农杆菌介导的转化方法知识分享.ppt
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农杆菌介导的转化方法根瘤根瘤存在于能引起植物形成冠瘿瘤的农杆菌中,诱导双子叶冠瘿瘤形成,又称肿瘤诱导质粒(tumor inducing plasmid)。Ti质粒质粒第三步第三步 毒性基因(毒性基因(vir)表达)表达T-DNA上的产物催化产生过量的生长素和细上的产物催化产生过量的生长素和细胞分裂素,形成植物冠瘿瘤。胞分裂素,形成植物冠瘿瘤。virA、virG、virD、virB第四步第四步 T-DNA转移转移第五步第五步 诱导冠瘿瘤诱导冠瘿瘤T-DNA被被vir基因产物切下来,并运送到植物细胞基因产物切下来,并运送到植物细胞核里,整合到植物基因组中。核里,整合到植物基因组中。第六步第六步 土壤农杆菌代谢冠瘿碱。土壤农杆菌代谢冠瘿碱。1 1 1 1、共培养法、共培养法、共培养法、共培养法 包括原生质体共培养、悬浮细胞共培养和愈伤组织共培养。2 2 2 2、叶圆盘法、叶圆盘法、叶圆盘法、叶圆盘法3 3、活体接种法、活体接种法农杆菌转化的方法农杆菌转化的方法 1.共培养法The co-integration method 农杆菌共培养侵染愈伤组织分化生芽生根2.叶盘转化法3.活体接种法
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