流式培训-B27-封闭抗体复习过程.ppt
《流式培训-B27-封闭抗体复习过程.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《流式培训-B27-封闭抗体复习过程.ppt(24页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、流式培训-B27-封闭抗体流式细胞术流式细胞术流动流动细胞细胞测量术测量术Flow Cytometry(FCM)Fluorescence-activated cell-sorting(FACS)流式细胞术流式细胞术流式细胞术流式细胞术快速检测流动的快速检测流动的单细胞或颗粒单细胞或颗粒,达上万个,达上万个/每秒每秒检测物可以是细胞、细菌或各种微粒,检测物可以是细胞、细菌或各种微粒,0.5-50 m mm范围内范围内 多参数同时分析多参数同时分析,FS/SS/FLs(荧光荧光)可分析,可分选可分析,可分选特特 点点特特 点:点:人类白细胞抗原系统(Human Leucocyte Antigen,
2、HLA),俗称为白细胞血型,是人类的组织相容性抗原,HLA抗原受控于HLA基因。HLA基因是由一组高度多态性基因组成的染色体区域,因其产物代表移植供者与受者相互接受的程度,故又称其产物为移植抗原或组织相容性抗原。一、一、HLAHLA简介简介HLA基因遗传区域位于人类第六号染色体短臂,区域内包含224个基因座位,已发现的等位基因数共1288种。根据编码分子的特性不同,可将整个复合体的基因分成:I类、II类、III类。I 类基因:区位于着丝点的远端,主要包括HLA-A、B、C三个位点,各位点有数目不同的等位基因,HLA-B27是B位点的一个等位基因。II 类基因区:位于着丝点的近端,主要由DR、D
3、Q、DP三个亚区构成,每个亚区又分若干个位点。在B细胞和上表达,这两类抗原都与移植有关 III 类基因区:含有编码补体成分C2、C4、B因子及TNF、热休克蛋白和21羟化酶的基因,其产物是一些可溶性蛋白质。一、HLA-B27HLA-B27抗原属于HLA-类抗原,由和两条肽链组成。第6号染色体的HLA-类基因编码链,15号染色体编码链。基本上表达在机体所有有核细胞上,尤其是淋巴细胞表面含量丰富。目前,在HLA与疾病的关联研究中,较有临床应用价值的当数HLA-B27HLA-B27与强直性脊柱炎的关联与强直性脊柱炎的关联。在诊断和鉴别强直性脊柱炎中有重要的应用价值。二、二、HLA-B27检测方法检测
4、方法1.HLA-B27抗原检测CDC:微量淋巴细胞毒法FCM:流式细胞学法2.HLA-B27基因学检测荧光定量PCR(一)微量淋巴细胞毒法(一)微量淋巴细胞毒法1.原理原理:待检的淋巴细胞表面的HLA-B27抗原与已知的HLA-B27抗体结合,在补体的参入下,导致细胞膜溶解,能透过染料使细胞着色,在显微镜下判断HLA-B27为阳性,不着色为阴性。2.2.方法学应用评价:方法学应用评价:该方法结果稳定,可靠,不需要特殊仪器,是目前通用的方法,一般实验室均可开展。(二)流式细胞学法1.原理:利用荧光标记的抗B27的单抗与淋巴细胞表面B27抗原结合,使细胞带有荧光强度,用流式细胞仪检测,判断B27抗
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 培训 B27 封闭 抗体 复习 过程
限制150内