临床检验(急诊)标准操作程序SOP.doc

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1、临床检验(急诊)标准操作程序SOP芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件1 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件2【目的】用于ACT DIFF2血细胞分析仪的标准操作程序。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【开机程序】1开机前的检查1 试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够将试剂准备好备用，开封后的试剂使作限期为：溶血素STROMATOLYSER-WH90天，稀释液CELLPACK60天。2 仪器的检查：检查管道、电线的连接。3 废液的检查：主机左侧面的防止逆流容器和废液容

2、器中假设有废液积存须予以排除。4 翻开主机前的罩子检查打印纸。2.开机1翻开仪器后面板的电源开关平时不关闭，再翻开PC机及打印机的电源。2仪器自身进行一系列自我检查，显示器上出现相应的信息，等各项指标“PASS后，选用分析模式。【标本测试】1将EDTA-NA2抗凝的末梢血或静脉血充分混匀一分钟或将试管颠倒10次后，插入吸样针，按START吸样。等吸样针缩进仪器中，移去标本。仪器屏幕显示测试结果并传输到LIS系统。2.操作人员以自己的工号和密码进入LIS系统，在主屏的“检验仪器“栏选择ACT DIFF2。 3 确定标本号与ACT DIFF2仪器屏幕显示的测试标本号一致，在“门诊住院号“栏输入门诊

3、发票号或住院号或用扫描枪扫描试管上条形码即获得病人相关信息。4在LIS系统审核、确认栏审核、确认，打印报告或经网络发送报告。 3之后进行运行检查，在部湿度，如果仪器此期间，所有0.310/uL以下；6RBC 0.0210/uL以下；HGB 0.1g/dL以下；3PLT 1010/uL以下.【质控物监测】在测量样本之前，先测定质控物，在主菜单上选择QUALITY CONTROL质控菜单，在选择1-EXECUTION OF CONTROL执行质控，在这一步骤中可以选择质控的类型，质控血清或值的血液标本，然后按SAMPLE进样。1.将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。芜湖市第二人民医院检

4、验科标准操作程序文件32.将测定结果进行分析，质控物测定结果在允许误差范围提示PLT异常，可能地线未接好，缓冲液脏，小血小板多，此时需检查地线连接或更换缓冲液。W17 提高PLT/RBC异常，可能大血小板增多，小RBC异常，此时需检查PLT阈值。如有必要需更换。W18提示WBC异常，可能淋巴细胞与中性粒细胞界限不明显，此时需检查T1、T2、T3阈值。如有必要显微镜下检查。M+ 提示MED异常，可疑嗜酸细胞单核细胞，有幼稚或病理细胞，此时需在显微镜下检查以确认。A2提示废液桶满，需立即倒空废液桶。A4提示溶血剂缺乏，需立即加溶血剂。A18提示缓冲液缺乏，需立即加缓冲液。A19提示缓冲液桶无压力，

5、可能桶盖未拧紧，需检查盖的密封情况。A28提示清洁剂缺乏，需立即加清洁剂。4.手工解析：当从测定结果的峰分析有干扰物引起假性增高或假性减低、或通过显微镜计数法确认仪器测定受干扰物的影响时，可用手工解析重新测定。操作程序如下：1 在主菜单上按3健，此时显示出手工解析画面的屏幕菜单。窗口中显示的工程为L： 表示标本读数POS：读数的顺序号ID：病人的ID号码AGE：病人的年龄芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件4SEX：病人的性别 F：格式的缩写，当登记需要格式时。输入后出现的N变为S。将光标移至第一个病人必须在此输入格式，然后按F2-INS DIFFDATA插入手工分类F2+INSERT F

