艾滋病实验室检查讲解学习.ppt

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1、艾滋病实验室检查2免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10(109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定3血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体的初筛试验抗体的初筛试验ELISA（酶联免（酶联免疫试验）疫试验）4血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体的确证试验抗体的确证试验Western blot（免疫印迹（免疫印迹试验）试验）5血清学检测（）血清学检测（）HIV抗原检测抗原检测ELISA

2、夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）6分子生物学检测分子生物学检测（1）HIV RNA检测检测RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应）PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）和一个

3、荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血浆中的病毒查血浆中的病毒RNARNA7分子生物学检测（分子生物学检测（2 2）淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理：原理：RNARNA片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂纤维素滤膜，再用探针杂交交8分子生物学检测（分子生物学检测（3）HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某

4、一某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生特定的碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列核四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的苷酸，通过在尿素变性的PAGEPAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNADNA序列序列9病毒检测病毒检测l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂，主要用于科研操作复杂，主要用于科研10诊诊 断断11诊断原则诊断原则流流行行病病学学史史：有有静静脉脉注注射射毒毒品品史史；多多个个性性伴伴和和不不洁洁性性生生活活史史；输输入入未未经经HIV抗抗体体检检测测的的血血液液和和血血制制品品史史；HIV

5、抗抗体体阳阳性性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：临床表现：高高危危对对象象出出现现上上感感样样及及单单核核细细胞胞增增多多症症样样表表现现，颈颈、腋腋及及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。感染。无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临床表现。实实验验室室检检查查：HIV抗抗体体阳阳性性，并并经经确确证证试试验验确确认认。CD4+T淋淋巴巴细细胞胞数数明明显显减减少少。HIV RNA和和P24抗抗原原的的检检测测有助于早期诊断新生儿的有助于早期诊断新生儿的HIV感染。感

6、染。12诊断标准诊断标准l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体阳性抗体阳性 13诊断标准诊断标准l艾滋病期艾滋病期 流流行行病病学学史史，HIV抗抗体体阳阳性性，临临床床表表现现有有下下列列一项或以上一项或以上：1.1.1.1.短短短短期期期期（6 6 6 6个个个个月月月月内内内内）体体体体重重重重下下下下降降降降10101010以以以以上上上上；2.2.2.2

7、.咳咳咳咳嗽嗽嗽嗽或或或或腹腹腹腹泻泻泻泻超超超超过过过过4 4 4 4周周周周；3.3.3.3.持持持持续续续续或或或或间间间间歇歇歇歇发发发发热热热热超超超超过过过过4 4 4 4周周周周；4.4.4.4.全全全全身身身身淋淋淋淋巴巴巴巴结结结结肿肿肿肿大大大大；5.5.5.5.反反反反复复复复带带带带状状状状疱疱疱疱疹疹疹疹或或或或慢慢慢慢性性性性播播播播散散散散性性性性HSVHSVHSVHSV感感感感染染染染；6.6.6.6.口口口口咽咽咽咽念念念念珠珠珠珠菌菌菌菌病病病病；7.7.7.7.全全全全身身身身搔搔搔搔痒痒痒痒性性性性皮皮皮皮炎炎炎炎；8.8.8.8.反反反反复复复复发发发

8、发生生生生的的的的败败败败血血血血症症症症；9.9.9.9.深深深深部部部部真真真真菌菌菌菌感感感感染染染染，马马马马尔尔尔尔尼尼尼尼非非非非青青青青霉霉霉霉菌菌菌菌；10.10.10.10.肺肺肺肺孢孢孢孢子子子子虫虫虫虫肺肺肺肺炎炎炎炎；11.11.11.11.活活活活动动动动性性性性巨巨巨巨细细细细胞胞胞胞病病病病毒毒毒毒感感感感染染染染；12.12.12.12.弓弓弓弓形形形形虫虫虫虫脑脑脑脑病病病病。13.13.13.13.反反复复发发生生、难难治治性性肺肺部部感感染染或或进进展展迅迅速速的的活活动动性性结结核核病病；14.14.中中枢枢神神经经系系统统受受损损、占占位位性性病病变变

9、或或中中、青年痴呆症；青年痴呆症；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。卡波西肉瘤或淋巴瘤。14诊断标准诊断标准 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状15鉴别诊断鉴别诊断l原发性原发性CD4+淋巴细胞减少症淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发性继发性CD4+淋巴细胞减少淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。16预预 后后17影响预后的因素影响预后的因素感染的感染的HIV型别及亚型：型别及亚型：HIV-1较较HIV

10、-2临床进展快临床进展快并发的机会性感染：并发的机会性感染：同同时时合合并并卡卡波波济济肉肉瘤瘤及及肺肺孢孢菌菌肺肺炎炎者者病病死死率率最最高高；合合并丙型肝炎者预后差并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：抗逆转录病毒治疗：治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 18HIV感染未治疗者的结局感染未治疗者的结局典型典型(70%80%)：5 51010年进展为艾滋病年进展为艾滋病快速进展型快速进展型(10%15%)：2 23 3年年长长期期无无进进展展型型(500/mm500/mm3 3，病毒载量，病毒载量10103 3拷贝拷贝/ml长长期期存存活活型型(极极少少)：进进展展到到艾艾滋滋病病期期后后能能稳稳定定较较长长一段时间一段时间 此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