色过浅着色过浅染染染染 色色色色 异异异异 常常常常 中心淡染区不见,着色较深,多见于溶血性贫血及大细胞性贫血着色过深着色过深 红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色、灰红色、淡灰色
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