6、ORMULA 插入格式用光标使插入的病人格式生效按F光标停在LIN%处，2用、3和4健将光标移至需手工解析的工程处。输入完成后确定偏离值REJCT为0时按F10-OK，讲光标移至下一病人处，操作同上REJECT 偏离值 表示与100%的偏离值，各项淋巴细胞的百分数总和必须为100% 注意：只有偏离值为0时，输入才可被确认接受。AC：这是一个可以输入非典型型或病理细胞读数百分比的工程。 3 用健和将光标选择继续、确定、取消继续：返回手工解析画面，可以继续进行手工解析。 确定：更新更换的 注意：不要用仪器后面的主开关关闭仪器，否那么仪器有可能因为未冲洗管路而造成微孔管阻塞及读取室沉淀物的出现。 【

7、仪器保养】芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件5 记录保养日期及工程。 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件6 【目的】保证血细胞分析仪测定结果的准确性。 【适用仪器范围】血细胞分析仪。 【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。 【校准方法】(一)校准环境、仪器和试剂要求室温：15-32。海拔高度<2000米工作条件 湿度：<80。试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。校准品：为仪器配套产品，并在使用效期(三)计算与核对标准1计算出各项结果的均值和精密度，均值

8、应比日常检测报告多保存一位小数点。2检查精密度是否到达使用说明书上所示的精密度，如到达，继续下一步；否那么，停止校准，与维修人员联系。3计算出各项参数均值与定值之差的绝对值和相差的百分数，与校准标准(表11)进行比拟。4结果小于第一列数值，那么不需校准；结果大于第二列数值，需请维修人员处理；结果在芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件7第一列与第二列数值之间，需校准仪器。5如有自动校准功能，可按说明书进行。如没有此项功能，那么用定值除以均值，再乘以原校正系数即为新校正系数，输入仪器即完成校正。 表1【校验校准结果】1.按上述方法混匀第2管校准物后再在仪器上重复测定11次，按同样的方法计算，将

9、结果再次与校准标准核对，如合格，校准完毕，仪器方可使用。如不合格，应请厂方工程师维修、校准。2.仪器校准后补正值的计算公式：仪器可自动计算 新的补正值=当前补正值X平均补正率/100 当仪器出现以下情况显示所有校对错误，这时校对值的更换确认信息不能表示，需由维修工程师作故障检修。平均补正率>105 平均补正率<95 新的补正值>120 新的补正值<803.仪器故障检修后重复“操作步骤和“计算和核对标准重新校准和评价。 4书写和保存评价报告，交科室存档。芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件8 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件9 【目的】保证检验结

10、果的准确性和可比性。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【室计算均数+3SD和-3SD的数值，将数据重新设置在质控图中。4 在+2SD和-2SD的区间是偶然误差所带来的数值，是无意义的测量值，因此+2SD和-2SD的范围作为质控的根本范围。5 在质控图屏面的所示数据：FILE NO.：显示质控图的文件号码；Lot. NO.：质控文件中所设定的批号；N：当前正在绘制的质控数据的个数。质控工程：质控数据的管理图分成多个页面表示芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件10质控图屏面1/3:WBC、RBC、H

11、GB质控图屏面2/3：HCT、MCV、MCH质控图屏面3/3：MCHC、PLTLIMITUL：质控界限值的上限，测量值超出此界限为质控异常。目标值：质控的目标值。DATD：下线光标所示的图的质控数据。MEAN：当前所在绘制中的质控数据的平均值。下线光标：使用3健和4，可以左右移动下线光标所示的图的质控数据和测量日期将被表示在屏面上。 2.质控规那么12S：为警告规那么，提示有一水平质控值超出2S，发出警告；13S：失控规那么，提示有一水平质控值超出3S，提示随机误差增大造成的失控； 22S：失控规那么，是系统误差，有二种表现同一个水平的质控品连续2次控制值同方向超出+2S或-2S限值； 在1批

