化学发光原理和应用演示教学.ppt
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1、化学发光原理和应用化学发光原理和应用临床检验常见类别临床检验常见类别血液血液/体液常规检测体液常规检测免疫免疫生化生化微生物微生物放射性免疫检测放射性免疫检测酶联免疫检测酶联免疫检测金标免疫检测金标免疫检测化学发光检测化学发光检测直接化学发光直接化学发光酶促化学发光酶促化学发光电化学发光电化学发光临临床床检检验验定量定量半定量半定量免疫定量检测原理免疫定量检测原理 血液(尿液)中有很多含量非常低血液(尿液)中有很多含量非常低(pg/ml、ng/ml、mg/ml),但非常灵敏,),但非常灵敏,其浓度变化能准确反映人体疾病的发生、发其浓度变化能准确反映人体疾病的发生、发展状况。如:展状况。如:T3
2、、T4、AFP、肌钙等等、肌钙等等 【生化:检测含量比较高的物质生化:检测含量比较高的物质】准确、定量准确、定量 【酶标法、金标法:定性、半定量酶标法、金标法:定性、半定量】免疫标记技术发展历程免疫标记技术发展历程放射免疫放射免疫 优点:准确、定量,项目齐全优点:准确、定量,项目齐全缺点:放射性污染缺点:放射性污染 试剂有效期短(一个月)试剂有效期短(一个月)操作繁琐、时间操作繁琐、时间2小时左右小时左右 磁酶免磁酶免 半自动化学发光半自动化学发光 时间分辨时间分辨优点:没有放射性污染,试剂有效期长(优点:没有放射性污染,试剂有效期长(6 6个月以上)个月以上)缺点:操作繁琐,缺点:操作繁琐,
3、2 2小时有结果,准确性差小时有结果,准确性差免疫标记技术发展历程免疫标记技术发展历程全自动化学发光全自动化学发光优点:优点:没有放射性污染没有放射性污染 试剂有效期长(试剂有效期长(6 6个月以上)个月以上)操作全自动操作全自动 速度快,半小时出结果速度快,半小时出结果 结果最准确结果最准确缺点:缺点:试剂价格贵试剂价格贵免疫标记技术发展历程免疫标记技术发展历程?全自动化学发光主要品牌全自动化学发光主要品牌化学发光主要技术化学发光主要技术包被技术:包被技术:板式化学发光板式化学发光:固液相固液相 5%参加反应参加反应(时间分辨时间分辨)(定性(定性 定量不准)定量不准)磁颗粒化学发光磁颗粒化
4、学发光:准均相准均相 95%参加反应参加反应 (精确(精确 定量)定量)发光原理:发光原理:直接化学发光直接化学发光 标记物在碱性(酸性)条件下,加强氧化剂,瞬间发光标记物在碱性(酸性)条件下,加强氧化剂,瞬间发光 厂家由厂家由10个点做成标准曲线,用户只要个点做成标准曲线,用户只要高低两点高低两点定标修正曲线定标修正曲线即可,节省试剂,结果稳定、准确即可,节省试剂,结果稳定、准确酶促化学发光酶促化学发光 标记物在酶催化下,缓慢发光标记物在酶催化下,缓慢发光 由于酶不稳定,每次都必须用由于酶不稳定,每次都必须用6-12个点做标准曲线,个点做标准曲线,浪费试剂浪费试剂化学发光主要技术化学发光主要
5、技术 经过清洗和分离后,在反应杯中先后加入经过清洗和分离后,在反应杯中先后加入激发底物激发底物1 1和和激发激发底物底物2 2,引发化学发光反应,产生光信号。,引发化学发光反应,产生光信号。仪器测定后显示仪器测定后显示相对光强度相对光强度(RLU)(RLU)值值,最后根据工作曲线计,最后根据工作曲线计算算待测物浓度待测物浓度。夹心法夹心法免疫定量检测原理免疫定量检测原理免疫定量检测原理免疫定量检测原理夹心法夹心法 样本样本,ABEIABEI标记物标记物,FITCFITC标记物标记物和和磁珠磁珠加入到反应杯中,温浴加入到反应杯中,温浴1515分钟分钟*,形成形成“夹心三明治夹心三明治”免疫复合物
6、,并被磁珠俘获。免疫复合物,并被磁珠俘获。在夹心法中,待测物浓度和样本在夹心法中,待测物浓度和样本RLURLU值成正相关值成正相关此时主曲线单调递增此时主曲线单调递增免疫定量检测原理免疫定量检测原理免疫定量检测原理免疫定量检测原理RLURLU0 0Con.Con.50500ABCDEFGHIJ主曲线的绘制:十点定标主曲线的绘制:十点定标竞争法竞争法磁珠磁珠样本,样本,ABEIABEI标记物标记物,FITC,FITC标记物和磁珠加入到反应杯标记物和磁珠加入到反应杯中,温浴中,温浴1515分钟分钟*,ABEI,ABEI标记抗原,和样本待测抗原竞标记抗原,和样本待测抗原竞争结合争结合FITCFITC
7、标记的抗体,标记的抗体,2 2种产物同时被磁珠俘获。种产物同时被磁珠俘获。免疫定量检测原理免疫定量检测原理经过清洗和分离后,在反应杯中先后加入激发底经过清洗和分离后,在反应杯中先后加入激发底 物物1 1和激发底物和激发底物2 2,引发化学发光反应,产生光信号。,引发化学发光反应,产生光信号。仪器测定后显示相对光强度仪器测定后显示相对光强度(RLU)(RLU)值,最后根据工值,最后根据工作曲线计算待测物浓度。作曲线计算待测物浓度。竞争法竞争法免疫定量检测原理免疫定量检测原理在竞争法中,待测物浓度和样本在竞争法中,待测物浓度和样本RLURLU值成值成负相关负相关此时主曲线此时主曲线单调递减单调递减
