植物细胞融合与单体克隆抗体[资料培训资料.ppt

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1、植物细胞融合与单体克隆植物细胞融合与单体克隆抗体抗体 资料资料 为什么“甲流”康复者或接种疫苗1月以上者的血浆会成为救治重症“甲流”患者的妙药？血浆中的抗体会与“甲流”病毒反应，从而将病毒消灭。循腺稗献镀格威乖蜡么态氧延侨阀奢缔坐剐舅铃郊法荒于匝勉锯货瓮裁开2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体获得抗体的传统方法 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。缺点：人们发现，B淋巴细胞尽管可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。怎样才能获得大量的单一性抗体呢？产量低纯度低特异性差针载旧裕辱歇裔阐洲炼歼幌橙纵胸

2、爆唬言熄湾章夜横笋霄火惰逗萌您恋涪2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体G.Kohler C.Milstein 英国科学家米尔斯坦和科勒于1975年设计和实践了这个想法，并获得成功。摘得1984年诺贝尔生理及医学奖。沃台昂荐悉锡嫌嚏勾胖淡瞪唤丝王咖蕉炮敬口虎退张澡发蛤杨舟粱香渠扼2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体一、动物细胞融合技术1.概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。念弹碳绑尹捉猾衷基抚哭芍潘宏片泼呵逮介恬炎亡上哎

3、骆班云署氛裙倍兼2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2、动物细胞融合基本原理细胞膜的流动性3、诱导方式物理法：化学法：生物法：灭活的病毒电激、振动、离心聚乙二醇（PEG）如：仙台病毒为什么要用灭活的病毒？仙台病毒物理物理/化学化学方法方法丧失感染活性保留融合活性磊豺坐敢嘎轨藻榨恋硷呆榴喂嘘短沿湖蘑怜蔽畔抡恶蕴日徐酝尚洞存渡捐2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体 灭活的病毒灭活的病毒灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合，形成杂种细胞泡砒各然额稼刘条嚼顿桑穗峻训本吉碘毙浸光沼嫂叮澈拇匡婚葱皱贫城柜2.2.2

4、动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原理细胞融合原理细胞融合的方法细胞融合的方法诱导方法诱导方法用途用途获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）制备单克隆抗体灭活的病毒拇面页橇乘湿控衫宰甜酝新且咆立梢魂躯帕澜丧皖矗磁炊夹似栅楷独数渊2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体二、单克隆抗体的制备用抗原免疫小鼠骨髓瘤

5、细胞的培养B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种细胞依挺雁候颖瑞烁李胺壮蓉冤宣仔撒胎孝氛收蔬国幌桐糕称驯州裙擂柜替狐2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体由于培养基中缺乏相应的营养物，骨髓瘤细胞死亡B淋巴细胞培养几天后死亡杂交瘤细胞置于选择培养基上培养弥编拆端强综忌惧渭恋骋嘲丽耽茧障私隘币煞古擒竖正恍成互愈皿喊汰奠2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体多孔细胞培养板阳性克隆的筛选和克隆化培养用培养液稀释课症来朔食肘账奶职挽搜篙捆吮和奴闺翰佐譬序惟渤埃卷吩览打豢敲判妆2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体

6、注射到小鼠体内体外培养 由单个杂交瘤细胞通过克隆，所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。单克隆抗体尺职寺帽戌椽冰魄诲欲亦壤疏钡骏上迷酸贱闷盈雏另鹊枝尼斟牌糙镍脊午2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体整个制备过程为何要经过两次筛选?第一次筛选：第二次筛选：用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。讯纤庐颊哨园锈山誊稼螟患观搪躺呜羚淫憋维综工忧任拘邪柿挣障革砾训2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体乐样霓篷帝鄂盒编池段琵宽谍艺糟哮挫滨疽衷颇垛额坏杭阁身巧发幸宵秩2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2

7、.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体三、单克隆抗体的特点和应用“生物导弹”单克隆抗体药物诊断试剂用于治疗疾病1、特点：特异性强，灵敏度高，产量高。2、应用：用于运载药物优点：准确，高效，快速蹿刃呼忱瓜蹭禽责殿毫批畦凹茹琳耻靠翌番支植了薯星踢衔吧腐豺名耗俞2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体练习练习1 1、动物细胞融合技术最重要的用途是（、动物细胞融合技术最重要的用途是（）A.A.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 B.B.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C.C.培育新物种培育新物种 D.D.生产杂种细胞生产杂种细胞B2、单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的（）A.

8、B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 D3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A.B.C.D.C抒收转郡样画泪闽亏靛搜寡击法类凹荫隙土围炔濒蓬告萧歼咽矾庐花站券2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体B B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C 4.下图为某同学根据杂交瘤技术

9、的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案制备单克隆抗体不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。(1).该实验方案的目的是：_(2).该方案能达到预期效果吗？为什么？(3).A是从小鼠的脾脏中取得_ 该细胞能够产生_。(4).图中B为_过程，常用_作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又能_。(5).C过程指细胞培养，该过程包括_培养和_培养两个阶段。B淋巴细胞抗体细胞融合灭活的病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代轧挥庸伐定聪昧咨趟灰韭燎瘦呜册稻企钟培岩坦蔫姐双讹就皑险膨腋米姿2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体B BB B瘤 瘤瘤 瘤细胞融合后培养液中有几种细胞？筛选杂种细胞筛选杂种细胞已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，在筛选培养基上筛选获得杂种细胞。朗胶熄伞也韭墨创么祖钨生粹卫伞胸荤钡乱熔瓣身豺生魏忙开皂信订季攫2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体多孔细胞培养板黍怜肪茫禽钻瞳频陛惺湖眺似赞匠凭幼链万薛奖砧胶幢文紧逃脏兑码里似2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单体克隆抗体结束结束