12、检测中，2个水平的质控值同方向超出+2S或-2S限值； R4S：失控规那么，在1批检测中，1 个水平控制品的控制值超出+2S限值，另1 个水平控制品超出-2S限值，提示随机误差增大造成的失控；41S：失控规那么，有连续4次的控制值超出+1S或-1S限值，是系统误差，有二种表现1 个水平控制品连续4次控制值超出+1S或-1S限值；2个水平控制品连续2次控制值同方向+1S或-1S限值；10X：失控规那么，有连续10次控制值在均数的一侧，是系统误差，有二种表现1 个水平的控制品连续10次的控制值在均值的一侧；2个水平的控制品连续5次的控制值在均值的一侧； 3.室3-4PCV、MCV、MCH、MCHC

13、 ： 4-5WBC： 8-10PLT： 10-15 【室 湿度：<80。海拔高度<1200M仪器空白值在允许范围内；试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件112质控样品的准备：1 从冰箱中取出质控物，放置至室温约30分钟，勿摇动。2 将质控物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。3 颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。5 瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。 2. 质控样本的测定1按下稳压电源3秒出现绿灯后，按“ON后立即启动电脑。2此时仪器将从“Start-up启动到“Check检查，再进行自检。仪器画面上出现Se

14、lf-test。3自检完成后，屏幕下方显示“Press ESC to contiue,按“F10或“ESC键，屏幕显示日期和时间，按“F10确认后，进入主菜单。进入第6项进行质控分析。即可看到准确，精密的质控报告。4在质控分析中，选择“1执行质控，屏幕会显示分三个窗口，各对应一个质控品的类型质控1质控2质控3，分别表示质控低值、中值、高值，每个窗口显示以下 均值：每个质控的均值，并被描绘成曲线。预期值：质控血样的预期值。可通过TAB键选择相应的质控窗口，即选择质控品1、2、3出现加重白色界面。5选择好后按下SAMPLE键即可开始测量，测试完毕后，每一项均值会依次出现在窗口中平均值的位置上假设仪

15、器红灯示警，那么所有参数都在范围外，应考虑进行校正。假设不想校正，那么必须按下F10-OK查看质控图，如想校正，按以下方法进行：校正：按下F2-CAL显示校正参数，使用左向箭头输入新得数值，按下ENTER键，依次按此方法输入全部校正数值。按F10确认或按下ESC取消。6质控测定在控后，才能测定病人标本。3.失控的原因与处理1 检查质控图或失控的规那么，确定误差的类型。系统误差或偏倚的失控：每天的质控值有定向的漂移或倾向性，并且随时间在增大，逐渐形成失控。随机误差的失控：表现较突然，失控的质控值相对于均值的离散度比往常大。2 误差类型和失控原因的关系造成系统误差的原因：使用不同批号的试剂、不同批

16、号的校准品、校正品过期或保存不妥造成校准值变化、校正值设定错误、试剂的质量或由于使用不当引起试剂变质、吸样器或稀释器校准或调试错误、仪器的故障、检验人员的变动等。造成随机误差的原因：试剂瓶或试剂管道中有气泡、电源电压不稳、检验人员操作不熟练、重现性差等。在检测中偶尔出现的不恒定因素。3 自动分析仪多工程检测系统常见的原因如果失控仅1个工程，在确定误差性质后，按照不同误差可能具有的问题去寻找原因。如果多个工程同时出现失控问题，应从出现问题的共性上考虑。芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件124 与近期变化有关的原因 5 确认解决问题，作好记录找出原因，经纠正后须重测定质控品，以“在控来确认问

17、题解决与否，在失控时测定的病人样本也须重测，应将出现的质控事件和纠正过程形成文件。4.作质控日记。5.定期随机抽查病历，综合分析病人的诊断、疗效与检验桔果的相关性。6.经常征求临床意见，了解检验结果与诊疗事件的相关性，使检验结果得到临床的认可。7.参加部、省临检中心的室间质评活动，保证检验结果的准确性和可比性。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件13 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件14 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，在与氰离子结合生成稳