8、免疫定量检测原理免疫定量检测原理*两点定标原理Cal1Cal2主曲线主曲线定标曲线定标曲线C01C021%=Rf|C1-C01|Rf C1*100%线性补偿曲线线性补偿曲线免疫定量检测原理免疫定量检测原理发光标志物发光标志物 ABEIABEI在酸碱溶液里都非常稳定在酸碱溶液里都非常稳定独家专利独家专利 ABEIABEI化学品名称化学品名称:N-(4-:N-(4-氨基丁基氨基丁基)-N-)-N-乙烷基异鲁米诺乙烷基异鲁米诺 N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol分子式分子式:C C1414H H2
9、020N N4 4O O2 2 分子量:分子量:276.33276.33 +NaOH +H2O2 ABEI 激发底物激发底物1 1 激发底物激发底物2 2 发光发光 (持续测量持续测量3 3秒秒)发光信号产生及测量ABEIABEI直接化学发光直接化学发光发光标志物发光标志物 ABEIABEIdelay 2.5s delay 0.1s发光标志物发光标志物 ABEIABEI纳米磁珠:纳米磁珠:由聚合物交联构成骨架,包裹由聚合物交联构成骨架,包裹纳米级铁氧化物形成的微米级的小球纳米级铁氧化物形成的微米级的小球纳米级铁氧化物赋予磁性微球纳米级铁氧化物赋予磁性微球超顺磁性超顺磁性在磁场中迅速被磁化并增强
10、磁场,从而可以在磁场中迅速被磁化并增强磁场,从而可以快速聚集快速聚集而从液相中分离。而从液相中分离。外部磁场消失后恢复到初始状态,没有剩磁,外部磁场消失后恢复到初始状态,没有剩磁,可以可以重新分散重新分散开开,利于清洗。利于清洗。纳米免疫磁性微珠纳米免疫磁性微珠(专利技术专利技术)磁球表面有大量磁球表面有大量活性基团活性基团,在适当条件下可,在适当条件下可以和各种分子以稳定的化学键结合。以和各种分子以稳定的化学键结合。根据标记物的不同,可以广泛应用于诊断领根据标记物的不同,可以广泛应用于诊断领域。域。MALGUMIMALGUMI系统中,我们可以在磁球系统中,我们可以在磁球上标记上标记FITCF
11、ITC抗体抗体,作为通用的,作为通用的分离工具分离工具。也可以根据需要直接标记其他特也可以根据需要直接标记其他特定的抗原或抗体,作为特殊项定的抗原或抗体,作为特殊项目中的分离手段。目中的分离手段。纳米免疫磁性微珠纳米免疫磁性微珠纳米免疫磁性微珠纳米免疫磁性微珠磁珠扩增了抗原抗体反应面积,从而磁珠扩增了抗原抗体反应面积,从而提高反应效率,缩短提高反应效率,缩短了反应时间了反应时间更快更充分的捕获抗原抗体从而更快更充分的捕获抗原抗体从而提高了灵敏度提高了灵敏度作为液相分离平台,与试剂充分混合后显著的作为液相分离平台,与试剂充分混合后显著的减少批内和减少批内和批间差异批间差异通过化学键作用标记抗原或
12、抗体通过化学键作用标记抗原或抗体增强了准确性增强了准确性。性能优点性能优点MAGLUMI 1000MAGLUMI 1000全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪MAGLUMI 2000MAGLUMI 2000全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪MAGLUMI 2000 PlusMAGLUMI 2000 Plus全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪MAGLUMI 4000MAGLUMI 4000全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪超级超级POCT MAGLUMI 600POCT MAGLUMI 600测试速度:180TH;第一个结果时间:12分钟;一
13、次可装载16个样本,可随时添加样本;一次性可装载4个试剂盒,可随时连续装载、替换;一次可装载60个反应杯全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪 精美、简练的外观精美、简练的外观M2000M2000M2000M2000机器分解图机器分解图全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪样本仓样本仓 144 144个标本位,可随时添加,急诊优先个标本位,可随时添加,急诊优先 条形码识别,抽血管、放免管等都可条形码识别,抽血管、放免管等都可 样本稀释比例任意设定,自动稀释高滴度样本样本稀释比例任意设定,自动稀释高滴度样本全自动化学发光免疫分析
