仪器分析大连理工大学42高效液相色谱仪.ppt

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1、第第四四章章高效液相色谱法和高效液相色谱法和超临界流体色谱法超临界流体色谱法 高效液相色谱高效液相色谱仪仪与结构流程与结构流程4.2.2 主要部件主要部件4.2.3 检测器检测器第二节第二节高效液相色谱仪高效液相色谱仪instrument of HPLCinstrument of HPLCHigh performance liquid High performance liquid chromatography and Supercritical chromatography and Supercritical fluid chromatographyfluid chromatography

2、2022/11/202022/11/204.2.1 液相色谱仪与结构流程液相色谱仪与结构流程2022/11/202022/11/20液相色谱仪（液相色谱仪（2）2022/11/202022/11/20液相色谱仪（液相色谱仪（3）2022/11/202022/11/20液相色谱仪（液相色谱仪（4）2022/11/202022/11/20液相色谱仪（液相色谱仪（5）2022/11/202022/11/20液相色谱仪（液相色谱仪（6）2022/11/202022/11/201.结构流程结构流程2022/11/202022/11/202022/11/202022/11/204.2.2 主要部件主要部件

3、(1)(1)高压输液泵高压输液泵高压输液泵高压输液泵 主要部件之一，压力：主要部件之一，压力：15010150105 535010350105 5 PaPa。为为了了获获得得高高柱柱效效而而使使用用粒粒度度很很小小的的固固定定相相(10(10m)m)，液液体体的的流流动动相相高高速速通通过过时时，将将产产生生很很高高的的压压力力，因因此此高高压压、高速是高效液相色谱的特点之一。高速是高效液相色谱的特点之一。应应具具有有压压力力平平稳稳，脉脉冲冲小小，流流量量稳稳定定可可调调，耐耐腐腐蚀蚀等等特特性。性。（动画）（动画）2022/11/202022/11/20(2)梯度淋洗装置梯度淋洗装置外梯度

4、（高压梯度）外梯度（高压梯度）外梯度（高压梯度）外梯度（高压梯度）:利用两台高压输液泵，将利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。进入色谱柱。内梯度（低压梯度）内梯度（低压梯度）内梯度（低压梯度）内梯度（低压梯度）:一台高压泵一台高压泵,通过比例调通过比例调节阀节阀,将两种或多种不同极性将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。压泵中混合。2022/11/202022/11/20(3)进样装置进样装置 流路中为高压力工作状流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压

5、的六通态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，阀进样装置，结构如图所示：结构如图所示：2022/11/202022/11/20(4)高效分离柱高效分离柱 柱体为直形不锈钢管，内径柱体为直形不锈钢管，内径1 16 6 mmmm，柱长柱长5 540 40 cmcm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。2022/11/202022/11/20(5)检测器检测器 紫外检测器紫外检测器 示差折光检测器示差折光检测器 荧光检测器荧光检测器 光电二极管阵列检测器光电二极管阵列检测器2022/11/202022/11/204.2.3 检测器检测器 a.a.紫外检测器紫外

6、检测器紫外检测器紫外检测器 应应用用最最广广，对对大大部部分分有有机机化合物有响应。化合物有响应。特点：特点：灵敏度高；灵敏度高；线性范围宽；线性范围宽；流通池可做得很小流通池可做得很小(1(1mm 10mm mm 10mm，容积容积 8 8L)L)；对流动相的流速和温度变化不敏感；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。可用于梯度洗脱。2022/11/202022/11/20b.b.光电二极管阵列检测器光电二极管阵列检测器 紫外检测器的重要进展；紫外检测器的重要进展；光光电电二二极极管管阵阵列列检检测测器器：10241024个个二二极极管管阵阵

7、列列，各各检检测测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。2022/11/202022/11/202022/11/202022/11/20光电二极管阵列检测器光电二极管阵列检测器2022/11/202022/11/20三维：光谱三维：光谱-色谱图色谱图2022/11/202022/11/20c.示差折光检测器示差折光检测器（Differential refractive index detector）除紫外检测器之外应用最多的检测器。除紫外检测器之外应用最多的检测器。可可连连续续检检测测参参比比池池和和样样品品池池中中流流动动相相之之间间的的折折光光指指

8、数数差差值。差值与浓度成正比。值。差值与浓度成正比。通通用用型型检检测测器器（每每种种物物质质具有不同的折光指数）。具有不同的折光指数）。灵灵敏敏度度低低，对对温温度度敏敏感感，不能用于梯度洗脱不能用于梯度洗脱。偏偏转转式式、反反射射式式和和干干涉涉型型三种。三种。2022/11/202022/11/20示差折光检测器示差折光检测器2022/11/202022/11/20d.荧光检测器荧光检测器（Fluorescence detector）高高灵灵敏敏度度，高高选选择择性。性。对对多多环环芳芳烃烃，维维生生素素B B，黄黄曲曲霉霉素素，卟卟啉啉类类化化合合物物，农农药药，药药物物，氨氨基基酸酸

9、，甾甾类类化合物等有响应。化合物等有响应。2022/11/202022/11/20请选择内容请选择内容结束结束结束结束4.14.1 高效液相色谱法的特性高效液相色谱法的特性高效液相色谱法的特性高效液相色谱法的特性 4.24.2 高效液相色谱仪高效液相色谱仪高效液相色谱仪高效液相色谱仪 4.34.3 液相色谱的固定相与流动相液相色谱的固定相与流动相液相色谱的固定相与流动相液相色谱的固定相与流动相 4.44.4 液相色谱中的主要分离类型液相色谱中的主要分离类型液相色谱中的主要分离类型液相色谱中的主要分离类型 4.54.5 液相色谱分析条件的选择液相色谱分析条件的选择液相色谱分析条件的选择液相色谱分析条件的选择 4.64.6 高效液相色谱法的应用高效液相色谱法的应用高效液相色谱法的应用高效液相色谱法的应用 4.74.7 离子色谱法离子色谱法离子色谱法离子色谱法 4.84.8 超临界流体色谱法超临界流体色谱法超临界流体色谱法超临界流体色谱法2022/11/202022/11/20