18、定的氰化高铁血红蛋白HiCN;HiCN在波长540nm有吸收峰，可用校准的分光光度计进行直接定量测定，或用HiCN参考液进行比色法测定。试剂国 女：110150g/L男：120160g/L新生儿：170200g/L考前须知1 试剂盒存放于4冰箱避光，不可冻存高铁氰化钾复原，试剂褪色失效。2 吸样时，采样管必须插入试管底部液体中，防止气泡吸入，否那么影响测定结果。3 仪器使用过程中，注意检查“零点值飘移，假设“零点飘移绝对值大于2g/L，需调整零点旋钮使仪器显示回到“000值。临床意义Hb增多：可见于相对性增多，如严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢

19、进症危象、糖尿病酮症酸中毒等水分丧失所致血液浓缩；绝对性增多如缺氧所致促红素作用的胎儿、高原地区居民、阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、异常血红蛋白病，肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵巢癌、原因不明的真性红细胞增多症。 Hb减少：生理性减少见于婴儿3个月至15岁前儿童的红细胞生成相对缺乏、妊娠中后期血液稀释、老年人造血功能减低等生理性贫血；病理性减少见于红细胞生成减少再障、白血病等骨髓浸润、缺铁、铁粒幼细胞性贫血、巨幼细胞性贫血、红细胞破坏过多及失血。芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件15 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件16 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使

20、用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理血液经稀酸稀释后，成熟红细胞全部被溶解，注入计数池后，在显微镜下计数白细胞。试剂WBC稀释液：冰醋酸3ml 蒸馏水97ml10g/L亚甲蓝溶液3滴操作1 取1378小试管一支，加白细胞稀释液0.38ml2 用微量吸管准确吸取全血20ul,擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管中稀释液的底部，轻轻将血挤出，并吸取上层清液，洗微量吸管2次，最后轻摇动试管混匀。3 充池后，静置23分钟，待白细胞下沉。4 用低倍镜计数四角4个大方格儿童512*10/L 新生儿1520*10/L考前须知1 末梢血因循环、挤压等因素影响检验结果，最好取静

21、脉抗凝血做细胞计数；个别特殊需采末梢血时注意不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。2 大小方格新生儿、运动、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外线照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。2.病理性增加 类白血病、白血病急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代射性酸中毒、过敏等。芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件173.减少 伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布氏杆菌热、流感、麻疹、风疹、登革热、传染性肝炎亦可增多、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败

22、血症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。4.造血系统障碍所致减少 恶性贫血、非白血性白血病、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢Gaucher病、Felty综合症、Chediak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件18 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理将血片制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，检验者根据各类白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比照值报告。试剂1 瑞特染液：国 1000ml石炭酸 40ml煮沸，待冷备用II液：

23、亚甲蓝4g蒸馏水1000ml高锰酸钾2.4g煮沸，待冷备用操作1 采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜呈舌状、头、体、尾清晰可辨。2 推好的血膜在空气中晃动，以促使其快干。天气寒冷或潮湿时，应于37温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。3 染色：在枯燥血片上加0.8ml快速染液的A液35分钟后，在加快速染液的B液1.5ml，3060秒后，水洗待干。4 选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比例。参考值WBC分类：成人 N 0.500.70E 0.0050.05B 00.01L 0.200.40M 0.030.08考前须知芜湖市第二人民

24、医院检验科标准操作程序文件191 要防止重复计数，玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动。2 WBC大于20*10/L，应分类计数200个细胞。血细胞明显减少的血片，可检查多张血片。3白细胞形态变化较大，应经常由高年资检验人员进行核实，以减少误差。临床意义1 各类白细胞数量改变见血常规临床意义。2 中性粒细胞核左移周围血中杆状核粒细胞增多，并出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞。最常见于各种感染急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血性反响等，从核左移及有关参数可见感染程度及机体反响性。核左移伴有白细胞总数增高者，称为再生性左移、表示机体的反响性强、骨髓造血功能旺盛；核左移而白细胞总数不增高者，甚至减