14、仪全自动化学发光免疫分析仪试剂区试剂区 15/2515/25个试剂位,可随时连续装载、调换试剂盒个试剂位,可随时连续装载、调换试剂盒 采用射频识别技术读取试剂盒信息,读取速度采用射频识别技术读取试剂盒信息,读取速度 试剂区冷藏(试剂区冷藏(8-128-12),独立供电),独立供电 带磁球自动悬浮系统带磁球自动悬浮系统全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪采样针采样针 双针,分别加试剂和样本双针,分别加试剂和样本 内外壁清洗,针外壁特氟龙包内外壁清洗,针外壁特氟龙包 被,杜绝交叉污染被,杜绝交叉污染 液面探测、凝块检测功能液面探测、凝块检测功能全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫
15、分析仪一次可装载一次可装载720720个反应杯个反应杯检测过程中,可随时连续装载检测过程中,可随时连续装载 反应杯加载存储器反应杯加载存储器全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪样本编辑模式样本编辑模式 正常模式:正常模式:病人病人IDID号从条形码上读取号从条形码上读取,项目手动输入;项目手动输入;快速模式:快速模式:软件自动生成病人软件自动生成病人IDID号,项目手动输入号,项目手动输入;联网模式:联网模式:病人病人IDID号条形码读取,项目从号条形码读取,项目从LisLis系统获取系统获取。全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪试剂盒试剂盒试剂盒自带标准品,两点定标修
16、正主曲线试剂盒自带标准品,两点定标修正主曲线集成试剂盒设计,无需试剂预处理,即开即用集成试剂盒设计,无需试剂预处理,即开即用射频识别技术,试剂的所有信息储存在高频电子标签上射频识别技术,试剂的所有信息储存在高频电子标签上更新、增加新项目无需对软件升级,方便快捷更新、增加新项目无需对软件升级,方便快捷 全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪软件系统软件系统中、英、西班牙文界面、报告软件中、英、西班牙文界面、报告软件真正实现人机对话真正实现人机对话智能报警智能报警全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪M1000 M1000 与与 M2000M2000的比较的比较1.1.无无层存
17、储器层存储器2.2.一次可装载一次可装载192个反应杯个反应杯3.3.单臂单针单臂单针设计设计4.4.120120测试测试/小时小时1.1.有有层存储器层存储器2.2.一次可装载一次可装载720720个反应杯个反应杯3.3.双臂双针双臂双针设计,分别加试设计,分别加试 剂和样本剂和样本4.4.180180测试测试/小时小时全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪M2000 M2000 与与 M2000PM2000P的比较的比较1.1.台式台式2.2.1515个试剂位个试剂位3.3.样本区样本区无无冷藏功能冷藏功能1.1.立式立式,带储藏柜,带储藏柜2.2.2525个试剂位个试剂位3.3
18、.样本区样本区有有冷藏功能冷藏功能全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪M2000P M2000P 与与 M4000M4000的比较的比较1.1.180180测试测试/小时小时1.1.280280测试测试/小时小时全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪 反反应杯杯温育温育测量量废弃物弃物加加样清洗清洗M2000M2000硬件介绍硬件介绍全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪 反反应杯杯温育温育测量量加加样清洗清洗M2000M2000硬件介绍硬件介绍全自动化学发光免疫分析仪全自动化学发光免疫分析仪废弃物弃物新产业与同行产品对比新产业与同行产品对比对比项目对比项目对比
19、项目对比项目MAGLUMIMAGLUMIMAGLUMIMAGLUMI2000200020002000罗氏罗氏罗氏罗氏e-411e-411罗氏罗氏罗氏罗氏e-601e-601雅培雅培雅培雅培i2000i2000西门子西门子西门子西门子CPCPCPCP贝克曼贝克曼贝克曼贝克曼 Access2Access2Access2Access2发光标记发光标记物物ABEIABEI三联吡啶钌三联吡啶钌三联吡啶钌三联吡啶钌吖啶酯吖啶酯吖啶酯吖啶酯碱性磷酸酶碱性磷酸酶测量原理测量原理磁颗粒的直磁颗粒的直接化学发光接化学发光磁颗粒的电磁颗粒的电化学发光化学发光磁颗粒的电磁颗粒的电化学发光化学发光磁颗粒的直磁颗粒的直接
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