25、少者，称为退行性左移，提示骨髓造血功能减低，粒细胞生成或成熟受阻。3 中性粒细胞核右移周围血中五叶核细胞增多大于0.05见于骨髓造血功能减退或缺乏造血物质。见于：营养性巨幼红细胞性贫血，疾病进行期突然出现核右移示预后不良，炎症恢复期一过性核右移为正常现象，使用抗代谢药物也可出现核右移。4 中性粒细胞毒性变化。在严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时可出现细胞大小不均、毒性颗粒、空泡等。5 异型淋巴细胞空泡型、不规那么型和幼稚型。在各种病毒感染、传染性单核细胞增多症异淋等常见，在疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件20 标准操作程序

26、芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件21 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理用等渗稀释液或生理盐水将血液稀释并充入计数池后，于显微镜下计数。试剂生理盐水操作1 取小试管一支，加生理盐水2ml2 用清洁枯燥微量吸管取全血10ul3 擦拭去管尖外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液洗吸管23次，立即混匀4 充池后待23分钟用高倍镜依次计数中央大方格 女：3.55.0*10/L男：4.05.5*10/L考前须知1 末梢血因循环、挤压等因素影响结果，要求取静脉抗凝血作细胞计数；个别特殊需采末梢血时注意

27、不能过分挤压，因此针刺深度必须适当。2 稀释液、小试管、计数板等均应清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。临床意义多种原因可造成红细胞生成和破坏的平衡失调，引起贫血和红细胞增多症。1.生理性减少 见于妊娠后期、6个月至2岁的婴幼儿等。2.相对性增多 主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。3.病理性减少 造血原料缺乏、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。4.代偿性增多 主要见于缺氧、新生儿、高原环境、一氧化碳中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。5.绝对性增多 克隆真性红细胞增多，非克隆性真性红细胞增多，与促红细

28、胞生成素产生过多有关，见于肾癌、肝细胞、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件22 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件23 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理将血液用适当的稀释液作一定量的稀释后，混匀注入计数池，在显微镜下计数PLT，在计算出每升血液中血小板数。试剂1 PLT稀释液草酸铵法草酸铵 1.0gEDTA-Na2 0.012g蒸馏水 加至100ml2 EDTA-K2抗凝剂或抗凝管操作1 于清洁试管中参加稀释液0

29、.38ml2 准确吸取全血20ul，擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释液内，立即充分混匀，待完全溶血后再次混匀1分钟3 取上述均匀的血小板悬液一滴，注入计数池内，静置1015分钟使血小板下沉4 用高倍镜计数中央大方格中五个中方格四角及中央内血小板5 计算：PLT/L=五个中方格内PLT总数*10参考值PLT：100300*10/L考前须知1 血小板稀释液，配成后立即过滤，防止微粒和细菌污染，试管及吸管必须清洁枯燥。2 末梢血因循环、挤压等因素影响检查结果，要求取静脉抗凝血做PLT计数；个别特殊需采末梢血时注意针刺深度，使血液通畅，不能挤压。拭去第一滴血后，首先采血做血小板测定，操作应迅速，防止

30、血小板聚集和破坏。采取标本后应尽快计数，以免影响结果。3 血液参加稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置1015分钟。室温高时注意保持计数池周围的湿度，以免水分蒸发而影响计数结果。4 计数时光线要适中，不可太强，应注意将有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别，附在血细胞旁的血小板不要漏数。临床意义血小板减少见于生成减少再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等、破坏增多原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、消耗过多DIC等、家族性血小板减少巨大血小板综合征等。芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件24血小板增多见于骨髓增生综合征慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症等、急性反响急性感染、急性失血、急

31、性溶血等及脾切除后。 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件25 目的判断骨髓红细胞系统造血情况，疗效观察。该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。原理网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆 新生儿：2%6%临床意义1 反映骨髓的造血功能：溶贫网织高达0.20，再障网织低于0.005，网织红细胞低于5*10/L为诊断再生障碍性贫血的标准之一。2 作为贫血治疗的疗效观察指标。3 作为观察病情的指标。质量控制1 用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干前方能参加血液，否那么可使血液凝固。染色时间一定要充足

32、。2 染色时温度控制在37度。3 染液与血液的比例以1：1为宜，严重贫血时，可适量增加血液的比例，制片时血膜不宜太薄或太厚，否那么会造成网织红细胞分布不均。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件26 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件27目的：鉴定人ABO血型 原理：根据IgM类抗原特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能够出现凝集反响的原理，用IgM类特异性标准血清与被检红细胞在盐水介质中反响或用标准红细胞与待检血清在盐水介质中反响室温。假设出现凝集现象，说明被检红细胞上有与血型抗体相对应的抗原或说明被检血清中有对应的血型特异性抗体，从而判断和鉴定被检者的血型。正向

33、定型用标准A、B、O型红细胞与被检血清反响，假设被检血清与型别的标准红细胞出现凝集，那么证明被检血清中存在着与该红细胞抗原相对应的抗体。反之，假设被检血清与型别的标准红细胞不出现凝集，证明被检血清中不存在与红细胞抗原相对应的血型抗体，以此反证被检者红细胞上抗原的型别。反向定型 试剂1. 生理盐水 2. AB标准血清 3. ABO标准血球 器材1. 离心机2. 1378试管 3. 试管架 4. 记号笔 5. 一次性滴管 6. 37恒温水浴箱 7. 玻片 8. 显微镜 9. 标本缸 标本的准备按血液标本的采集程序采集末梢血或抗凝动静脉血，用1毫升生理盐水配成5%的红细胞悬液备用。方法及结果判断取5

34、根试管，分别用记号笔标记；用一次性滴管按下表待检者的血球和血清一滴，再滴加一滴相应的标准血清和血球，混匀；3400转/别离心15秒后，取出试管轻摇并同时观察有无凝集；再放入水浴箱 反向定型芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件28如凝集较弱或正反定型不符；如果O型红细胞管出现凝集，表示受检者血清中可能含有不规那么抗体或亚型，应进一步检查和抗体筛选试验。常见错误分析在ABO血型定型试验中，技术上的错误与各种临床情况、疾病都能造成红细胞正反定型之间的矛盾。当与预期的互补结果不符时，首先应排除技术上的原因，主要有：1. 未按试剂说明书操作2. 标本混乱3. 未参加试剂或参加的比例不对4. 试剂过期

35、变质或受到污染以及效价未滴定包括生理盐水5. 离心的速度不够或过长6. 器材不清洁7. 离心过程中温度过高或反响温度过高8. 无视溶血现象的观察以及冷凝集素的作用。对少数凝集较弱的，应细心反复地进行试验，以排除技术上的因素，除外应考虑以下情况：1. 受检者的年龄是否偏小或偏大2. 受检者的丙种球蛋白是否偏低或受检者有高球蛋白血症等3. 是否反复屡次输血或孕产妇4. 受检者是否患有白血病、重症感染以及其他癌症等导致抗原的减弱、缺失5. 标本采集是否为输血后的或在输液管道中采集而致抗体减弱或标本溶血中和了试剂6. 是否为某重亚型或未知抗原。以上均需进一步鉴定。临床意义：1 输血治疗的首要步骤，同型

36、输血。2 器官移植，受者与供者血型相符才能移植。3 新生儿溶血。4 用于亲缘鉴定。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件29 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件30该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 原理疟疾发热病人血涂片染色检查,根据疟原虫形态报告检出疟原虫. 试剂 瑞特染液 操作方法 1. 薄血片法1) 以常规法推制成薄片2) 血膜完全枯燥后即可染色,染色方法同白细胞分类检查 3) 油镜观察血片,报告所见疟原虫种类和发育阶段 2. 厚血片法1) 在洁净的玻片上,滴患者血液2滴2) 用推

37、片角将血液由内向外转涂成直径约1cm,厚薄均匀的血膜,在室温中自然枯燥 3) 在枯燥的血膜上滴加蒸馏水数滴,完全覆盖血膜,溶血数分钟,脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色,倾去溶血液4) 不必待干,进行染色,染色法同薄血片法芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件31参考值 疟原虫:阴性 考前须知1. 采血时间:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血,此时,早期滋养体已发育至易于鉴别形态的晚期;恶性疟患者,应在发作后20小时左右采血.2. 厚血片的溶血要及时,厚血片的放置期限在夏天不超过48小时;冬季不超过72小时,否那么溶血不完全,会影响检验质量.3. 染色后,水洗时不要先倒去染液,应让清

38、水流进染液,使沉渣漂浮冲走.4. 薄片油镜检查,须找100或100以上个视野才能报告未检出疟原虫,厚血片须找20个以上视野.5. 疟原虫必须分类报告,找到环状体后,须再仔细寻找更为成熟的阶段,以便分类.如确实未找到更为成熟阶段的疟原虫,可报告检出环状体疟原虫. 6. 注意区别易于疟原虫混淆的其他物质. 临床意义 用于诊断疟疾芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件32 标准操作程序 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件33 该SOP变动程序本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 原理我国丝虫病病原体主要是斑氏丝虫及马来丝虫，均属

39、夜间周期型。采集晚10时至次晨2时血样，溶血沉渣镜检微丝蚴报告。 操作方法1 鲜血片法：鲜血一滴置于玻片中央，直接加盖玻片，在低倍镜下寻找活动的、蚯蚓样的微丝蚴。 2 厚血片法：1 取耳垂血23滴，置于载玻片中央。2 用推片角将血液由内向外转涂成2cm*3cm长椭圆形、厚薄均匀的血膜，自然枯燥。 3 在血膜片上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血数分钟。 4 待血膜呈乳白色后倾去水。5 在血膜未干时，镜检寻找微丝蚴。6 如需鉴定虫种，可在枯燥、固定、染色。 3 试管浓集法：1 自静脉采血12ml，立即放入含109mmol/L枸橼酸钠0.4ml的试管中，混合抗凝。 2 参加810ml蒸馏水，颠倒混

40、合，使红细胞完全溶解，然后以1500r/min离心35min. 3 倾去上清液，取沉渣镜检，寻找微丝蚴。如鉴定虫种，可枯燥、固定、染色。参考值血微丝蚴：阴性。 考前须知1 未染色标本应与棉花纤维鉴别，棉花纤维长短、大小不一致，且其中无体住细胞，芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件34不活动。2 采血时间以晚上912时为宜。采血前让患者躺卧片刻。3 对夜间采血有困难者采用诱出法，即在白天口服海群生26mg/kg,15分钟后取血检查。临床意义1 用于诊断丝虫病。2 丝虫病晚期由于淋巴管阻塞，微丝蚴不能进入血液，常致检验阴性。 芜湖市第二人民医院检验科标准操作程序文件35 标准操作程序 芜湖市第

41、二人民医院检验科标准操作程序文件36 指导血沉的测定。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。【方法原理】魏氏法Westergren法【实验器材】1.抗凝剂：109mmol/L(32g/L)枸椽酸钠溶液。2.真空负压管：内含0.4ml枸椽酸钠抗凝剂及采血针。3.DN2021-10血沉仪及随机原配血沉管【标本要求】静脉采血，血与抗凝剂的比例为4：1，采血后立即混匀。【操作程序】1.样本的验收、编号、登记。2.将样本充分混匀，用血沉管机配吸取混匀样本至刻度线。擦去管外附着的血液，将管直立在血沉仪孔内。3.记录时间，室温中静止30分钟